VARIABILIDAD GENÉTICA Y GRADO DE ENTRECRUZAMIENTO ...

Sin embargo los resultados no fueron satisfactorios y fue necesario cambiar las condiciones de
prueba. Se probó otro micro con las condiciones de un cóctel exitoso. para un micro con
tamaño similar (y así verificar que el ADN era amplificable). Fue probado con las condiciones
del micro üM07 del árbol Roble.
Ya con estas nuevas condiciones. se corrieron las muestras obtenidas de sangre de
aulladores. De nuevo no se obtuvieron resultados exitosos. Por lo tanto se realizaron nuevas
consideraciones y nuevas pruebas:
• Puede haber algún tipo de contaminación por células humanas. dada la alta homologia
que hay entre humanos y monos.
• Se está trabajando a un Tm muy bajo que da muy poca astringencia y por ende se
amplifica cualquier cosa que tenga algo de homología con el cebador. Por esta razón puede
darse el barrido y las múltiples bandas.
• Se deben manejar estas muestras de forma diferente para evitar contaminación. Es
posible que deban tratarse como se hace en los laboratorios dc genética de humanos.
Se deben usar un filtro en las puntas
Usar pipetas diferentes para el peR y para los geles.
Dejar un lugar único para la realización de los PCRs
Servir el control negativo al inicio, a parte y sin haber tocado los ADNs
Servir las muestras de ADN de último y lejos del control negativo
Usar siempre guantes nuevos para cada PCR
No tocar ninguno de los reactivos de ['CR sin guantes.
Informe proyecto variabilidad genética del mono aullador.julio 31 de 2005 41
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