Localizzazione delle proteine in situ 1Â°parte - CusMiBio

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• Prelievo• Fissazione• Disidratazione• Inclusione• Taglio• ColorazioneDisidratazioneSCOPO:sostituzione dell’acqua contenuta nel tessuto con unsolvente del mezzo di inclusione (paraffina)MODALITA’:1. scala alcolica crescenteEtanolo 70%Etanolo 90%Etanolo 100%2. Chiarificazione in solvente della paraffina3. Infiltrazione in paraffina fluida diluita in solventePericolo di alterare la proteina in esame18
• Prelievo• Fissazione• Disidratazione• Inclusione• Taglio• ColorazioneInclusioneSCOPO:permette di inglobare il campione in un materiale abbastanzaduro ed omogeneo per poter essere tagliato in sezioni sottiliPARAFFINA Miscela di idrocarburi saturisolida a T ambientepunto di fusione a 54-60°insolubile in H 2 O, solubile in xiloloIl campione viene- immerso in paraffina pura liquida- trasferito in stampini, fatti poisolidificare a temperatura ambienteCAMPIONE PERMANENTEPericolo di alterare la proteina in esame19
Page 1 and 2: LOCALIZZAZIONE in situ DI PROTEINEI
Page 3 and 4: Dove si trovano le proteine?Le prot
Page 5 and 6: Dove si trovano le proteine?Le prot
Page 7 and 8: Che funzioni svolgono le proteine?I
Page 9: LOCALIZZAZIONE “in situ”9
Page 13 and 14: Preparazione di campioni biologicip
Page 15 and 16: 1. CAMPIONI SOTTILI (micrometri µm
Page 17: • Prelievo• Fissazione• Disid
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