ferritina irma ct ref
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DOSAGE IMMUNORADIOMETRIQUE POUR LA DETERMINATION QUANTITATIVE DE LA<br />
FERRITINE DANS LE SERUM HUMAIN.<br />
POUR DIAGNOSTIC IN-VITRO<br />
APPLICATIONS CLINIQUES<br />
La molécule de Ferritine est constituée de 24 sous-unités protéiques. Chacune de ces unités a un poids<br />
moléculaire de 20000 Da.<br />
La fon<strong>ct</strong>ion primaire de la Ferritine est d'accumuler le fer intracellulaire en protégeant la cellule des effets<br />
toxiques du métal libre et de constituer une réserve de fer rapidement disponible.<br />
Dans l'organisme humain, la plus grande concentration de Ferritine se trouve dans les cellules du foie et<br />
dans les cellules du système endothélial du foie, de la rate et de la moelle osseuse. Des quantités<br />
moindres se trouvent aussi dans le coeur, le pancréas et les reins. Des quantités faibles, mais non<br />
négligeables, de Ferritine se trouvent aussi dans le sérum humain. La fon<strong>ct</strong>ion de la Ferritine sérique<br />
n'est pas connue, mais il y a une relation très étroite entre la concentration de cette protéine dans le<br />
sérum humain et les dépôts de fer de l'organisme. Le dosage de la Ferritine sérique représente donc la<br />
méthode la plus simple et la moins invasive pour son évaluation. L'évolution des concentrations de<br />
Ferritine sérique <strong>ref</strong>lète les modifications de l'équilibre corporel dues à l'âge et au sexe. Pour des<br />
individus normaux, les niveaux moyens, légèrement plus élevés à la naissance, diminuent pendant<br />
l'enfance jusqu'à l'âge de la puberté. Ensuite chez les garçons, il y a une augmentation progressive des<br />
dépôts corporels de fer et proportionnellement de la ferritine sérique. Chez la femme en âge de procréer,<br />
on observe des valeurs plus basses et stables et une augmentation de la ferritinémie après la<br />
ménopause. Des valeurs de Ferritine inférieures à la norme indiquent, avec certitude, une carence en fer<br />
et elles permettent le diagnostic différentiel entre l'anémie suite à une carence en fer et l'anémie due à<br />
d'autres raisons. La surcharge martiale, due à l'augmentation de l'absorption de fer, comme dans le cas<br />
d'hémochromatose idiopathique ou de transfusions multiples, provoque une augmentation de la Ferritine<br />
sérique parfois bien supérieure aux valeurs normales. Une augmentation de la Ferritinémie se remarque<br />
aussi dans des conditions pathologiques comme: hépatopathies, processus infe<strong>ct</strong>ieux et inflammatoires,<br />
leucémie, lymphome de Hodgkin et d'autres formes néoplasiques.<br />
PRINCIPE DU TEST<br />
La présente méthode utilise deux anticorps monoclonaux anti-Ferritine qui reconnaissent deux épitopes<br />
différents de la molécule. Un anticorps est adsorbé sur une phase solide (tubes sensibilisés) l'autre,<br />
marqué a l'iode 125 est utilisé comme conjugué. L'échantillon à doser et l'anticorps marqué sont incubés<br />
simultanément dans le tube sensibilisé. De cette façon, l'anticorps marqué est lié à la phase solide par<br />
l'intermédiaire de l'antigène présent dans le calibrateur ou dans les échantillons en quantité dire<strong>ct</strong>ement<br />
proportionnelle à la concentration de ce dernier. Au terme de l'incubation, l'excès de réa<strong>ct</strong>if resté en<br />
solution est éliminé par aspiration et lavages. La radioa<strong>ct</strong>ivité résiduelle dans le tube est mesurée dans<br />
un compteur gamma.<br />
REACTIFS CONTENUS DANS LA TROUSSE: PREPARATION ET STABILITE<br />
− Les réa<strong>ct</strong>ifs sont suffisants pour réaliser 100 tests.<br />
− La trousse doit être stockée à 2-8°C.<br />
− La date de péremption est indiquée sur l'étiquette de chaque réa<strong>ct</strong>if.<br />
1 - CT Tubes Sensibilisés: 100 tubes sensibilisés avec l'anticorps monoclonal anti-Ferritine (souris).<br />
Les tubes non utilisés doivent être conservés dans leur sachet soigneusement <strong>ref</strong>ermé à 2-8°C.<br />
2 - CAL Calibrateurs: 7 flacons (1 mL) de Ferritine (foie humain) en tampon phosphate et BSA aux<br />
concentrations suivantes: 0, 5, 20, 50, 250, 1000 et 2000 ng/mL. Conservateur: NaN3 (< 0.1%). Prêt à<br />
l'emploi. La courbe de calibration a été calibrée sur le Standard International 94/572.<br />
N.B.: vérifier toujours l’exa<strong>ct</strong> concentration sur la feuille de C.Q.<br />
3 - CONJ I 125 Conjugué Radioa<strong>ct</strong>if: 1 flacon (50 mL) d'anti-Ferritine monoclonal marqué à l'I 125 en<br />
tampon phosphate et BSA. Radioa<strong>ct</strong>ivité: 444 KBq. Conservateur: NaN3 (