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óssea à anemia (Grace 2004). A contagem de reticulócitos fica substancialmente aumentada, a menos que ela tenha sido feita imediatamente após uma queda abrupta no volume globular, ou se existe concomitantemente alguma doença supressora da medula óssea. Depois da hemólise, deverão transcorrer quatro a seis dias para que aumente a contagem de reticulócitos (Norsworthy 2004). Podem estar presentes dois tipos de reticulócitos. Os reticulócitos agregados refletem mais uma resposta regenerativa recente, pois contém numerosos aglomerados de ribossomos que se coram intensamente de azul, enquanto que reticulócitos pontilhados contém pequenos aglomerados de material ribossômico (Grace 2004). A presença de reticulócitos agregados é o indicador mais confiável de uma resposta regenerativa recente, sabendo-se que diante de uma anemia grave, que estimule a produção de eritrócitos, há a presença de 0,5% a 5% de reticulócitos agregados (Grace 2004). Eritrócitos nucleados circulantes não indicam resposta regenerativa, a menos que estejam acompanhados por aumento da contagem de reticulócitos. As causas do aparecimento de eritrócitos nucleados circulantes na ausência de anemia regenerativa são neoplasia, lesão hipóxica ou tóxica da medula óssea, intoxicação por chumbo e esplenomegalia (Grace, 2004). Cerca da metade de todos os gatos com hemoplasmose clínica são positivos para FeLV. Embora se saiba que a infecção por FeLV suprime a imunidade e predispõe gatos a diversas doenças infecciosas, o oposto também pode ser verdade. Estudos experimentais demonstram que a hemoplasmose pode predispor gatos à infecção por FeLV (Norsworthy 2004). Na avaliação bioquímica, destacam-se os altos níveis de bilirrubina, principalmente em sua fração não-conjugada (indireta), e o aumento da atividade da alanina aminotransferase, decorrentes da necrose hepática secundária à anemia aguda e hipóxia decorrente. Em casos mais raros, nos quais ocorre um componente hemolítico intravascular, podemos ter aumento da uréia e creatinina, pela ação tóxica que a hemoglobina exerce no néfron (Grauer e Lane 1995). Devido à dificuldade de cultivo do M. haemofelis, até recentemente o diagnóstico da infecção era primariamente baseado na identificação citológica dos organismos na superfície das células sanguíneas vermelhas. Entretanto, há vários fatores que resultam em casos falso-positivos e falso-negativos quando se utiliza esse método de diagnóstico (Tasker e Lappin, 2002). O teste 13
da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é conhecido por ser mais sensível do que a citologia para o diagnóstico e permite a diferenciação das duas espécies de hemoplasmas (Berent et al., 1998; Foley et al., 1998; Westfall et al., 2001), sendo atualmente o teste de escolha para o diagnóstico da infecção por M. hemofelis por ser comercialmente viável em muitos laboratórios da América do Norte. A disponibilidade de um teste de diagnóstico sensível tem permitido estudos mais precisos, inclusive para se avaliar a eficácia do tratamento (Tasker e Lappin, 2002). O exame da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma técnica molecular sensível que permite a amplificação de um fragmento particular de DNA de um microorganismo (Messick 2003). A amplificação do gene 16S do DNA ribossômico é a base para todos os ensaios de PCR desenvolvidos até hoje para a detecção de hemoplasmas hemotrópicos (Foley et al 1998, Berent at al 1998, Messick 1998, Jensen et al 2001). Dois ensaios distintos baseados na PCR são utilizados para detectar a infecção no gato: um ensaio detecta M. haemofelis, e outro detecta C. M. haemominutum (Messick 2003). A PCR que foi desenvolvida para a detecção do M. haemofelis (Berent at al 1998) também detecta o parasita canino M. haemocains (Brinson e Messick 2001). Jensen e colaboradores desenvolveram, em 2001, um único teste de PCR para a detecção de ambas as espécies de hemoplasmas hemotrópicos que infectam gatos. Braddock, J.A.; Tasker, S.; Malik R. (2004) relataram pela primeira vez a utilização de uma PCR em tempo real para a confirmação do diagnóstico de infecção por M. haemofelis e para quantificar a resposta a um tratamento em gatos infectados naturalmente. Para chegar-se a um diagnóstico, deve-se associar a visualização de organismos em um esfregaço sanguíneo, a presença de um elevado número de cópias de M. haemofelis quantificados por PCR e a identificação de uma grave anemia regenerativa com uma resposta ao tratamento com doxiciclina, pois resultados positivos da PCR para M. haemofelis têm sido relatados em gatos saudáveis assintomáticos (Tasker et al 2003a). A eficiência do tratamento é obtida com um resultado negativo na PCR obtido 383 dias após o término do tratamento de 42 dias com doxiciclina. Existe a possibilidade de um resultado falso-negativo quando os microorganismos são seqüestrados em órgãos como o baço e os pulmões, pois desse modo, a PCR do sangue periférico produz um resultado negativo (Tasker et al 2003b). 14
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