ASCA-CHEK - TechLab

2. Vortexen Sie die Reagenzröhrchen 10 Sekunden und lagern Sie diese bis zur
Testdurchführung zwischen 2 °C und 8 °C. V ortexen Sie erneut, bevor Sie die
verdünnte Probe in die Mikrotiterkavität übertragen. Damit ist eine gründliche
Durchmischung der Probe gewährleistet.
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SERUMPROBENNAHME UND ZUBEREITUNG DER VERDÜNNUNGEN
BITTE BEACHTEN: Blutproben müssen mittels Venenpunktion entnommen werden und
natürlich gerinnen. Serum vom Gerinnsel trennen. Lagern Sie die Proben bei -20 °C
oder darunter, wenn der Test nicht innerhalb von 7 Tagen nach der Entnahme
durchgeführt werden kann. Lassen Sie die Proben bei Raumtemperatur auftauen, und
mischen Sie sie vor der Vorbereitung für den Test gut durch. Verdünnte Proben können
zwischen 2º und 8ºC für bis zu 7 Tage gelagert werden. Testen Sie nach Möglichkeit
nur Serumproben, die weniger als 7 Tage alt sind. Mischen (vortexen) Sie die
Proben gründlich vor der Durchführung des Tests. Es müssen sowohl die
Probe vor der Übertragung in den 10x-Verdünnungspuffer als auch die
verdünnte Probe vor der Testdurchführung vollständig gemischt werden.
1. Zubereitung der verdünnten Proben:
Für Serumproben: Bereiten Sie für jede zu testende Serumprobe drei
Kunststoffreagenzröhrchen vor und beschriften Sie diese. Geben Sie für jede
Probe 450 µl des 1x-Verdünnungspuffers in jedes der drei Reagenzröhrchen.
Fügen Sie mit einer Transferpipette 50 µl (konisch erweiterter Bereich) der
Serumprobe in das erste Reagenzröhrchen mit 1x-Verdünnungspuffer hinzu, um
eine 1:10 Verdünnung zu erhalten, und mischen Sie gut mit einem Vortex-Schüttler.
2. Übertragen Sie nun 50 µl (konisch erweiterter Bereich) der 1:10 Verdünnung in das
zweite Reagenzröhrchen mit Verdünnungspuffer, um eine 1:100 Verdünnung zu
erhalten, und mischen Sie gut mit einem Vortex-Schüttler.
3. Übertragen Sie nun 50 µl aus dem Reagenzröhrchen der 1:100 Verdünnung in das
dritte Reagenzröhrchen mit Verdünnungspuffer, um eine 1:1000 Verdünnung zu
erhalten, und mischen Sie gut mit einem Vortex-Schüttler.
Vortexen Sie die Reagenzröhrchen 10 Sekunden und lagern Sie diese bis zur
Testdurchführung zwischen 2 °C und 8 °C. V ortexen Sie erneut, bevor Sie die
verdünnte Probe in die Mikrotiterkavität übertragen. Damit ist eine gründliche
Durchmischung der Probe gewährleistet.
TESTVERFAHREN
Packungsinhalt
2 Kunststoff-Klebebögen
100 Transferpipetten (konisch erweiterter Bereich = 50 µl)
FOR INFORMATIONAL USE
ONLY
Transferpipette: Kolben 300 µL 200 µL 100 µL 50 µL konisch erweiterte Spitze
Benötigte, aber nicht enthaltene Materialien
Spritzflasche für 1x-Waschlösung
Vortex-Schüttler
Reagenzröhrchen zur Probenverdünnung Abfallbehälter/Saugpapier
Kühlschrank für die Lagerung
Entionisiertes oder destilliertes Wasser
Flasche für 1x-Verdünnungspuffer
37°C-Inkubator
ELISA-Lesegerät für eine Wellenlänge von 450 nm oder 450/620 nm
1. Legen Sie die Anzahl der zu verwendenden Kavitäten fest. Geben Sie einen
Tropfen positive Kontrolle (schwarzer Verschluss) in eine Kavität für die positive
Kontrolle. Geben Sie 50 µl (konisch erweiterter Bereich) des 1x-
Verdünnungspuffers in eine Kavität für die negative Kontrolle. Geben Sie 100 µl
(erste Markierung hinter dem konisch erweiterten Bereich) der verdünnten Probe in
eine Kavität.