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Mapeamento da autoincompatibilidade sexual do cacau e ... - Uesc

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2.9 Marca<strong>do</strong>res moleculares e desenvolvimento de mapas de ligação<br />

Os polimorfismos genéticos em nível <strong>do</strong> DNA são abun<strong>da</strong>ntes nos<br />

genomas vegetais e podem ser detecta<strong>do</strong>s por diferentes técnicas de biologia<br />

molécular, geran<strong>do</strong> marca<strong>do</strong>res moleculares informativos. Marca<strong>do</strong>res<br />

moleculares basea<strong>do</strong>s na amplificação de fragmentos de DNA pela reação em<br />

cadeia <strong>da</strong> polimerase (PCR) têm si<strong>do</strong> largamente emprega<strong>do</strong>s nos programas<br />

de melhoramento de plantas, como na caracterização de populações,<br />

construções de mapas de ligação e detecção de QTL entre outras aplicações<br />

(FERREIRA; GRATTAPAGLIA, 1998).<br />

Na construção de mapas de ligação normalmente são emprega<strong>do</strong>s<br />

grande número de marca<strong>do</strong>res moleculares, sejam eles loco-específicos<br />

<strong>do</strong>minantes (como RAPD – DNA polimórfico amplifica<strong>do</strong> ao acaso; AFLP –<br />

polimorfismo de comprimento de fragmentos amplifica<strong>do</strong>s) ou loco co-<br />

<strong>do</strong>minante (como microssatélites; RFLP – polimorfismo de comprimento de<br />

fragmentos de restrição obti<strong>do</strong>s por cortes aleatórios <strong>da</strong> fita dupla de DNA).<br />

Presentes na maioria <strong>do</strong>s genomas <strong>do</strong>s organismos eucariotos, os<br />

marca<strong>do</strong>res moleculares <strong>do</strong> tipo microssatélites (Simple Sequence Repeats -<br />

SSR) consistem de seqüências curtas de 2-5 nucleotídeos repeti<strong>da</strong>s em<br />

tandem, flanquea<strong>da</strong>s por seqüências únicas não repeti<strong>da</strong>s, sen<strong>do</strong> os elementos<br />

repeti<strong>do</strong>s mais comuns os di-nucleotídeos AT e CA. A variação alélica em locos<br />

de microsatélites pode ser facilmente detecta<strong>da</strong> por PCR usan<strong>do</strong> primers<br />

flanquea<strong>do</strong>res específicos. O polimorfismo basea<strong>do</strong> na variação <strong>do</strong> número de<br />

seqüências repeti<strong>da</strong>s <strong>do</strong>s microssatélites é provavelmente ocasiona<strong>do</strong> por<br />

escorregamento <strong>da</strong> DNA polimerase na replicação <strong>do</strong> DNA ou por troca de<br />

partes desigual entre os cromossomos (HANCOCK, 2000).<br />

Os marca<strong>do</strong>res microssatélites tornaram-se rapi<strong>da</strong>mente os mais<br />

utiliza<strong>do</strong>s pelos geneticistas de humanos, para o desenvolvimento de mapas de<br />

ligação e para a identificação de indivíduos. Em plantas, os microssatélites são<br />

muito freqüentes e distribuí<strong>do</strong>s ao acaso ao longo <strong>do</strong> genoma, também sen<strong>do</strong><br />

amplamente utiliza<strong>do</strong>s nos estu<strong>do</strong>s de diversi<strong>da</strong>de genética, caracterização de<br />

germoplasma, construção de mapas genéticos e localização de QTLs. Esses<br />

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