Localizzazione delle proteine in situ 1Â°parte - CusMiBio

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• Prelievo• Fissazione• Disidratazione• Inclusione• Taglio• ColorazioneTaglio delle sezioniCRIOSTATOConsente di tagliare a freddo (-20°C) campioni non inclusie non fissati in sezioni di 5-30 µm (micrometri o micron)Sezioni raccolte suvetrino oconservate “libere”in una SoluzioneTampone INCONGELATORECAMPIONE NON PERMANENTE22
• Prelievo• Fissazione• Disidratazione• Inclusione• Taglio• ColorazioneCOLORAZIONE1. PRETRATTAMENTII coloranti sono in soluzione acquosa, quindi le sezioni devono essere prima- sparaffinate in xilolo (10 min)- reidratate con scala decrescente di alcool- 100 (5 min)- 95 (5 min)- 75 (5 min)- acqua (5 min)2. COLORAZIONE (o REAZIONE CITOCHIMICA/IMMUNOCITOCHIMICA)3. MONTAGGIOPer avere campioni permanenti nel tempo, le sezioni devono essere poi- disidratate con scala crescente di alcool- 75 (5 min)- 95 (5 min)- 100 (5 min)- Ricoperte da vetrino coprioggetto, sigillato da “colla”CAMPIONE PERMANENTE23
Page 1 and 2: LOCALIZZAZIONE in situ DI PROTEINEI
Page 3 and 4: Dove si trovano le proteine?Le prot
Page 5 and 6: Dove si trovano le proteine?Le prot
Page 7 and 8: Che funzioni svolgono le proteine?I
Page 9: LOCALIZZAZIONE “in situ”9
Page 13 and 14: Preparazione di campioni biologicip
Page 15 and 16: 1. CAMPIONI SOTTILI (micrometri µm
Page 17 and 18: • Prelievo• Fissazione• Disid
Page 19 and 20: • Prelievo• Fissazione• Disid
Page 21: • Prelievo• Fissazione• Disid

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