Ecologie et Impact des haies

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5. Relevé de la biomasse Liste du matériel : - balance DENVER INSTRUMENT Company Model 100A Pour cette expérimentation il est nécessaire d’utiliser un instrument présentant une aire fixe afin de prélever la végétation sur la même surface tout au long du transect (décrit en annexe 3) de la zone étudiée. C’est une standardisation obligatoire. Pour ce faire, les zones de prélèvement ont été délimitées à l’aide d’un instrument de terrain cylindrique de surface égale à 0,0143 m² permettant de marquer le sol. Toute la végétation aérienne comprise dans ce cercle est prélevée, nettoyée et mise à sécher en étuve à 80°C. La matière sèche est ensuite pesée à l’aide d’une balance. Il est possible ainsi de connaître le long du transect la biomasse de matière sèche par m 2 . Ces données ainsi exprimées sont alors comparables entre elles. 6. Teneur en nitrates L’étude porte sur les concentrations de nitrate dans le sol. [NO 3 - ] correspond à la concentration de la molécule, tandis que [N-NO 3 - ] à celle de l’azote sous forme nitrate. Ce sont ces concentrations qui vont être déterminées. Ces deux valeurs sont liées, la formule suivante permet de passer d’une unité à l’autre : [NO 3 - ] = (masse de [NO 3 - ] / masse de l’atome N) * [N-NO 3 - ] Soit [NO 3 - ] = [N-NO 3 - ] / 0,23 Liste du matériel spécifique: - tamis de 2mm - poudre de KCl à M = 74,56 g/mol Merck - fioles de 500 mL - filtres sans cendres 125 m/m Durieux Paris - tubes Falcon de 50mL - pipettes 10 et 20mL Brand et 5mL Preciss (précision : 0,03) - propipette Brand - spectrophotomètre Hach DR/2010 avec fioles de 25mL - sachets NitraVer 5 Nitrate Reagent pour 25mL cat. 14034-99 - parafilm « M » American Can Company Tout d’abord, la solution de KCl doit être préparée à partir de la poudre de chlorure de potassium disponible. Pour préparer un litre de solution, deux fioles de 500mL sont utilisées. La masse molaire étant de 74,56 g/mol, et la concentration de la solution requise de 1M, 74,56 g de poudre sont nécessaires, répartis également (37,28 g) dans chaque fiole. De l’eau distillée est ensuite ajoutée et ajustée précisément. Le sol prélevé aux mêmes points que précédemment, est tamisé afin de récupérer 20g de sol pour chaque point. Chaque échantillon est placé dans un tube Falcon de 50 mL auquel 30 mL de KCl sont rajoutés. En effet, le sol étant plutôt argileux, le rapport sol : solution 12
de KCl est de 1 : 1,5. Chaque tube est agité manuellement pendant une demi-heure. Le mélange est ensuite filtré. Le filtrage étant long, au moins 12,5 mL de filtrat sont récupérés sur les 25 mL nécessaires à la spectrophotométrie, puis le volume est ajusté à 25mL avec de l’eau distillée. Il faudra donc tenir compte de la dilution dans les calculs. Le dosage s’effectue par spectrophotométrie. Le principe du dosage est d’ajouter un sachet de réactif NitraVer dans la solution filtrée qui réduit le nitrate en nitrite par le cadmium, puis une réaction avec l’acide sulfanilique donne un produit de couleur ambrée, absorbant à 500nm. La poudre est précautionneusement versée dans chaque filtrat et transvasé dans les fioles, puis une agitation manuelle d’une minute est effectuée après avoir bouché les fioles à l’aide de Parafilm. La réaction se poursuit ensuite pendant 5 minutes au terme desquelles le programme du spectrophotomètre est lancé. Ce dernier donne alors directement les concentrations de [N-NO 3 - ] et [NO 3 - ] en mg/L. Le filtrat ayant été dilué, il faut calculer les concentrations initiales de la solution non diluée. Le calcul est basé sur la formule : Concentration initiale = (concentration lue*volume de KCl) / volume de filtrat prélevé. (mg/L) (mg/L) (mL) (mL) A partir de ces résultats, la teneur en nitrates dans le sol est déterminée grâce à la formule suivante : Concentration dans le sol = (concentration initiale*volume d’extraction) / poids de sol. (µg/g) (mg/L) (mL) (g) 13
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