Xây dựng phương pháp phân tích imipenem và cilastatin trong thuốc tiêm bằng sắc kí lỏng tương tác thân nước

https://twitter.com/daykemquynhon
plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn
www.facebook.com/daykem.quynhon
http://daykemquynhon.blogspot.com
http://daykemquynhon.ucoz.com
Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 /
Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định
Từ kết quả khảo sát pha động, tôi đưa ra một số nhận xét sau:
- Về khoảng pH khảo sát:
IMI <strong>và</strong> CIL có nhiều dạng ion hóa tùy thuộc <strong>và</strong>o pH pha động. Theo B. Buszewski
[7], đối với các chất <strong>phân</strong> <strong>tích</strong> có nhiều dạng ion hóa, pH thường điều chỉnh để chất
<strong>phân</strong> <strong>tích</strong> chỉ tồn tại một dạng ion hóa duy nhất. IMI có pka1 = 3,2 <strong>và</strong> pka2 = 9,9 <strong>và</strong> CIL
có pk1 = 2,5 <strong>và</strong> pka2 = 9,14. Để chúng chỉ tồn tại ở một dạng ion hóa duy nhất (hoặc là
–NH3 + hoặc là –COO - ) thì pH sử dụng phải nhỏ hơn (pka1 – 2) hoặc lớn hơn (pka2 + 2),
tức là nằm ngoài khoảng pH từ 2 đến 8. Tuy nhiên ở các giá trị pH này, pha tĩnh silica
sẽ bị hòa tan tạo thành các khoảng trống trong cột [1],[15]. Do vậy, các khoảng pH < 2
<strong>và</strong> pH > 8 không được khảo sát trên cột Hypersil Silica.
Khi pH > 4-5, các nhóm –SiOH của pha tĩnh bị khử proton hóa làm cho bề mặt pha
tĩnh mang điện âm [19]. Đồng thời, IMI <strong>và</strong> CIL tồn tại ở dạng lưỡng cực –COO - <strong>và</strong> –
NH3 + . Khi đó, tương tác ion giữa bề mặt pha tĩnh mang điện âm <strong>và</strong> chất <strong>phân</strong> <strong>tích</strong> có
nhóm mang điện dương sẽ đóng vai trò quan trọng trong cơ chế tách của HILIC, kết
quả của tương tác này là làm tăng thời gian lưu của chất <strong>phân</strong> <strong>tích</strong>. Điều này đúng khi
tôi tiến hành khảo sát với đệm phosphat pH 6,8 <strong>và</strong> đệm acetat pH 4,75 trên cột Supelco
Ascentis. Do vậy trên cột Hypersil Silica, khoảng giá trị pH này không được khảo sát
nữa.
- Về loại pha động sử dụng:
Acid acetic <strong>và</strong> acid formic được khuyến cáo sử dụng trong HILIC do tan tốt trong
các dung môi hữu cơ, <strong>và</strong> đặc tính dễ hóa hơi, thuận tiện khi kết nối với detector khối
phổ. Tuy nhiên, do thời gian lưu của CIL <strong>và</strong> IMI quá dài nên tôi không chọn chúng để
khảo sát tiếp. Đệm phosphat nồng độ cao không được khuyến cáo sử dụng do dễ bị tủa
trong tỷ lệ cao ACN <strong>và</strong> không có khả năng hóa hơi nên không tương thích với LC-MS.
Tuy nhiên, đề tài sử dụng đệm phosphat nồng độ thấp (20 mM) <strong>và</strong> tỷ lệ ACN thấp
(60%), kết hợp với việc sử dụng detector mảng diod cho kết quả tốt về thời gian lưu <strong>và</strong>
khả năng tách hai chất. Do vậy, đệm phosphat pH 2,5 được lựa chọn để khảo sát tiếp.
Kết quả về thời gian lưu của CIL <strong>và</strong> IMI trên các pha động khác nhau có thể giải thích
DIỄN ĐÀN TOÁN - LÍ - HÓA 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN
như sau:
Thời gian lưu của chất <strong>phân</strong> <strong>tích</strong> giảm khi độ <strong>phân</strong> cực của pha động tăng lên [8].
Khi sử dụng dung dịch đệm, độ <strong>phân</strong> cực của pha động tăng so với khi sử dụng dung
21
MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM
HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)
https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/
DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN
Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú
www.facebook.com/daykemquynhonofficial
www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial