ferritina irma ct ref

DOSAGGIO IMMUNORADIOMETRICO PER LA DETERMINAZIONE QUANTITATIVA DELLA
FERRITINA NEL SIERO UMANO
PER USO DIAGNOSTICO IN VITRO
APPLICAZIONI CLINICHE
La molecola della Ferritina è costituita da 24 subunità proteiche, ciascuna con un peso molecolare di
20.000 D. La funzione primaria della Ferritina è quella di accumulare il ferro intracellulare proteggendo la
cellula dagli effetti tossici del metallo libero e costituendo una riserva di ferro rapidamente mobilizzabile.
La maggior parte della Ferritina nell'organismo si trova nelle cellule del fegato e nelle cellule del sistema
reticolo endoteliale di fegato, milza e midollo osseo, quantità minori si trovano nel cuore, nel pancreas e
nel rene. Piccole, ma significative quantità di Ferritina si trovano nel siero umano. La funzione della
Ferritina sierica non è nota, ma esiste una stretta correlazione tra la concentrazione nel siero di questa
proteina e i depositi di ferro dell'organismo: il dosaggio della Ferritina sierica rappresenta quindi il
metodo più semplice e meno invasivo per la sua valutazione. L'andamento delle concentrazioni della
Ferritina sierica riflette le modificazioni dell'equilibrio corporeo dovute all'età e al sesso. Per individui
normali, i livelli medi, lievemente più elevati alla nascita, si abbassano durante l'infanzia fino al
raggiungimento della pubertà. Successivamente, nei maschi, si ha un progressivo aumento dei depositi
corporei di ferro e, proporzionalmente, della ferritina sierica, mentre, nelle donne in età feconda, si
osservano valori più bassi e stabili ed un aumento della ferritinemia solo dopo la menopausa. Valori di
Ferritina inferiori alla norma indicano, con sicurezza, carenza di ferro e permettono la diagnosi
differenziale tra anemia sideropenica ed anemia dovuta ad altre cause. Il sovraccarico marziale, sia
esso dovuto ad aumentato assorbimento di ferro, come nell'emocromatosi idiopatica o a trasfusioni
multiple, determina un incremento della Ferritina sierica spesso molto superiore alla soglia dei valori
normali. Un aumento della Ferritinemia si osserva anche in altre condizioni patologiche quali: epatopatie,
processi infettivi ed infiammatori, leucemia, linfoma di Hodgkin ed altre forme neoplastiche.
PRINCIPIO DEL METODO
Il presente metodo utilizza due anticorpi monoclonali anti-Ferritina che riconoscono due epitopi diversi
della molecola. Un anticorpo è adsorbito su fase solida (provette sensibilizzate), l'altro, marcato con
Iodio 125, viene utilizzato come coniugato. Il campione da dosare e l'anticorpo marcato vengono incubati
contemporaneamente nella provetta sensibilizzata. In tal modo l'anticorpo marcato viene legato alla fase
solida mediante l'antigene presente nei calibratori o nel campione, in quantità direttamente proporzionale
alla concentrazione di quest'ultimo. Al termine dell'incubazione, l'eccesso dei reagenti rimasto in
soluzione viene rimosso mediante aspirazione e lavaggi. La radioattività residua nelle provette viene
misurata in un contatore di raggi gamma.
REAGENTI CONTENUTI NEL KIT: PREPARAZIONE E STABILITA'
− I reagenti sono sufficienti per 100 tubi.
− Il kit deve essere conservato a 2-8°C.
− La data di scadenza di ciascun reagente é indicata sulla rispettiva etichetta.
1 - CT Provette Sensibilizzate: 100 provette sensibilizzate con un anticorpo monoclonale anti-Ferritina
(topo). Le provette non utilizzate devono essere riposte nella loro custodia accuratamente richiusa a 2-
8°C.
2 - CAL Calibratori: 7 flaconi (1 mL) di Ferritina (fegato umano) in tampone fosfato e BSA alle seguenti
concentrazioni: 0, 5, 20, 50, 250, 1000 e 2000 ng/mL. Conservante: NaN3 (< 0.1%). Pronto per l'uso. Il
Calibratore è stato calibrato sulla preparazione di Standard Internazionale 94/572.
N.B.: verificare sempre l'esatta concentrazione sul foglio di C.Q.
3 - CONJ I 125 Coniugato Radioattivo: 1 flacone (50 mL) di 125 I-anti Ferritina monoclonale in tampone
fosfato e BSA. Contenuto di radioattività: 444 KBq. Conservante: NaN3 (< 0.1%). Pronto per l'uso e
colorato in rosso.
6 - WASH Soluzione di lavaggio (concentrata): 1 flacone (50 mL) di Tris HCl e Tween 20.
Conservante: NaN3 (< 0.1%). Prima dell'uso diluire la soluzione in rapporto 1:10 con H2O distillata. La
soluzione diluita è stabile 2 mesi a 2-8°C.
KP33CT – FERRITINA IRMA
M99 – Rev.09 – 12/2004 – Pag. 3/32