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LA TECNOLOGIA del DNA RICOMBINANTE

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…grazie alla scoperta <strong>del</strong>le endonucleasi di restrizione…<br />

Le librerie geniche: collezione di cloni derivante dalla totalità di <strong>DNA</strong> estratto da un organismo e<br />

digerito con un enzima di restrizione:<br />

Le librerie genomiche: composta dalla totalità <strong>del</strong> <strong>DNA</strong> cromosomico di un organismo (es: se si vuole<br />

studiare l’organizzazione genica);<br />

Le librerie di c<strong>DNA</strong>: composta dall’mRNA di una cellula o di un tessuto in un particolare momento (es:<br />

studiare il profilo di espressione di una particolare proteina in u particolare momento o tessuto)<br />

Confronto tra I principali passaggi richiesti per la costruzione di librerie genomiche e di c<strong>DNA</strong><br />

1 Libreria genomica<br />

Libreria di c<strong>DNA</strong> 1<br />

2<br />

3<br />

4<br />

Estrazione <strong>del</strong> <strong>DNA</strong><br />

cromosomico<br />

Taglio <strong>del</strong> <strong>DNA</strong> con<br />

endonucleasi di restrizione<br />

(digestione parziale o totale)<br />

Inserimento di ogni frammento<br />

di <strong>DNA</strong> in un vettore<br />

5<br />

Trasformazione batterica<br />

Estrazione <strong>del</strong>l’mRNA 2<br />

Produzione di c<strong>DNA</strong><br />

(trascrittasi inversa)<br />

Inserimento di ogni c<strong>DNA</strong><br />

in un vettore<br />

3<br />

4

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