You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Studenten over hun onderzoek<br />
Chemokine receptoren in Zebravissen<br />
Ik ben Erica Benard, 4e jaars Biologiestudente. Ik volg de track<br />
‘Molecular and Cellular Biology’ en ben in januari <strong>2008</strong> begonnen<br />
met mijn eerste Masteronderzoekstage op de afdeling Molecular Cell<br />
Biology van het IBL onder begeleiding van Annemarie Meijer.<br />
DOOR ERICA BENARD<br />
Mijn onderzoek gaat over het aangeboren afweersysteem<br />
van de zebravis (Danio rerio). Gedurende de<br />
eerste paar ontwikkelingsweken van een zebravisembryo<br />
is dit aangeboren systeem de enige manier<br />
van afweer.<br />
Ik zal mijn onderzoek verrichten tijdens de eerste vier<br />
dagen van ontwikkeling en zal gericht kijken naar<br />
chemokines en hun receptoren. Een groot voordeel<br />
is dat de embryos in deze ontwikkelingsfase volledig<br />
transparant zijn, zodat ze zeer geschikt zijn voor<br />
microscopische imaging.<br />
In geval van infectie of weefselschade, worden chemokines<br />
uitgescheiden door verschillende cellen.<br />
Leukocyten die chemokinereceptoren bevatten, zijn<br />
in staat om te migreren naar de plaats van infectie of<br />
schade door de gradiënt van chemokines te volgen<br />
(chemotaxis). In een embryo van 1 dag oud, komen<br />
al twee typen leukocyten voor die betrokken zijn<br />
bij de immuunrespons: macrofagen en neutrofielen.<br />
Deze twee typen differentiëren uit een precursorcel<br />
die in het embryo te herkennen is door expressie van<br />
de transcriptiefactor PU.1.<br />
Uit eerder onderzoek van de afdeling is gebleken dat<br />
een specifieke chemokinereceptor hoog tot expressie<br />
komt in de embryonale leukocyten en hun precursorcellen<br />
(PU.1-cellen). Ik wil nu allereerst de volgende<br />
vraag beantwoorden:<br />
‘In welk type leukocyt komt deze chemokine receptor<br />
tot expressie?’.<br />
Er is al beschreven dat zebravissen 63 mogelijke<br />
chemokines bevatten en 24 mogelijke receptoren. Er<br />
DNA fragmenten scheiden d.m.v gel electroforesis<br />
is dan ook erg weinig bekend over welke specifieke<br />
chemokines zich binden aan welke specifieke receptoren<br />
in zebravissen. Hier gaat mijn tweede onderzoeksvraag<br />
over:<br />
‘Wat is de functie van mogelijke chemokines die zich<br />
binden aan mijn receptor?’.<br />
De belangrijkste techniek die toegepast wordt om<br />
het type leukocyt te bepalen is ‘Fluorescente in situ<br />
hybridisatie’. Door middel van deze techniek kunnen<br />
celtypen zichtbaar gemaakt worden die mijn chemokinereceptor<br />
tot expressie brengen. Met behulp van<br />
een zelfontworpen probe kan de locatie waar mijn<br />
chemokinereceptor tot expressie komt in een embryo<br />
zichtbaar gemaakt worden met een fluorescente<br />
kleur. Het mooie van deze techniek is dat in hetzelfde<br />
embryo een tweede probe gebruikt kan worden<br />
voor een andere specifieke genexpressie. Deze wordt<br />
vervolgens gelocaliseerd met een andere fluorescente<br />
kleur. Zo zijn er al probes die specifiek zijn voor<br />
neutrofielen, macrofagen en precursorcellen. Met<br />
behulp van verschillende combinaties van probes kan<br />
Origin - Universiteit Leiden 15
Change language