ferritina irma ct ref

FERRITINA IRMA CT
REF KP33CT
100
Italiano p. 3
English p. 8
Deutsh s. 13
Français p. 18
Español p. 23
KP33CT – FERRITINA IRMA
M99 – Rev.09 – 12/2004 – Pag. 1/32

Reagenti del Kit - Kit Reagents - Kit Reagenzien - Reactifs de la Trousse -
Reactivos del Kit.
Reag, Reac Quant, Cant Stato fisico,
Physical state,
Aggregatzustand,
État physique,
CT
CAL
CONJ I 125
WASH
Estado fisico
100 Pronte per l'uso, Ready for use,
Gebrauchsfertig, Prêt à l'emploi, Listo
7 x 1 mL
para el uso.
Pronto per l'uso, Ready for use,
Gebrauchsfertig, Prêt à l'emploi, Listo
para el uso.
1 x 50 mL Pronto per l'uso, Ready for use,
Gebrauchsfertig, Prêt à l'emploi, Listo
para el uso.
1 x 50 mL Conc, Konz
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DOSAGGIO IMMUNORADIOMETRICO PER LA DETERMINAZIONE QUANTITATIVA DELLA
FERRITINA NEL SIERO UMANO
PER USO DIAGNOSTICO IN VITRO
APPLICAZIONI CLINICHE
La molecola della Ferritina è costituita da 24 subunità proteiche, ciascuna con un peso molecolare di
20.000 D. La funzione primaria della Ferritina è quella di accumulare il ferro intracellulare proteggendo la
cellula dagli effetti tossici del metallo libero e costituendo una riserva di ferro rapidamente mobilizzabile.
La maggior parte della Ferritina nell'organismo si trova nelle cellule del fegato e nelle cellule del sistema
reticolo endoteliale di fegato, milza e midollo osseo, quantità minori si trovano nel cuore, nel pancreas e
nel rene. Piccole, ma significative quantità di Ferritina si trovano nel siero umano. La funzione della
Ferritina sierica non è nota, ma esiste una stretta correlazione tra la concentrazione nel siero di questa
proteina e i depositi di ferro dell'organismo: il dosaggio della Ferritina sierica rappresenta quindi il
metodo più semplice e meno invasivo per la sua valutazione. L'andamento delle concentrazioni della
Ferritina sierica riflette le modificazioni dell'equilibrio corporeo dovute all'età e al sesso. Per individui
normali, i livelli medi, lievemente più elevati alla nascita, si abbassano durante l'infanzia fino al
raggiungimento della pubertà. Successivamente, nei maschi, si ha un progressivo aumento dei depositi
corporei di ferro e, proporzionalmente, della ferritina sierica, mentre, nelle donne in età feconda, si
osservano valori più bassi e stabili ed un aumento della ferritinemia solo dopo la menopausa. Valori di
Ferritina inferiori alla norma indicano, con sicurezza, carenza di ferro e permettono la diagnosi
differenziale tra anemia sideropenica ed anemia dovuta ad altre cause. Il sovraccarico marziale, sia
esso dovuto ad aumentato assorbimento di ferro, come nell'emocromatosi idiopatica o a trasfusioni
multiple, determina un incremento della Ferritina sierica spesso molto superiore alla soglia dei valori
normali. Un aumento della Ferritinemia si osserva anche in altre condizioni patologiche quali: epatopatie,
processi infettivi ed infiammatori, leucemia, linfoma di Hodgkin ed altre forme neoplastiche.
PRINCIPIO DEL METODO
Il presente metodo utilizza due anticorpi monoclonali anti-Ferritina che riconoscono due epitopi diversi
della molecola. Un anticorpo è adsorbito su fase solida (provette sensibilizzate), l'altro, marcato con
Iodio 125, viene utilizzato come coniugato. Il campione da dosare e l'anticorpo marcato vengono incubati
contemporaneamente nella provetta sensibilizzata. In tal modo l'anticorpo marcato viene legato alla fase
solida mediante l'antigene presente nei calibratori o nel campione, in quantità direttamente proporzionale
alla concentrazione di quest'ultimo. Al termine dell'incubazione, l'eccesso dei reagenti rimasto in
soluzione viene rimosso mediante aspirazione e lavaggi. La radioattività residua nelle provette viene
misurata in un contatore di raggi gamma.
REAGENTI CONTENUTI NEL KIT: PREPARAZIONE E STABILITA'
− I reagenti sono sufficienti per 100 tubi.
− Il kit deve essere conservato a 2-8°C.
− La data di scadenza di ciascun reagente é indicata sulla rispettiva etichetta.
1 - CT Provette Sensibilizzate: 100 provette sensibilizzate con un anticorpo monoclonale anti-Ferritina
(topo). Le provette non utilizzate devono essere riposte nella loro custodia accuratamente richiusa a 2-
8°C.
2 - CAL Calibratori: 7 flaconi (1 mL) di Ferritina (fegato umano) in tampone fosfato e BSA alle seguenti
concentrazioni: 0, 5, 20, 50, 250, 1000 e 2000 ng/mL. Conservante: NaN3 (< 0.1%). Pronto per l'uso. Il
Calibratore è stato calibrato sulla preparazione di Standard Internazionale 94/572.
N.B.: verificare sempre l'esatta concentrazione sul foglio di C.Q.
3 - CONJ I 125 Coniugato Radioattivo: 1 flacone (50 mL) di 125 I-anti Ferritina monoclonale in tampone
fosfato e BSA. Contenuto di radioattività: 444 KBq. Conservante: NaN3 (< 0.1%). Pronto per l'uso e
colorato in rosso.
6 - WASH Soluzione di lavaggio (concentrata): 1 flacone (50 mL) di Tris HCl e Tween 20.
Conservante: NaN3 (< 0.1%). Prima dell'uso diluire la soluzione in rapporto 1:10 con H2O distillata. La
soluzione diluita è stabile 2 mesi a 2-8°C.
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MATERIALE NECESSARIO MA NON FORNITO
− Provette in plastica monouso (12x75 mm).
− Portaprovette.
− Micropipette automatiche a punte intercambiabili a volume variabile.
− Cilindro graduato.
− Dispensatore da 1 mL.
− Agitatore orbitale, regolabile a 150 rpm.
− Pompa aspirante oppure apparecchiatura automatica equivalente.
− Contatore gamma a scintillazione.
− Carta millimetrata.
− H2O distillata.
MATERIALE RADIOATTIVO
Radionuclide presente: I 125
INFORMATIVA (D.Lgs. 230/95 – D.Lgs. 241/00 art. 19) E NORME DI SICUREZZA E PREVENZIONE
Per ottenere risultati corretti e riproducibili, è necessario osservare le seguenti norme:
− Non mescolare reagenti di lotti differenti.
− Non usare i reagenti dopo la data di scadenza.
− Usare vetreria perfettamente pulita ed esente da contaminazioni di ioni metallici o sostanze
ossidanti.
− Usare acqua distillata, conservata in recipienti perfettamente puliti.
− Evitare accuratamente contaminazioni tra campioni; a tal fine è consigliabile usare pipette con
puntali monouso per ogni campione e per ogni reattivo.
− Rispettare i tempi di incubazione descritti nel procedimento operativo.
Con lo scopo di ridurre i rischi di tipo fisico, biologico e chimico, è necessario osservare le
seguenti norme di sicurezza:
− Utilizzare dispositivi di protezione individuale (es.: guanti monouso, camice, ecc.) durante la
manipolazione di materiale radioattivo e/o potenzialmente infetto e durante il dosaggio.
− Non pipettare i reagenti con la bocca.
− Non fumare, mangiare, bere o applicare cosmetici durante l'esecuzione del dosaggio.
− La manipolazione di sostanze radioattive deve essere eseguita in aree specificamente predisposte.
− Le sostanze radioattive devono essere conservate nei loro contenitori originali in un’area
specificamente predisposta.
− E’ necessario compilare un registro che indichi dettagliatamente l’ingresso, la conservazione e
l’eliminazione di tutto il materiale radioattivo ricevuto.
− E’ necessario eliminare immediatamente qualunque contaminazione radioattiva secondo le
procedure stabilite.
− I materiali di origine umana utilizzati nella preparazione del presente kit sono stati saggiati per la
presenza di HBsAg, anti-HIV e anti-HCV e sono risultati ripetutamente negativi. Comunque nessun
test attualmente disponibile garantisce l'assenza degli agenti virali responsabili della sindrome da
immunodeficienza acquisita, dell'epatite B ed epatite C. Tutti i reagenti contenenti materiale
biologico e tutti i campioni di siero umano devono essere considerati potenzialmente infettivi.
− Evitare la produzione di schizzi e la formazione di aerosol; qualora ciò si verificasse ripulire
accuratamente con ipoclorito di sodio ad una concentrazione del 3%. Il mezzo adoperato per la
pulizia deve essere trattato come residuo potenzialmente infetto ed eliminato secondo le modalità
opportune.
− La sodio azide contenuta come conservante in alcuni reagenti, può reagire con il piombo ed il rame
delle tubature formando azidi di metallo altamente esplosive. Per evitare la formazione e l'accumulo
di tali composti far scorrere abbondante acqua sui reagenti eliminati.
− I reagenti per cui non si fornisce la scheda di sicurezza non contengono sostanze chimiche
pericolose o se presenti, queste sono al di sotto dei limiti di concentrazione definiti nel D.Lgs.285/98
e nella direttiva CEE 91/155.
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− Ai sensi del D.L. italiano n. 22 del 05.02.97, che fa riferimento alle direttive CEE (91/156/CEE,
91/689/CEE, 94/62/CEE) tutti i rifiuti provenienti da lavorazioni manuali e/o in automatico sono
classificati rifiuti speciali pericolosi con codice di classificazione CER 180103 (rifiuti infetti o
potenzialmente infetti); devono quindi essere eliminati affidandoli a ditte autorizzate al ritiro ed allo
smaltimento.
− Tutti i rifiuti provenienti da lavorazioni con radioisotopi devono essere smaltiti affidandoli a ditte
autorizzate al ritiro in accordo a quanto previsto nel D.Lgs. 241/2000.
− L'acquisto, la detenzione, l'impiego e lo smaltimento di materiale radioattivo (sia solido che liquido)
sono soggetti alle disposizioni locali previste dalle autorità legislative.
La quantità di radioattività alla data di riferimento è specificata nell’etichetta esterna del kit.
RACCOLTA E PREPARAZIONE DEI CAMPIONI
Il dosaggio può essere effettuato su siero. I campioni fortemente lipemici od emolizzati devono essere
scartati. I campioni possono essere conservati a 2-8°C per 1-2 giorni; per periodi più lunghi conservarli a
-20°C. Assicurarsi che i campioni siano perfettamente limpidi prima di dosarli. Si consiglia di non
congelare e scongelare ripetutamente i campioni.
Campioni con contenuto presunto di Ferritina maggiore di 2000 ng/mL devono essere diluiti con il
Calibratore Zero. Si consiglia una diluizione 1:5 (20 SL di siero + 80 SL di Calibratore Zero).
PROCEDIMENTO OPERATIVO
− Attendere che i reagenti ed i campioni raggiungano la temperatura ambiente.
− Agitare i campioni per inversione prima dell'uso.
1 - Preparare le provette sensibilizzate per i Calibratori e i Campioni e provette non sensibilizzate per
l'Attività Totale.
2 - Dispensare 25 DL di ciascun Calibratore e dei Campioni nelle rispettive provette.
3 - Dispensare 500 DL di Coniugato Radioattivo in tutte le provette.
4 - Agitare manualmente il portaprovette. Evitare l'uso di vortex.
5 - Incubare per 45 minuti a temperatura ambiente, su agitatore orbitale (150 rpm).
6 - Aspirare accuratamente la miscela di incubazione da tutte le provette eccetto quelle dell'attività
totale.
7 - Lavare le provette 2 volte con 1 mL di Soluzione di Lavaggio diluita. Aspirare completamente il
liquido da tutte le provette mediante pompa aspirante, oppure decantare asciugando il bordo delle
provette su carta bibula.
8 - Misurare la radioattività presente nelle provette in un contatore gamma per 1 minuto. Si
raccomanda di controllare il fondo dello strumento prima di effettuare il conteggio. Per non variare
la sensibilità del sistema é necessario che il fondo sia ridotto al minimo oppure opportunamente
corretto.
SCHEMA DEL DOSAGGIO: vedi p. 31
CALCOLO DEI RISULTATI
Graficare la curva di taratura su carta millimetrata ponendo in ascissa le concentrazioni dei Calibratori
ed in ordinata i cpm corrispondenti oppure i rapporti B/T%.
Il Calibratore Zero deve essere considerato come la prima concentrazione della curva di calibrazione.
La lettura della dose dei campioni viene effettuata mediante interpolazione dei rispettivi cpm o
percentuali di legame sulla curva di taratura; nel caso di campioni diluiti occorre moltiplicare per il fattore
di diluizione.
Per calcolare le percentuali di legame (B/T%) relative a Calibratori e Campioni utilizzare la seguente
formula:
Cpm legati alla fase solida
B/T% = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ x 100
Cpm dell'Attività Totale
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ESEMPIO DI CALCOLO
I valori sotto riportati devono essere considerati unicamente un esempio e non devono essere utilizzati
in luogo dei dati sperimentali.
Descrizione cpm B/T % Ferritina
Attività Totale (T) 200000
Calibratore 0 ng/mL 150 0.075
Calibratore 5 ng/mL 600 0.3
Calibratore 20 ng/mL 2680 1.34
Calibratore 50 ng/mL 6000 3.0
Calibratore 250 ng/mL 22780 11.39
Calibratore 1000 ng/mL 60480 30.24
Calibratore 2000 ng/mL 80040 40.02
Campione 6800 3.4 70 ng/mL
VALORI NORMALI
I valori riportati nella tabella seguente sono soltanto indicativi. Si raccomanda a ciascun laboratorio di
stabilire i propri intervalli di riferimento.
Uomo 17 - 390 ng/mL
Donna:
- Premenopausa 10 - 90 ng/mL
- Menopausa 10 - 150 ng/mL
CARATTERISTICHE METODOLOGICHE
SPECIFICITÀ
Il presente metodo analitico non ha mostrato nessuna reazione crociata.
SENSIBILITÀ
La sensibilità é stata calcolata sulla curva di calibrazione ed espressa come minima dose
significativamente distinguibile dalla risposta del Calibratore Zero (valore medio + 3 D.S.). Tale dose é
risultata pari a 1.5 ng/mL.
PRECISIONE
La precisione é stata valutata misurando la variabilità intra-saggio ed inter-saggio su 3 sieri a differenti
concentrazioni di Ferritina.
Intra-saggio (Ripetibilità)
Siero Media ± D.S. C.V. Replicati
(ng/mL) % n.
a 32.6 ± 1.4 4.2 10
b 144.7 ± 7.3 5.0 10
c 373.7 ± 20.2 5.4 10
Inter-saggio (Riproducibilità)
Siero Media ± D.S. C.V. Dosaggi
(ng/mL) % n.
a 27.6 ± 2.05 7.4 10
b 160.5 ± 8.8 5.4 10
c 1120 ± 91.0 8.1 10
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ACCURATEZZA
L'accuratezza del metodo é stata valutata mediante il test di recupero ed il test di parallelismo:
Test di Recupero
Quantità scalari di Ferritina sono state aggiunte ad un siero normale e dosate.
Aggiunto Atteso Misurato Recupero
(ng/mL) (ng/mL) (ng/mL) %
S1 ---- 10 ----
S1 + 1000 1010 1025 101
S1 + 500 510 540 105
S1 + 250 260 245 94
S1 + 50 60 58 96
S1 + 20 30 31 103
Test di Parallelismo
Un siero ad elevato contenuto di Ferritina é stato dosato a varie diluizioni effettuate con lo Calibratore
Zero.
Diluizione Atteso Misurato
(ng/mL) (ng/mL)
S2 indiluito ---- 1493
1:2 746.5 730
1:4 373.2 421
1:8 186.6 181
1:16 93.3 101
1:32 46.6 45
1:64 23.3 24.7
1:128 11.6 12.5
EFFETTO GANCIO
Qualora dei campioni a contenuto di antigene molto elevato vengano dosati non diluiti in un metodo
“sandwich” ad incubazione singola, come quello utilizzato nel presente kit, si possono ottenere per
“Effetto Gancio” dei valori apparenti di concentrazione inferiori al reale. Il presente kit non dà luogo ad
“Effetto Gancio” fino ad una concentrazione di 10000 ng/mL.
11. LIMITI DEL DOSAGGIO
I risultati del dosaggio devono essere interpretati con cautela e convalidati da valutazioni cliniche ed
ulteriori prove diagnostiche
12. LEGENDA SIMBOLI: vedi p. 28
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IMMUNORADIOMETRIC ASSAY FOR QUANTITATIVE DETERMINATION OF FERRITIN IN HUMAN
SERUM.
FOR IN VITRO DIAGNOSTIC USE ONLY
CLINICAL APPLICATIONS
The Ferritin molecule consists of 24 protein subunits, each of them with molecular weight of 20 kDa.
Ferritin functions mainly as the intracellular site of iron storage (from which iron may be rapidly
mobilized), thereby protecting cells from the toxic effects of unbound iron. Most Ferritin in the body is
found in the liver cells as well as in the cells of the reticuloendothelial system of liver, spleen and bonemarrow.
Small amounts are also found in the heart, pancreas and kidneys. Small but significant amounts
of Ferritin are found in the human serum. The exact function of serum Ferritin is unknown but there is a
well established correlation between serum Ferritin and the body's iron stores. Serum Ferritin testing
thus represents the simplest and less invasive method in monitoring any iron store change in the body.
Ferritin serum levels are also affected by body changes due to age as well as sex. Average Ferritin
levels in normal subjects (slightly higher at birth) tend to decrease during childhood, until the age of
puberty is reached. From then on, a progressive increase of the body iron stores is observed in males,
with a proportional rise in serum Ferritin. Females in the reproductive age instead tend to have lower
amounts with more stable values. A Ferritin rise is only observed after menopause.
Ferritin levels below normal ranges clearly indicate a lack of iron and allow to differentiate iron deficiency
anemia from other forms of anemia. An iron overload, either due to an increase in iron uptake (as in
idiopathic hemochromatosis) or else due to multiple transfusions, causes serum Ferritin to rise, often
beyond normal ranges. High Ferritin levels are also observed for other clinical conditions such as liver
disease, infectious as well as inflammatory processes, leukemia, Hodgkin's disease and other forms of
malignancy.
PRINCIPLE OF THE ASSAY
The present method employs two anti-Ferritin monoclonal antibodies which recognize two different
epitopes of the molecule. One antibody is adsorbed in solid phase (coated tube), the other (labeled with
iodine-125) is used as conjugate. The sample to be tested and the labeled antibody are incubated
simultaneously in the coated tube. The amount of bound conjugate will thus be directly proportional to
the antigen concentration in calibrators and samples. At the end of the incubation, the unbound material
is removed by aspiration and washing. The radioactivity in the tubes is measured in a gamma counter.
REAGENTS PROVIDED WITH THE KIT: PREPARATION AND STABILITY
− The reagents are sufficient for 100 tubes.
− Store the kit at 2-8°C.
− The expiry date of each reagent is shown on the vial label.
1 - CT Coated Tubes: 100 tubes coated with mouse monoclonal anti-Ferritin antibody. Unused tubes
should be stored at 2-8°C in the appropriate bag and accurately sealed.
2 - CAL Calibrators: 7 vials (1 mL) of Ferritin (human liver) in phosphate buffer at the following
concentrations: 0, 5, 20, 50, 250, 1000 and 2000 ng/mL. Preservative: NaN3 (

− Orbital shaker, adjustable at 150 rpm.
− Aspiration pump or automated tube washing device.
− Scintillation gamma counter.
− Millimetric graph paper.
− Distilled H2O.
RADIOACTIVE MATERIAL
Radionuclide: 125 I
ITALIAN DECREES (D.Lgs. 230/95 – D.Lgs. 241/00 art. 19) AND RULES OF PREVENTION AND
SECURITY
In order to obtain correct and reproducible results, the following rules must be observed:
− Do not mix reagents of different lots.
− Do not use reagents beyond their expiry date.
− Use thoroughly clean glassware, free from metal ion contamination or oxidizing substances.
− Use distilled water, stored in perfectly clean containers.
− Carefully avoid any contamination among samples; for this purpose, disposable tips should be used
for each sample and reagent.
− Follow exact incubation times, as described in the "Assay Procedure".
In order to reduce physical, biological and chemical risks, the following precautions must be
observed:
− Use protective individual articles (ex.: disposable gloves, lab coats, etc.) while handling radioactive
materials and/or potentially infectious material as well as during the assay.
− Do not pipette reagents by mouth.
− Do not smoke, eat, drink or apply cosmetics during the assay.
− All radiological work should be done in a designated area.
− Radioactive materials should be stored in their original container in a designated area.
− A record book for logging receipt and disposal of all radioactive materials should be kept.
− Any radioactive spills should be taken care of immediately in accordance with established
procedures.
− All material of human origin used for the preparation of this kit was tested negative for HBsAg, anti-
HIV and anti-HCV. Since no test at present can guarantee complete absence of these viruses, all
samples and reagents containing biological material used for the assay must be considered
potentially infectious.
− Avoid splashing and aerosol formation; in such cases, carefully wash with a 3% sodium hypochlorite
solution. Any cleaning material used for that purpose must be treated as potentially infectious and
disposed accordingly.
− The sodium azide used as preservative in some reagents may react with lead and copper plumbing;
to prevent build-up of explosive metal azides, the reagents should be discarded by flushing the
drain with large amounts of water.
− The reagents for which a Safety Data Sheet is not supplied do not contain hazardous chemical
substances or, if they do, these are below the concentration limits established by the Italian decree
D.Lgs.285/98 in compliance with EEC directive 91/155.
− According to Italian decree D.L. no. 22 dated 05.02.97, in compliance with EEC directives
(91/156/EEC, 91/689/EEC, 94/62/EEC), all waste products originating from either manual and/or
automated processing are classified as hazardous special waste material (European classification
code 180103, infectious waste or potentially infectious waste). As such, they must be eliminated (by)
delegating them to special enterprises (companies), qualified for waste collection and disposal.
− All radioactive waste originating from either manual and/or automated processing, must be
eliminated delegating them to special enterprises, qualified for waste collection and disposal,
according to D.Lgs.241/2000.
− Acquisition, storage, use and disposal of radioactive material (liquid and solid) are subjected to
regulation and ordination of local authorities.
Radioactivity contents to the reference date is shown on the kit external label.
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SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION
The assay can be performed in serum. Highly lipemic or hemolyzed samples must be discarded. Keep
samples at 2-8°C for 1-2 days; for longer periods it is advisable to freeze samples at -20°C. Make sure
that samples are always perfectly clear before testing. Repeated freezing and thawing of samples should
be avoided.
Samples with Ferritin concentrations higher than 2000 ng/mL must be diluted with the Zero Calibrator.
We suggest 1:5 dilution (20 SL serum + 80 SL Zero Calibrator).
ASSAY PROCEDURE
− Allow reagents and samples to warm up at room temperature.
− Mix samples by inversion before use.
1 - Prepare coated tubes for Calibrators and Samples. Use uncoated tubes for Total Activity.
2 - Pipette 25 DL of each Calibrator and Sample into the corresponding tubes.
3 - Pipette 500 DL of Radioactive Conjugate into all tubes.
4 - Mix the test tube rack manually. Avoid vortex mixing.
5 - Incubate for 45 minutes at room temperature on an orbital shaker (150rpm).
6 - Carefully aspirate the incubation mixture from all tubes, except those for total activity.
7 - Wash the tubes twice with 1 mL of diluted Washing Solution. Aspirate all liquid from the tubes with
an aspiration pump, or decant by drying the edges of the tubes with blot-paper.
8 - Count the radioactivity in the tubes for 1 minute by using a gamma counter. We suggest to check
the background of the instrument before counting the assay. In order to avoid variations in the
sensitivity of the system, the background must be reduced to a minimum or adjusted properly.
ASSAY SCHEME: see p. 31
CALCULATION OF RESULTS
Draw a calibration curve on linear graph paper, by plotting the cpm (or B/T%) of each calibrator (y-axis)
against the relative concentration (x-axis).
Consider the Zero Calibrator as the first concentration of the calibration curve. Read the cpm or (B/T)%
of each sample and calculate the concentration by interpolating on the calibration curve; in case of
diluted samples multiply by the dilution factor.
Calculate each Calibrator and Sample percent binding (B/T%), by using the following formula:
Solid phase Cpm
B/T % = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ x 100
Total Activity Cpm
EXAMPLE OF CALCULATION
The values shown below must be considered as an example and must not be used in place of
experimental data.
Description cpm B/T % Ferritin
Total Activity (T) 200000
Calibrator 0 ng/mL 150 0.075
Calibrator 5 ng/mL 600 0.3
Calibrator 20 ng/mL 2680 1.34
Calibrator 50 ng/mL 6000 3.0
Calibrator 250 ng/mL 22780 11.39
Calibrator 1000 ng/mL 60480 30.24
Calibrator 2000 ng/mL 80040 40.02
Sample 6800 3.4 70 ng/mL
NORMAL VALUES
The values reported below are indicative. We suggest that each laboratory establishes its own normal
range.
Men 17 - 390 ng/mL
Women:
- Pre-menopause 10 - 90 ng/mL
- Menopause 10 - 150 ng/mL
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PERFORMANCES OF THE ASSAY
SPECIFICITY
No cross-reactions were observed with the present method.
SENSITIVITY
The sensitivity was calculated based upon the calibration curve and expressed as the minimal dose
showing a significant difference from the Zero Calibrator (mean value + 3 S.D.). This dose is 1.5 ng/mL.
PRECISION
Precision was evaluated upon intra- and inter-assay variability, in 3 sera at different Ferritin
concentrations.
Intra-assay (Repeatability)
Serum Mean ± S.D. C.V. Replicates
(ng/mL) % no.
a 32.6 ± 1.4 4.2 10
b 144.7 ± 7.3 5.0 10
c 373.7 ± 20.2 5.4 10
Inter-assay (Reproducibility)
Serum Mean ± S.D. C.V. Assays
(ng/mL) % no.
a 27.6 ± 2.05 7.4 10
b 160.5 ± 8.8 5.4 10
c 1120 ± 91.0 8.1 10
ACCURACY
Accuracy of the method was checked by recovery and parallelism tests:
Recovery Test
Known amounts of Ferritin have been added to a normal serum and tested.
Added Expected Measured Recovery
(ng/mL) (ng/mL) (ng/mL) %
S1 ---- 10 ----
S1 + 1000 1010 1025 101
S1 + 500 510 540 105
S1 + 250 260 245 94
S1 + 50 60 58 96
S1 + 20 30 31 103
Parallelism Test
A high Ferritin concentration serum was tested at different dilutions with the Zero Calibrator.
Dilution Expected Measured
(ng/mL) (ng/mL)
S2 undiluted ---- 1493
1:2 746.5 730
1:4 373.2 421
1:8 186.6 181
1:16 93.3 101
1:32 46.6 45
1:64 23.3 24.7
1:128 11.6 12.5
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HOOK EFFECT
Whenever samples at very high antigen concentrations are tested undiluted in a single-step "sandwich"
method, as in this kit, the "Hook Effect" can give concentration values apparently lower than the actual
values. This kit does not give "Hook Effect", up to a concentration of 10000 ng/mL.
LIMITS OF THE ASSAY
The results of the assay must be carefully interpreted and confirmed by clinical evaluations and further
diagnostic tests.
SYMBOLS LEGEND: see p. 28
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IMMUN-RADIOMETRISCHER ASSAY ZUR QUANTITATIVEN BESTIMMUNG DES FERRITIN IN
HUMANEM SERUM.
Für den Gebrauch in der IN-VITRO-DIAGNOSTIK
KLINISCHE ANWENDUNG
Das Ferritinmolekül besteht aus 24 Untereinheiten mit je einem Gewicht von 20000 D.
Die Hauptfunktion des Ferritins besteht darin, Eisen intrazellulär zu speichern. Dies bedeutet gleichzeitig
den Schutz der Zelle vor den Gifteffekten des freien Metalls und den Aufbau einer schnell
mobilisierbaren Eisenreserve.
Der höchste Ferritinanteil im Organismus befindet sich in den Leberzellen, im retikuloendothelialen
System der Leber, der Milz und des Knochenmarks. Kleinere Mengen befinden sich in Herz, Pankreas
und Nieren.
Kleine aber signifikante Mengen an Ferritin befinden sich im Serum. Die Funktion des Serum-Ferritins ist
nicht bekannt, es besteht aber eine enge Korrelation zwischen der Serumkonzentration dieses Proteins
und dem gespeicherten Eisen im Organismus. Für dessen Bewertung ist die Bestimmung des Ferritins
im Serum die einfachste und schnellste Methode.
Der Verlauf der Serumwerte des Ferritins spiegelt Alters- und geschlechtsbedingte Veränderungen des
Körpers wider. Normale Durchschnittswerte liegen bei der Geburt höher und sinken während der
Kindheit bis zur Pubertät ab. Bei Männern ist dann ein progressiver Anstieg des gespeicherten Eisens
und damit ein proportionaler Anstieg des Ferritins im Serum zu beobachten. Bei Frauen sind
gleichbleibend niedrige Werte im fruchtbaren Alter zu beobachten. Erst nach der Menopause ist ein
Ferritinanstieg im Serum zu verzeichnen.
Subnormale Ferritinwerte weisen mit Sicherheit auf Eisenmangel hin und erlauben eine
Differenzialdiagnose zwischen der Eisenmangelanämie und Anämien mit anderer Ursache.
Serumferritinwerte bis weit über der Norm finden sich bei Eisenanreicherung wie in Fällen von erhöhter
Resorption (idiopathische Hämochromatose) oder multipler Transfusion.
Einen Anstieg an Ferritin verzeichnet man auch bei pathologischen Zuständen wie Hepatopathien,
Entzündungen und Infektionen, Leukämie, Lymphogranulomatose (Hodgkin-Krankheit) und anderen
Neoplasien.
TESTPRINZIP
Der vorliegende Kit beruht auf einem immun-radiometrischen Assay (IRMA) nach dem Sandwich-
Prinzip. Es werden zwei monoklonale anti-Ferritin Antikörper verwendet, von denen einer an der festen
Phase haftet (beschichtete Röhrchen) und der andere mit 125-Jod (I 125 ) markiert ist. Das in den Proben
und Kalibratoren vorhandene Ferritin wird während der Inkubation gleichzeitig von beiden Antikörpern
gebunden. Am Ende der Inkubationszeit wird die ungebundene Fraktion durch Absaugen und Waschen
entfernt. Die auf der festen Phase zurückbleibende Radioaktivität ist direkt proportional zu der in den
Proben enthaltenen Ferritin Konzentration. Die in den Röhrchen vorhandene Radioaktivität wird mit
einem Gamma-Zähler gemessen.
INHALT DER TESTPACKUNG: VORBEREITUNG UND STABILITÄT
− Die Reagenzien reichen für 100 Tests.
− Die Testpackung bei 2 -8°C lagern.
− Die Verfallsdaten der einzelnen Reagenzien sind jeweils auf den Flaschenetiketten angegeben.
1 - CT Beschichtete Teströhrchen: 100 mit anti-Ferritin Antikörper (monoklonal, Maus) beschichtete
Teströhrchen. Die nicht verwendeten Teströhrchen müßen in der sorgfältig verschlossenen
Originalpackung bei 2-8°C aufbewahrt werden.
2 - CAL Kalibratoren: 7 Fläschchen (1 mL) enthalten Ferritin (Humanleber) in Phosphatpuffer und BSA
in den folgenden Konzentrationen: 0, 5, 20, 50, 250, 1000 und 2000 ng/mL. Konservierungsmittel: NaN3
(< 0.1%). Gebrauchsfertig.
Der Kalibrator ist auf den Internationalen Standard 94/572 geeicht.
N.B.: die genaue Konzentrierung im C.Q. Blatt immer nachprüfen.
3 - CONJ I 125 Radioaktiver Konjugat: 1 Fläschchen (50 mL) enthält 125 I markiertes Anti-Ferritin
(monoklonal) in Phosphatpuffer und BSA. Radioaktivität: 444 KBq. Konservierungsmittel: NaN3 (< 0.1%).
Gebrauchsfertig und rot gefärbt.
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6 - WASH Waschlösung (konzentriert): 1 Fläschchen (50 mL) enthält Tris-HCl-Puffer und Tween 20.
Konservierungsmittel: NaN3 (< 0.1%). Von Gebrauch die notwendige Menge im Verhältnis 1:10 mit
Reinstwasser verdünnen. Der verdünnte Waschlösung ist für 2 Monate bei 2-8°C zu lagern.
ERFORDERLICHES ZUBEHÖR (nicht mitgeliefert)
− Einmalreagenzröhrchen aus Kunststoff (12x75 mm).
− Teströhrchenhalter.
− Automatische Mikropipette mit Einmalspitzen und variabler Volumeneinstellung.
− Meßzylinder
− Dispenser zu 1 mL.
− Orbitalschüttler, einstellbar auf 150 U/min.
− Absaugpumpe oder gleichwertige automatische Waschvorrichtung.
− Gamma-Szintillationszähler.
− Millimeterpapier.
− Reinstwasser.
RADIOAKTIVES MATERIAL
Radionuclide: I 125
HINWEISE (ital. Verordnung D.Lgs. 230/95 – D.Lgs. 241/00 art. 19) UND NORMEN ÜBER
SICHERHEIT UND VORBEUGUNG
Um korrekte und reproduzierbare Resultate zu erzielen, sind die folgenden Vorschriften
einzuhalten:
− Reagenzien verschiedener Chargen nicht gegeneinander austauschen.
− Reagenzien nicht über das Verfallsdatum hinaus verwenden.
− Nur absolut saubere Glasbehältnisse verwenden, je frei von Metallionen, Verschmutzung oder
anderen oxidierenden Substanzen.
− Reinstwasser nur aus sauberen Glasbehältnissen verwenden.
− Kontamination zwischen den Proben vermeiden; deshalb nur Pipetten mit Einmalspitzen für jede
einzelne Probe und jedes einzelne Reagenz verwenden.
− Inkubationszeiten, gem. „Testdurchführung“, sollten genau beachtet werden.
Um physikalische, biologische und chemische Risiken zu mindern, sollten die folgenden
Sicherheitsnormen beachtet werden:
− Tragen von individueller Schutzbekleidung (z.B.: Einweghandschuhe, Laboranzüge, etc.) im
Umgang mit radioaktivem und/oder potentiell infektiösem Material während des gesamten Testes.
− Niemals mit dem Mund pipettieren.
− Im Labor nicht rauchen, essen, trinken oder schminken.
− Mit radioaktivem Material darf nur in dafür zugelassenen Räumen gearbeitet werden.
− Radioaktives Material sollte in der Originalverpackung nur an dafür bestimmten Plätzen gelagert
werden.
− Über Empfang und Verbrauch radioaktiven Materials ist Buch zu führen.
− Jede Kontamination sofort mit entsprechender Sorgfalt beseitigen.
− Die bei der Herstellung dieses Kits verwendeten Bestandteile humaner Herkunft sind auf das
Vorhandensein der HBsAg, anti-HIV und anti-HCV geprüft worden und sind wiederholt als negativ
bestätigt worden. Allerdings kann keine der derzeit bekannten Testmethoden mit absoluter
Sicherheit das Vorhandensein von Virusaktivitäten ausschliessen, die für AIDS und Hepatitis B und
C verantwortlich sind. Alle Humanserumproben, Reagenzien und die für die Testdurchführung
verwendeten Materialien humaner Herkunft sind daher als potentiell infektiös anzusehen.
− Spritzer und die Bildung von Aerosolen vermeiden: verschüttete Reagenzien mit 3%-iger
Natriumhypochlorit-Lösung entfernen. Das zur Reinigung verwendete Material als potentiell infektiös
behandeln und entsprechend entsorgen.
− Die Testkomponenten enthalten Natriumazid als Konservierungsmittel. Weil Natriumazid explosives
Blei- oder Kupferazid in Rohrleitungen bilden kann, wird empfohlen, den Abfluss, nach dem
Wegschütten von Substanzen die Natriumazid enthalten, vollständig mit Wasser durchzuspülen.
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− Liegt kein Sicherheitsdatenblatt bei, enthalten die Reagenzien keine gefährlichen, chemischen
Substanzen. Sollten sie sie beinhalten, liegen sie unterhalb der vorgeschriebenen
Konzentrationsgrenze, gem. italienische Verordnung D.Lgs 285/98 gem. EWG-Richtlinien 91/155.
− Entsprechend der italienischen Verordnung D.L. n. 22, vom 05.02.97, gem. EWG-Richtlinien
(91/156/EEC, 91/689/EEC, 94/62/EEC), sind alle Abfallprodukte, die bei manueller und/oder
automatischer Verarbeitung entstehen, als spezieller, gefährlicher Abfall zu deklarieren. Der
europäischer Zuordnungscode lautet 180103 (infektiöser oder potentiell infektiöser Abfall). Als
solcher muss er gekennzeichnet sein und durch zugelassene Unternehmen beseitigt werden.
− Alle radioaktiven Abfallprodukte dürfen nur durch Unternehmen entsorgt werden, die für eine
Übernahme und Abfallbeseitigung eine Genehmigung vorweisen können, gem. D.Lgs. 241/2000
beseitigt werden.
− Der Kauf, die Lagerung, die Verwendung und die Abfallbeseitigung von radioaktivem Material
(sowohl festem als auch flüssigem) unterliegen den jeweiligen behördlichen Bestimmungen und
Genehmigungen.
Das Bezugsdatum für den Radioaktivitätsgehalt befindet sich auf dem Etikett ausserhalb des
Kits.
PROBEN UND DEREN HANDHABUNG
Es kann Serum verwendet werden. Keine hämolytischen oder lipämischen Proben verwenden. Die
Proben können 1-2 Tage bei 2-8°C lagern; andernfalls bei -20°C tiefgefrieren. Wiederholtes Tiefgefrieren
und Auftauen vermeiden. Sollte man sich vor der Verwendung versichern, daß die Proben vollkommen
klar sind.
Proben mit einer höheren Konzentration von 2000 ng/mL sollten verdünnt werden (Nullkalibrator
verwenden). Wir empfehlen eine Verdünnung von 1:5 (20 SL Probe + 80 SL Nullkalibrator).
TESTDURCHFÜHRUNG
− Alle Reagenzien und Proben vor Gebrauch auf Raumtemperatur bringen.
− Die Proben vor Gebrauch leicht schütteln.
1 - Beschichtete Teströhrchen für die Kalibratoren und die Proben vorbereiten. Für die Totalaktivität
nicht beschichtete Einmalteströhrchen verwenden.
2 - Je 25 DL jedes Kalibratoren und der Proben in die entsprechenden Teströhrchen pipettieren.
3 - 500 DL des Radioaktiven Konjugats in alle Teströhrchen pipettieren.
4 - Von Hand den Teströhrchenhalter schütteln. Den Gebrauch des Vortex vermeiden.
5 - Bei Raumtemperatur 45 Minuten auf dem Orbitalschüttler (150 U/min) inkubieren.
6 - Mit Ausnahme der Teströhrchen für die Totalaktivität, die Inkubationslösung sorgfältig aus allen
Teströhrchen mittels einer entsprechenden Vorrichtung absaugen.
7 - Die Teströhrchen 2 mal mit je 1 mL verdünnte Waschlösung waschen. Die Lösung sorgfältig aus
allen Teströhrchen entweder mit einer Pumpe absaugen oder dekantieren, wobei die letzten
Tropfen am Röhrchenrand mit saugfähigem Papier abzufangen sind.
8 - Die Radioaktivität an der festen Phase in den Teströhrchen mit einem Gamma-Zähler 1 Minute
lang messen. Es wird empfohlen, den "Background" des Gerätes vor der Messung zu kontrollieren.
Um die Empfindlichkeit des Systems nicht zu beeinträchtigen, sollte auf einen möglichst geringen
"Background" geachtet, bzw. dieser entsprechend korrigiert werden.
INKUBATIONSSCHEMA: siehe S. 31
BERECHNUNG DER ERGEBNISSE
Auf Millimeterpapier werden auf der Abszisse die Konzentrationen der Kalibratoren gegen die
Impulsraten oder B/T% der Kalibratoren aufgetragen (Ordinate).
Der Nullkalibrator stellt den ersten Punkt auf der Kalibratorkurve dar.
Die Konzentrationen der Proben können dann durch Interpolation der entsprechenden Werte an der
Eichkurve abgelesen werden. Im Falle verdünnter Proben muß mit dem Verdünnungsfaktor multipliziert
werden.
Die Bindungskapazität (B/T%) der Kalibratoren und der Proben werden wie folgt berechnet:
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cpm der festen Phase
B/T % = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ x 100
cpm der Totalaktivität
BERECHNUNGSBEISPIELE
Die hier aufgeführten Werte dienen nur als Beispiel und sollten nicht anstelle der eigentlichen
Analysenresultate verwendet werden.
Beschreibung cpm B/T % Ferritin
Totalaktivität (T) 200000
Kalibrator 0 ng/mL 150 0.075
Kalibrator 5 ng/mL 600 0.3
Kalibrator 20 ng/mL 2680 1.34
Kalibrator 50 ng/mL 6000 3.0
Kalibrator 250 ng/mL 22780 11.39
Kalibrator 1000 ng/mL 60480 30.24
Kalibrator 2000 ng/mL 80040 40.02
Probe 6800 3.4 70 ng/mL
REFERENZBEREICH
Die in der folgenden Tabelle aufgeführten Werte sind lediglich richtungsweisend. Es wird jedem Labor
empfohlen, eigene Referenzbereiche zu erstellen.
Mann 17 - 390 ng/mL
Frau:
- Prämenopause 10 - 90 ng/mL
- Menopause 10 - 150 ng/mL
ASSAY CHARAKTERISTIK
SPEZIFITÄT
Bei der vorliegenden Analysenmethode wurden keine Kreuzreaktivitäten festgestellt.
EMPFINDLICHKEIT
Die Empfindlichkeit der Methode beträgt 1.5 ng/mL. Sie wurde an der Kalibratorkurve errechnet und ist
definiert als geringste, vom Nullkalibrator noch signifikant unterscheidbare Konzentration (Mittelwert + 3
Standardabweichungen).
PRÄZISION
Die Präzision wurde aus der Intra-Assay- und der Inter-Assay-Variation an 3 Seren unterschiedlicher
Konzentrationen von Ferritin ermittelt.
Intra-Assay (Wiederholpräzision)
Serum Mittelwert ± Standardabw. V.K. Replikate
(ng/mL) % Nr.
a 32.6 ± 1.4 4.2 10
b 144.7 ± 7.3 5.0 10
c 373.7 ± 20.2 5.4 10
Inter-Assay (Vergleichpräzision)
Serum Mittelwert ± Standardabw. V.K. Analysenläufe
(ng/mL) % Nr.
a 27.6 ± 2.05 7.4 10
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160.5 ± 8.8 5.4 10
c 1120 ± 91.0 8.1 10
RICHTIGKEIT
Die Richtigkeit wurde mittels Wiederfindungstest und Verdünnungstest bestimmt:
Wiederfindung
Steigende Mengen an Ferritin wurden einem Normalserum beigefügt und diese Proben analysiert.
Zugefügt Berechnet Gefunden Wiederfindung
(ng/mL) (ng/mL) (ng/mL) %
S1 ---- 10 ----
S1 + 1000 1010 1025 101
S1 + 500 510 540 105
S1 + 250 260 245 94
S1 + 50 60 58 96
S1 + 20 30 31 103
Verdünnung
Ein Serum mit einem hohen Gehalt an Ferritin wurde mit dem Nullkalibrator seriell verdünnt und diese
Proben analysiert.
Verdünnung Berechnet Gefunden
(ng/mL) (ng/mL)
S2 unverdünnt ---- 1493
1:2 746.5 730
1:4 373.2 421
1:8 186.6 181
1:16 93.3 101
1:32 46.6 45
1:64 23.3 24.7
1:128 11.6 12.5
HOOK-EFFEKT
Proben mit hoher Antigenkonzentration, die unverdünnt mit der Sandwich-Methode getestet werden,
können durch den sog. "Hook-Effekt" scheinbar niedrigere Konzentrationswerte aufweisen. Bis zu einer
Konzentration von 10000 ng/mL ist kein derartiger Effekt bei dem vorliegenden Kit festgestellt worden.
BESTIMMUNGSGRENZEN
Die Ergebnisse der Bestimmung müssen vorsichtig interpretiert und durch klinische Bewertungen und
weitere diagnostische Untersuchungen bestätigt
ZEICHENERKLÄRUNG: siehe S. 28
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DOSAGE IMMUNORADIOMETRIQUE POUR LA DETERMINATION QUANTITATIVE DE LA
FERRITINE DANS LE SERUM HUMAIN.
POUR DIAGNOSTIC IN-VITRO
APPLICATIONS CLINIQUES
La molécule de Ferritine est constituée de 24 sous-unités protéiques. Chacune de ces unités a un poids
moléculaire de 20000 Da.
La fonction primaire de la Ferritine est d'accumuler le fer intracellulaire en protégeant la cellule des effets
toxiques du métal libre et de constituer une réserve de fer rapidement disponible.
Dans l'organisme humain, la plus grande concentration de Ferritine se trouve dans les cellules du foie et
dans les cellules du système endothélial du foie, de la rate et de la moelle osseuse. Des quantités
moindres se trouvent aussi dans le coeur, le pancréas et les reins. Des quantités faibles, mais non
négligeables, de Ferritine se trouvent aussi dans le sérum humain. La fonction de la Ferritine sérique
n'est pas connue, mais il y a une relation très étroite entre la concentration de cette protéine dans le
sérum humain et les dépôts de fer de l'organisme. Le dosage de la Ferritine sérique représente donc la
méthode la plus simple et la moins invasive pour son évaluation. L'évolution des concentrations de
Ferritine sérique reflète les modifications de l'équilibre corporel dues à l'âge et au sexe. Pour des
individus normaux, les niveaux moyens, légèrement plus élevés à la naissance, diminuent pendant
l'enfance jusqu'à l'âge de la puberté. Ensuite chez les garçons, il y a une augmentation progressive des
dépôts corporels de fer et proportionnellement de la ferritine sérique. Chez la femme en âge de procréer,
on observe des valeurs plus basses et stables et une augmentation de la ferritinémie après la
ménopause. Des valeurs de Ferritine inférieures à la norme indiquent, avec certitude, une carence en fer
et elles permettent le diagnostic différentiel entre l'anémie suite à une carence en fer et l'anémie due à
d'autres raisons. La surcharge martiale, due à l'augmentation de l'absorption de fer, comme dans le cas
d'hémochromatose idiopathique ou de transfusions multiples, provoque une augmentation de la Ferritine
sérique parfois bien supérieure aux valeurs normales. Une augmentation de la Ferritinémie se remarque
aussi dans des conditions pathologiques comme: hépatopathies, processus infectieux et inflammatoires,
leucémie, lymphome de Hodgkin et d'autres formes néoplasiques.
PRINCIPE DU TEST
La présente méthode utilise deux anticorps monoclonaux anti-Ferritine qui reconnaissent deux épitopes
différents de la molécule. Un anticorps est adsorbé sur une phase solide (tubes sensibilisés) l'autre,
marqué a l'iode 125 est utilisé comme conjugué. L'échantillon à doser et l'anticorps marqué sont incubés
simultanément dans le tube sensibilisé. De cette façon, l'anticorps marqué est lié à la phase solide par
l'intermédiaire de l'antigène présent dans le calibrateur ou dans les échantillons en quantité directement
proportionnelle à la concentration de ce dernier. Au terme de l'incubation, l'excès de réactif resté en
solution est éliminé par aspiration et lavages. La radioactivité résiduelle dans le tube est mesurée dans
un compteur gamma.
REACTIFS CONTENUS DANS LA TROUSSE: PREPARATION ET STABILITE
− Les réactifs sont suffisants pour réaliser 100 tests.
− La trousse doit être stockée à 2-8°C.
− La date de péremption est indiquée sur l'étiquette de chaque réactif.
1 - CT Tubes Sensibilisés: 100 tubes sensibilisés avec l'anticorps monoclonal anti-Ferritine (souris).
Les tubes non utilisés doivent être conservés dans leur sachet soigneusement refermé à 2-8°C.
2 - CAL Calibrateurs: 7 flacons (1 mL) de Ferritine (foie humain) en tampon phosphate et BSA aux
concentrations suivantes: 0, 5, 20, 50, 250, 1000 et 2000 ng/mL. Conservateur: NaN3 (< 0.1%). Prêt à
l'emploi. La courbe de calibration a été calibrée sur le Standard International 94/572.
N.B.: vérifier toujours l’exact concentration sur la feuille de C.Q.
3 - CONJ I 125 Conjugué Radioactif: 1 flacon (50 mL) d'anti-Ferritine monoclonal marqué à l'I 125 en
tampon phosphate et BSA. Radioactivité: 444 KBq. Conservateur: NaN3 (

6 - WASH Solution de Lavage (concentrée): 1 flacon (50 mL) de Tris-HCl et Tween 20. Conservateur:
NaN3 (

− L'azide de sodium contenu comme conservateur dans certains réactifs peut réagir avec le plomb et
le cuivre des tuyauteries formant des produits hautement explosifs. Pour éviter la formation et
l'accumulation de tels composés, les réactifs doivent être abondamment dilués avec de l'eau lors de
leur élimination.
− Les réactifs pour lequels la fiche de sûreté n'est pas fournie, ne contiennent pas de substances
chimique dangereuses ou si elles sont présentes, ces dernierès sont au-dessous des limites de
concentrations definies dans D.Lgs. 285/98 et la directive CEE 91/155.
− Au sens du D.L. italien n.22 du 05.02.97, qui se réfère aux directives CEE (91/156/CEE,
91/689/CEE, 94/62/CEE) tous les déchêts provenants d'opérations manuelles et/ou en automatique
sont classifiés " déchêts spéciaux dangereux" avec un code de classification CER 180103; ils
doivent donc être éliminés en les donnant à des sociétés authorisées au prélèvement et à
l'élimination.
− Tout les déchêts provenants d’opérations avec radioisotopes doivent être éliminés utilizant
l’intermédiaire de sociétés authorisées au prélèvement et à l'élimination accordamment au D. Lgs
241/2000.
− L'achat, la détention, l’emploi et la distribution de matériel radioactif (qu'il soit solide ou liquide) sont
sujets aux dispositions locales prévues par la loi.
Le contenu radioactif à la date de réference est spécifié sur l’étiquette externe au kit.
RECOLTE ET PREPARATION DES ECHANTILLONS
Le dosage peut être réalisé sur sérum. Les échantillons fortement lipémiques ou hémolysés doivent être
éliminés. Conserver les échantillons à 2-8°C pendant 1-2 jours; pour des périodes plus longues, les
congeler à -20°C. Il est nécessaire de s'assurer de la limpidité des échantillons avant de les doser. Il est
conseillé de ne pas congeler et décongeler les échantillons plusieurs fois.
Les échantillons qui sont supposés avoir une concentration supérieure à 2000ng/mL doivent être
opportunément dilués avec le Calibrateur Zéro. Il est conseillé d'utiliser une dilution 1:5 (20 SL
Echantillon + 80 SL Calibrateur Zéro).
MODE OPERATOIRE
− Attendre que les réactifs et les échantillons atteignent la température ambiante avant de les utiliser.
− Homogénéiser les échantillons par inversion avant l'usage.
1 - Préparer les tubes pour les Calibrateurs et les Echantillons. Pour l'Activité Totale on peut utiliser
des tubes non sensibilisés.
2 - Pipetter 25 DL de chaque Calibrateur et Echantillon dans les tubes correspondants.
3 - Pipetter 500 DL de Conjugué Radioactif dans tous les tubes.
4 - Agiter manuellement le porte-tubes. Eviter l'emploi du vortex.
5 - Incuber pendant 45 minutes à température ambiante en agitateur orbital (150 rpm).
6 - Aspirer soigneusement le milieu de l'incubation dans tous les tubes, sauf dans ceux de l'activité
totale.
7 - Laver 2 fois en utilisant 1 mL de Solution de Lavage diluée. Aspirer complètement le liquide dans
tous les tubes avec pompe aspirante, ou décanter en ayant soin de sécher le bord des tubes sur
du papier absorbant.
8 - Mesurer la radioactivité présente dans les tubes avec un compteur gamma pendant 1 minute.
Nous recommandons de contrôler le bruit de fond du compteur gamma avant d'effectuer le
comptage. Afin de ne pas modifier la sensibilité du test, il est nécessaire que le bruit de fond soit
réduit au minimum ou corrigé de manière appropriée.
SCHEMA DU DOSAGE: voir p. 31
CALCUL DES RESULTATS
Dessiner la courbe de calibration sur du papier millimétré en portant en abscisse la concentration des
calibrateurs et en ordonnée les CPM correspondant ou les rapports B/T%.
Le Calibrateur Zéro doit être considéré comme la première concentration de la courbe de calibration.
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La lecture de la concentration des échantillons est effectuée par une interpolation des cpm ou
pourcentages de liaison sur la courbe de calibration. Pour les échantillons dilués, multiplier le résultat
par le coefficient de dilution.
Pour calculer les pourcentages de liaison (B/T%) des calibrateurs et des échantillons utiliser la formule
suivante:
Cpm liés à la phase solide
B/T % = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ x 100
Cpm de l'Activité Totale
EXEMPLE DE CALCUL
Les valeurs données ci-dessous sont données uniquement à titre indicatif et ne peuvent en aucun cas
être utilisées comme système de référence.
Description cpm B/T % Ferritine
Activité Totale (T) 200000
Calibrateur 0 ng/mL 150 0.075
Calibrateur 5 ng/mL 600 0.3
Calibrateur 20 ng/mL 2680 1.34
Calibrateur 50 ng/mL 6000 3.0
Calibrateur 250 ng/mL 22780 11.39
Calibrateur 1000 ng/mL 60480 30.24
Calibrateur 2000 ng/mL 80040 40.02
Echantillon 6800 3.4 70 ng/mL
VALEURS DE REFERENCE
Les valeurs reportées dans le tableau ci-dessous sont uniquement indicatives. Il est conseillé à chaque
laboratoire d'établir ses propres valeurs de référence.
Homme 17 - 390 ng/mL
Femme:
- Preménopause 10 - 90 ng/mL
- Ménopause 10 - 150 ng/mL
PERFORMANCES DU DOSAGE
SPECIFICITE
La présente méthode n'a donné lieu à aucune réaction croisée.
LIMITE DE DETECTION
La limite de détection, définie comme étant la plus petite concentration en Ferritine significativement
différente de la concentration zéro (Moyenne + 3 D.S.) est de 1.5 ng/mL.
PRECISION
La précision intra-essai et inter-essai a été déterminée avec 3 niveaux de concentration sérique en
Ferritine.
Intra-essai (Répétabilité)
Sérum Moyenne ± D.S. C.V. Effectif
(ng/mL) % n.
a 32.6 ± 1.4 4.2 10
b 144.7 ± 7.3 5.0 10
c 373.7 ± 20.2 5.4 10
Inter-essai (Reproductibilité)
Sérum Moyenne ± D.S. C.V. Essais
(ng/mL) % n.
a 27.6 ± 2.05 7.4 10
b 160.5 ± 8.8 5.4 10
c 1120 ± 91.0 8.1 10
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EXACTITUDE
L'exactitude de la méthode a été évaluée par un test de récupération et par un test de parallélisme:
Test de Récupération
Des quantités constantes de Ferritine ont été ajoutées à un sérum normal et les concentrations ont été
évaluées.
Ajoutées Attendues Observées Récupération
(ng/mL) (ng/mL) (ng/mL) %
S1 ---- 10 ----
S1 + 1000 1010 1025 101
S1 + 500 510 540 105
S1 + 250 260 245 94
S1 + 50 60 58 96
S1 + 20 30 31 103
Test de Parallélisme
Un sérum élevé en Ferritine a été dilué avec le Calibrateur Zéro et les concentrations ont été évaluées.
Dilution Attendues Observées
(ng/mL) (ng/mL)
S2 non dilué ---- 1493
1:2 746.5 730
1:4 373.2 421
1:8 186.6 181
1:16 93.3 101
1:32 46.6 45
1:64 23.3 24.7
1:128 11.6 12.5
HOOK EFFECT
Dans une méthode sandwich à incubation unique, un échantillon à concentration élevée en Ferritine
peut présenter un "Hook Effect" c'est-à-dire une concentration des valeurs observées inférieure à la
réalité. La présente méthode ne donne pas de "Hook Effect" jusqu'à une concentration de 10000 ng/mL.
LIMITES DU DOSAGE
Les résultats du dosage doivent être interprété avec précaution et convalidés par des valutations
cliniques et ultérieurs essai diagnostiques.
LEGENDE DES SIMBOLES: voir p. 28
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ENSAYO INMUNORADIOMÉTRICO PARA LA DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE LA FERRITINA
EN SUERO HUMANO
PARA USO DIAGNÓSTICO IN VITRO
APLICACIONES CLÍNICAS
La molécula de la Ferritina está compuesta por 24 subunidades proteicas, cada una con un peso
molecular de 20000 D.
La función principal de la Ferritina es acumular el hierro intracelular protegiendo la célula de los efectos
tóxicos del metal libre y constituyendo una reserva de hierro rápidamente movilizable. La mayor parte de
la Ferritina en el organismo, se encuentra en las células del hígado y en las células del sistema retículoendotelial
de hígado, bazo y médula ósea, cantidades menores se encuentran también en el corazón,
en el páncreas y en el riñón. Pequeñas, pero significativas, son las cantidades de Ferritina que se
encuentran en el suero humano. La función de la Ferritina sérica no es conocida, pero existe una
estrecha correlación entre la concentración en el suero de esta proteína y los depósitos de Hierro del
organismo: la determinación de la Ferritina sérica representa entonces, el método más simple y menos
invasivo para su evaluación.
La variación de las concentraciones de la Ferritina sérica refleja las modificaciones del equilibrio
corporal debidas a la edad y al sexo. En individuos normales, los niveles medios, levemente elevados al
nacer, descienden durante la infancia hasta que se alcanza la pubertad. Sucesivamente en los hombres
se tiene un progresivo aumento de los depósitos corpóreos de hierro y proporcionalmente de la ferritina
sérica, mientras que en las mujeres de edad fecunda se observan valores más bajos y estables y un
aumento de la ferritinemia sólo después de la menopausia.
Valores de Ferritina inferiores al normal, indican, con seguridad, carencia de hierro y permiten el
diagnóstico diferencial entre anemia sideropénica y anemia debida a otras causas.
La sobrecarga de hierro, ya sea debida al aumento de absorción, como en la hemocromatosis
idiopática, o a transfusiones múltiples, determina un incremento de la Ferritina sérica, a veces muy
superior al umbral de los valores normales. Un aumento de la Ferritinemia se observa también en otras
condiciones patológicas como: hepatopatías, procesos infectivos e inflamatorios, leucemia, linfoma de
Hodgkin y otras formas neoplásicas.
PRINCIPIO DEL MÉTODO
El presente kit es un método de valoración inmunoradiométrico (IRMA). Se utilizan dos anticuerpos
monoclonales anti-Ferritina distintos, que reconocen dos epítopos diferentes de la molécula. Uno
absorbido en la fase sólida (tubos sensibilizados) y el otro, marcado con yodo 125, se utiliza como
conjugado. Las muestras a determinar y el anticuerpo marcado se incuban al mismo tiempo en los tubos
sensibilizados. De este modo el anticuerpo marcado se une a la fase sólida mediante el antígeno
presente en el calibrador o en la muestra, en una cantidad directamente proporcional a la concentración
de este último. Al terminar la incubación, el exceso de reactivo que quede en la solución es eliminado
mediante aspiración y lavado. La radioactividad residual de los tubos se medirá en un contador de
radiación gamma.
REACTIVOS CONTENIDOS EN EL KIT: PREPARACIÓN Y ESTABILIDAD
− Los reactivos son suficientes para 100 tubos.
− El kit debe conservarse a 2-8°C.
− La fecha de caducidad de cada reactivo está indicada en su etiqueta.
1 - CT Tubos Sensibilizados: 100 tubos sensibilizados con anticuerpo monoclonal anti-Ferritina
(ratón). Los tubos no utilizados deben guardarse a 2-8°C, en su bolsa cuidadosamente cerrada.
2 - CAL Calibradores: 7 frascos (1 mL) de Ferritina (hígado humano) en tampón fosfato y BSA (1 mL) a
las siguientes concentraciones: 0, 5, 20, 50, 250, 1000 y 2000 ng/mL. Conservante: NaN3 (< 0.1%)..
Listo para el uso. Los Calibradores han sido calibrados con las preparaciones de Standard Internacional
94/572
N.B.: Verificar siempre la concentración exacta en la hoja del C.C.
3 - CONJ I 125 Conjugado Radioactivo: 1 frasco (50 mL) de 125 I-Anti-Ferritina monoclonal en tampón
fosfato y BSA. Conservante: NaN3 (

6 - WASH Solución de Lavado (concentrada): 1 frasco (50 mL) de Tris-HCl y Tween 20. Conservante:
NaN3 (< 0.1%). Antes el uso, diluir la solución en la proporción 1:10 con H2O destilada. La solución
diluida es estable durante 2 meses a 2-8°C.
MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO
− Tubos de plástico desechables (12 x 75 mm).
− Gradillas.
− Micropipetas automáticas con puntas monouso de volumen variable.
− Cilindro graduado.
− Dispensador de 1 mL.
− Agitador orbital, regulable a 150 rpm.
− Bomba aspirante o equipo automático para el lavado de los tubos.
− Contador gamma de centelleo.
− Papel milimetrado.
− H2O destilada.
MATERIAL RADIOACTIVO
Radionúclido presente: I 125
NOTA INFORMATIVA (D.L. 230/95 – D.L. 241/00 art. 19) Y NORMAS DE SEGURDAD Y
PREVENCIÓN
Para conseguir unos resultados correctos y reproducibles, es necesario observar las siguientes
reglas:
− No mezclar los reactivos procedentes de lotes distintos.
− No utilizar los reactivos después de la fecha de caducidad.
− Utilizar material de vidrio perfectamente limpio y libre de contaminación de iones metálicos o
sustancias oxidantes.
− Utilizar agua destilada, conservada en recipientes perfectamente limpios.
− Evitar cuidadosamente que las muestras se contaminen entre ellas; para este fin, se aconseja
utilizar pipetas con puntas monouso para cada muestra y para cada reactivo.
− Respetar los tiempos de incubación descritos en el procedimiento operativo.
Al fin de evitar contaminaciones personales y del medio ambiente, es indispensable observar las
normas de seguridad siguientes:
− Utilizar medios de protección individuales (guantes monouso, batas, etc) durante la manipulación de
materiales que puedan estar infectados, así corno durante el ensayo.
− No pipetear los reactivos con la boca.
− No fumar, comer, beber o aplicarse cosméticos durante la ejecución del ensayo.
− La manipulación de sustancias radioactivas debe realizarse en zonas específicamente preparadas.
− Las sustancias radioactivas deben conservarse en sus viales originales en zonas específicamente
preparadas.
− Es necesario hacer un registro que indique detalladamente la entrada, conservación y eliminación
de todo el material radioactivo recibido.
− Es necesario eliminar inmediatamente cualquier contaminación radioactiva según los
procedimientos establecidos.
− En el material de origen humano utilizado en la preparación del presente kit se ha ensayado la
presencia de HBsAg, anti-HIV y anti-HCV, siendo el resultado repetidamente negativo. De todos
modos ningún test actualmente disponible, garantiza la ausencia de los agentes virales
responsables del Síndrome de Inmuno-deficiencia adquirida (SIDA) y de la Hepatitis B y C. Todas
las muestras de suero humano y los reactivos con contenido biologico utilizados para el ensayo
deben considerarse potencialmente infecciosos.
− Evitar la producción de chorros y la formación de aerosoles; en este caso, es necesario limpiar
cuidadosamente con hipoclorito a una concentración del 3%. El medio utilizado para la limpieza
debe ser tratado corno si fuera un residuo potencialmente infeccioso y, por lo tanto, debe eliminarse
conforme a las modalidades más oportunas.
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− La azida sódica contenida como conservante en algunos reactivos, puede transformarse en azida
de plomo o de cobre en los desagües; estas azidas pueden explotar por percusión. Para prevenir la
formación y la acumulación de estos compuestos, se deja correr bastante agua en el desagüe
después de haber eliminado las soluciones que contienen azida sódica.
− Los reactivos para los cuales no se suministra hoja de datos de seguridad, no contienen sustancias
químicas peligrosas o si las contienen, están por debajo de los límites de la concentración
establecidos por el decreto italiano D.Lgs 285/98 de conformidad con la directiva de la CEE 91/155.
− De acuerdo con el decreto italiano D.L. n°22, del 05/02/97, en cumplimento de las directivas de la
CEE (91/156/EEC, 91/689/EEC, 94/62/EEC), todos los desechos originados por el procesamiento
tanto manual como automàtico deben clasificarse como material de desecho peligroso (código de
clasificación CER 180103). Por lo tanto debe eliminarse mediante la delegación a empresas
autorizadas para la recogida y eliminación de este tipo de desechos.
− Todos los desechos provenientes de ensayos con radioisótopos deben eliminarse confiándolos a
empresas autorizadas de acuerdo a lo previsto en el D.L. 241/2000.
− La compra, almacenamiento, utilización y venta del material radioactivo (sólido o líquido) quedan
sujetos a las disposiciones y normas locales, previstas por la autoridad y legislación vigentes.
La cantidad de radioactividad en la fecha de referencia está especificada en la etiqueta
externa del kit.
RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS
El ensayo puede efectuarse en suero. Las muestras fuertemente lipémicas o hemolizadas deben
descartarse. Las muestras pueden conservarse a 2 - 8°C durante 1-2 días; para periodos más largos,
conservarlas a -20°C. Debiendo estar dichas muestras perfectamente limpias antes de dosificarlas. Se
aconseja no congelar y descongelar repetidamente las muestras.
Las muestras con presuntas concentraciones superiores a 2000 ng/mL, deben ser oportunamente
diluidas con el Calibrador Cero. Se aconseja una dilución 1:5 (20 SL muestra + 80 SL Calibrador Cero).
PROCEDIMIENTO OPERATIVO
− Esperar que los reactivos y las muestras alcancen la temperatura ambiente.
− Agitar las muestras por inversión antes del uso.
1 - Preparar los tubos para Calibradores y Muestras. Para la Actividad Total se pueden utilizar tubos
no sensibilizados.
2 - Pipetear 25 DL de cada Calibrador y Muestra en los tubos correspondientes.
3 - Pipetear 500 DL de Conjugado Radioactivo en todos los tubos.
4 - Agitar manualmente la gradilla. Evitar el uso del vortex.
5 - Incubar 45 minutos a temperatura ambiente con agitación orbital (150rpm).
6 - Aspirar cuidadosamente la mezcla de la incubación en todos los tubos, excepto los de la actividad
total.
7 - Lavar los tubos 2 veces con 1 mL de Solución de Lavado diluida. Aspirar cuidadosamente el
líquido en todos los tubos mediante bomba aspirante, o decantar secando los tubos boca abajo
sobre papel secante.
8 - Medir la radioactividad presente en los tubos en un contador gamma durante 1 minuto. Se
recomienda controlar el fondo del instrumento antes de realizar el cómputo. Para no variar la
sensibilidad del sistema es preciso que el fondo se reduzca al mínimo o bien se corrija
oportunamente.
ESQUEMA DEL ENSAYO: ver p. 31
CÁLCULO DE LOS RESULTADOS
Dibujar la curva de calibración en un papel milimetrado poniendo en el eje de abcisas las
concentraciones de los calibradores y en el eje de ordenadas las cpm correspondientes o
alternativamente la relación B/T %.
El Calibrador cero debe considerarse como la primera concentración de la curva de calibración.
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La concentración de las muestras se obtiene por interpolación de sus respectivas cpm o porcentajes de
unión en la curva de calibración. En el caso de muestras diluidas debe multiplicarse por el factor de
dilución.
Para calcular los porcentajes de unión (B/T%) relativos a los calibradores y a las muestras se utiliza la
siguiente fórmula:
Cpm unidas a la fase sólida
B/T % = ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ x 100
Cpm de la Actividad Total
EJEMPLO DE CÁLCULO
Los valores siguientes deben considerarse únicamente como un ejemplo, y no deben ser utilizados en
sustitución de los datos experimentales.
Descripción cpm B/T % Ferritina
Actividad Total (T) 200000
Calibrador 0 ng/mL 150 0.075
Calibrador 5 ng/mL 600 0.3
Calibrador 20 ng/mL 2680 1.34
Calibrador 50 ng/mL 6000 3.0
Calibrador 250 ng/mL 22780 11.39
Calibrador 1000 ng/mL 60480 30.24
Calibrador 2000 ng/mL 80040 40.02
Muestra 6800 3.4 70 ng/mL
VALORES NORMALES
Los valores de la siguiente tabla, son sólo indicativos. Se recomienda que cada laboratorio establezca
sus propios intervalos de referencia.
Hombre 17 - 390 ng/mL
Mujer:
- Premenopausia 10 - 90 ng/mL
- Menopausia 10 - 150 ng/mL
CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
ESPECIFICIDAD
El presente método analítico no ha evidenciado ninguna reacción cruzada.
SENSIBILIDAD
La sensibilidad se ha calculado en la curva de calibración y se expresa como mínima dosis
significativamente distinta de la respuesta del Cero Calibrador (valor medio + 3 D.S.). Dicha dosis ha
resultado igual a 1.5 ng/mL.
PRECISIÓN
La precisión se ha valorado midiendo la variabilidad intra-ensayo e inter-ensayo de 3 sueros con
distintas concentraciones de Ferritina.
Intra-ensayo (Repetibilidad)
Suero Media ± D.S. C.V. Replicados
(ng/mL) % n.
a 32.6 ± 1.4 4.2 10
b 144.7 ± 7.3 5.0 10
c 373.7 ± 20.2 5.4 10
Inter-ensayo (Reproducibilidad)
Suero Media ± D.S. C.V. Ensayos
(ng/mL) % n.
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a 27.6 ± 2.05 7.4 10
b 160.5 ± 8.8 5.4 10
c 1120 ± 91.0 8.1 10
EXACTITUD
La exactitud del método se ha controlado mediante el test de recuperación y de paralelismo:
Test de Recuperación
Cantidades escalonadas de Ferritina se han añadido a un suero normal y determinado.
Añadido Previsto Medido Recuperación
(ng/mL) (ng/mL) (ng/mL) %
S1 ---- 10 ----
S1 + 1000 1010 1025 101
S1 + 500 510 540 105
S1 + 250 260 245 94
S1 + 50 60 58 96
S1 + 20 30 31 103
Test de Paralelismo
Un suero con elevado contenido de Ferritina se ha ensayado a varias diluciones efectuadas con el
Calibrador Cero.
Dilución Previsto Medido
(ng/mL) (ng/mL)
S2 no diluido ---- 1493
1:2 746.5 730
1:4 373.2 421
1:8 186.6 181
1:16 93.3 101
1:32 46.6 45
1:64 23.3 24.7
1:128 11.6 12.5
EFECTO GANCHO
Cuando muestras con un contenido de antígeno muy elevado se ensayan sin diluir con un método
"sandwich" de incubación única, como el utilizado en el presente kit, se pueden obtener por "Efecto
Gancho" valores aparentes con concentraciones inferiores a las reales. En el presente kit no se da
"Efecto Gancho" hasta una concentración de 10000 ng/mL.
LIMITES DE LA DOSIFICACIÓN
Los resultados de la dosificación dében ser interpretados con cautela y convalidados por valuaciones
clinicas y con ulteriores pruebas diagnósticas.
LEYENDA S]MBOLOS: ver p. 28
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12. SIMBOLI, SYMBOLS, SYMBOLES, SÍMBOLOS, SÍMBOLOS, SYMBOLE, ^_`abcd, SYMBOLIT,
SYMBOLER
EN 980 - EDMA
REF codice di riferimento o di ordine / reference or order code / Référence ou numéro
de commande / referencia o número de pedido / referência ou número da
encomenda / Referenz oder Bestellnummer / ijklimn opqrmstqn u ovpvwwxyzvn /
Refarans veye sipari{ numars| / referen}ní nebo objednací }íslo
LOT Lotto / lot / Lot / lote / lote / charge / ovptzkv / parti / šar e
Data di scadenza / expiry date / date d’expiration / Fecha de caducidad / Data de
vencimento / Verfallsdatum / ÄSxpqSÅszv yuÇÅn / Son kullanma targhi / datum
expirace
IVD Per uso diagnostico in-vitro / For in-vitro diagnostic use / Pour diagnostic in-vitro /
Para uso diagnóstico In-vitro / aplicação do diagnóstico In-vitro / Für den
Gebrauch in der IN-VITRO-DIAGNOSTIK / wlv in vitro klvwsjÑtliu ÖpuÑÅ / in –
vitro diagnostik kullan|m / pro pou ití in-vitro
100
Marchio CEE secondo le direttive IVD 98/79 CEE / CE marking according to IVD
guidelines 98/79 EC / marquage CE conforme aux directives IVD 98/79 EC /
marcado CE según directiva de IVD 98/79 CE / marcação-CE segundo a
directriz-IVD 98/79 / CE-Markierung bei Erfüllung der IVD Richtlinie 98/79 EG /
áÅSvsÑÅ CE àâÑxl iqlsqtliun qkÅwzvn IVD 98/79 EC / 98/79 EC IVD tüzüäüne
göre CE i{areti / CE ozna}ení dle IVD 98/79 EU
Conservare a 2-8°C / keep at 2-8°C / conserver à 2-8°C / Conservar a 2-8°C /
conservar a 2-8°C / Lagerung bei 2-8°C / ãåyvÇÅ Ñtqçn 2-8°C / 2-8°C da
saklay|n|z / skladovat péi 2-8°C
Fabbricante / Manufacturer / Fabriquant / produzido por / Fabricante / produkt der
/ ivtvÑixçâèxtvl vom / taraf|ndan üretilmi{tir / výrobce
Rischio biologico / Biohazard / Risque Biologique / …… / Riesgo Biológico /
………………….
Consultare la metodica operativa / consult instructions for use / consulter le mode
opératoire / consultar las instrucciones de uso / consultar as instruções de uso /
Schauen Sie die Arbeitsanleitung an / Ñçµàqçyxçtxztx tln qkÅwzxn ÖpuÑÅn /
kullan|mda ba{vurulacak bilgiler / Sledujte návod k pou ití
Sufficiente per 100 test / sufficient for 100 tests / suffisant pour 100
déterminations / suficiente para 100 determinaciones / Componentes para 100
testes / genügend für 100 Tests / xovpixz wlv 100 txÑt / 100 test için yeterli /
dosta}ující pro 100 testì
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RDATE Data di Riferimento / Reference date / Date de référence / Fecha de referencia /
Data de refêrencia / Referenzdatum / ŵxpqµÅszv àvîµqsmµÅÑÅn / Referans
Targhi / referen}ní datum
H2O Acqua distillata o deionizzata / deionized or distilled water / eau deionisée ou
distillée / agua destilada o desionizada / água destilada ou deionizada /
Deionisiertes oder Destilliertes Wasser / volqslѵïsq -voxÑtvwµïsq sxpm /
deiyonize veya distile su / deionizovaná nebo destilovaná voda
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Bibliografia-References-Literaturverzeichnis-Bibliographie-Bibliografia
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3 - Jacobs A., Path F.R.C. and Worwood M., Ferritin in serum. Clinical and
Biochemical Implication. N. Engl. J. Med., 292, 951-956, 1975.
4 - Jacobs A., Miller F., Worwood M., Beamish M.R. and Wardrop C.A.: Ferritin
in the Serum of normal subjects and patients with iron deficiency and iron
overload. Br. Med. J. 4, 206, 1972.
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7 - Revenant M.C. (1983) "Sandwich" Enzyme Immunoassay for Serum Ferritin
with Polypropylene test Tubes as the Solid Phase. Clin. Chem. 29/4, 681-
683.
8 - Walters G.O., Miller S.M. and Worwood M., Serum Ferritin concentration and
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Schema del Dosaggio, Assay Scheme, Schema du Dosage,
Inkubationsschema, Esquema del Ensayo
Provette,
Tubes
Röhrchen,
Tubos
A.Tot Tot Act/
Akt
(T)
CAL
(0-6)
Campioni,
Samples,
Echantillons,
Proben,
Muestras
Reag, Reac
CAL (0 - 6) ---- 25 SL ----
Campioni, Samples,
Echantillons, Proben,
Muestras
---- ---- 25 SL
Conj. 500 SL 500 SL 500 SL
− Agitare e incubare, Mix and incubate, Schütteln und inkubieren, Agiter et
incuber, Agitar y incubar: 45' T.A/R.T. (150 rpm-U/min).
− Aspirare e lavare, Aspirate and wash, Absaugen und waschen, Aspirer et
laver, Aspirar y lavar: 2 x 1 mL
− Leggere, Read, Messen, Lire, Leer.
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RADIM S.p.A. - Via del Mare, 125 - 00040 Pomezia (Roma) Italia – Tel.: 0039/06/91249.1 - Fax:
0039/06/91249.443; National Order Entry: 0039/06/91249.702; Export Dept.:
0039/06/91249.701; Customer Care: 0039/06/91249.700; www.radim.it
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