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Biomonitorización de los efluentes de piscifactorías marinas instaladas en tierra...
Procesado de las muestras.- Los mejillones se diseccionaron in vivo y en frío al llegar
al laboratorio, extrayendo los hepatopáncreas y almacenándolos a -80ºC. Las muestras se
homogeneizaron con un buffer (100 mM NaCl, 25 mM HEPES, 0.1 mM EDTA and 0.1 mM
dithiotheritol) y un homogenizador Ultra-turrax (relación 1:5 de peso-volumen). Una fracción
de este homogeneizado se destinó al análisis de las proteínas totales (homogeneizado), Daño
de ADN y LPO. El resto se centrifugó para obtener la fracción S15 necesaria para el análisis
de las proteínas totales (S15), DBF, EROD, GPX, GR y GST. La concentración de proteínas
totales fue determinada según la metodología descrita por Bradford (1976) y expresada en
mg.mL -1 .
Análisis de biomarcadores.- Las metodologías de los distintos biomarcadores fueron,
con excepción de LPO, adaptadas por Martín-Díaz et al. (2007) (Tabla I) (Fig 2).
Figura 2.- Mapa de localización de las distintas granjas de rodaballo Gallegas y las estaciones
de muestreo respecto al emisario.
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