VARIABILIDAD GENÉTICA Y GRADO DE ENTRECRUZAMIENTO ...

A partir de este momento se inició de nuevo el proceso de estandarización (ajuste de
temperaturas. magnesio y concentración de A DN) para cada uno de los micros. Se realizaron un
total de 31 PCR hasta llegar a obtener una banda definida en cada uno de los a seis individuos
de sangre. Este resultado se logró para 11 de los 13 microsatélitcs. Dos microsatélites no
amplificaron. Con estos resultados se hizo el paso ha acrilamida que es el que determina la
utilidad de las condiciones de amplificación o no.
La primera corrida en acrilamida mostró que aun eran necesarios más ajustes en todos los
mieras realizados. Estos fueron visualizados nuevamente en acrilamida y se observó que siete
de los II ya se visualizaban adecuadamente. Es decir que se puede hacer una asignación alélica
de acuerdo con lo que se observó. Los otros cuatro micros se continuaron ajustando. Dejando
quietas las condiciones para los siete estandarizados. fueron utilizadas las muestras de ADN de
las heces. Sin embargo, no se obtuvieron amplificados con ellas.
Fue necesario entonces iniciar un nuevo proceso de ajuste de las cantidades y concentración
pero solo del ADN obtenido a partir de heces, para buscar que se lograran amplificados.
Finalmente las muestras de las heces se están corriendo bajo los parámetros establecidos en
estos siete meses de trabajo. tras 110 PCR de ensayo. Con estos parámetros. se obtienen los
resultados menos negativos (para detalles ver informe preliminar).
CONCLUSIONES:
Durante todo este proceso se ha logrado establecer que el tiempo es un factor determinante
en el trabajo. Varias evaluaciones hechas a los ADNs mostraron como rápidamente se van
degradando. También es clave en el trabajo la forma de preservar las muestras ya que varias de
las conservadas a _80°C tenían hongos.
Informe proyecto variabilidad genética del mono aullador. julio 31 de :!OOS 42