rezumat RO pt CD.pdf

Obţinerea de biosurfactanţi şi utilizarea lor în protecţia mediului şi a culturilor horticole
ce sugerează posibile aplicaţii ale tulpinilor bacteriene selectate pentru degradarea uleiurilor
vegetale uzate (arse).
Pentru că rezultatele obţinute au arătat capacitatea tulpinilor bacteriene B1, B2, B17 şi BW
de a produce agenţi tensioactivi, ne-am propus să examinăm dacă aceste tulpini sunt potenţial
producătoare de lipopeptide de tip iturin, folosind două perechi de primeri ituD şi lpa14. Rezultatele
obţinute sunt prezentate în mod sintetic în tabelul 4.6 (tabelul 4.9 din teză).
Rezultatele testului PCR
13
Tabelul 4.6 (Tabelul 4.9 – Teză)
Tulpina
bacteriană
Rezultate PCR Comentarii
B. subtilis ATCC Ampliconul de 1203 pb specific pentru
6633
ituD este clar, în timp ce ampliconul de
675 pb corespunzător genei lpa-14 nu
este foarte clar
Posibil producător de iturin
B. subtilis B1 Ambii ampliconi sunt prezenţi Producător de iturin
B. subtilis B2 Niciunul dintre produşii de amplificare Nu produce iturin, biosurfactanţii pe
nu a fost detectat
care îi sintetizează sunt de alt tip
B. subtilis BW Ambii ampliconi sunt prezenţi Producător de iturin
Extracţia biosurfactanţilor s-a făcut după o metodă adaptată după mai multe metode
prezentate în literatura de specialitate, fiind descrisă în capitolul IV al tezei, subcapitolul Materiale
şi metode. În experimentele noastre, în urma evaporării metanolului, s-a obţinut, pentru toate
tulpinile bacteriene luate în studiu, un depozit de culoare brun-gălbuie, fiind considerat biosurfactant
brut. S-au constatat, totuşi, diferenţe în privinţa mărimii depozitului: cel mai mare depozit s-a
obţinut la tulpina B2. În vederea evidenţierii biosurfactanţilor prin cromatografie în strat subţire
(TLC) şi pentru determinarea eventualei activităţi antifungice, sedimentele de biosurfactant au fost
reluate în 100 µl metanol sau în 100 µl n-butanol.
Pentru detectarea biosurfactanţilor prin TLC, s-a folosit sistemul solvent cloroform-metanol-
apă (65:25:4 v/v/v), iar ca soluţie de revelare o soluţie alcoolică de ninhidrină 0,2%. Aplicarea
extractelor metanolice sau butanolice pe plăcile cu silicagel, a condus la evidenţierea unor spoturi de
culoare violet, indicând prezenţa lipopeptidelor.
Deşi în cercetările noastre am pornit de la o platformă de cunoştinţe deja existente în ceea ce
priveşte creşterea acestui tip de microorganisme, având în vedere dificultatea alegerii unui mediu
bun pentru cultivarea izolatelor bacteriene selectate, potenţial producătoare de biosurfactanţi, am
considerat necesară testarea şi optimizarea creşterii tulpinilor bacteriene, astfel încât rezultatele
obţinute în cadrul etapelor următoare să fie comparabile cu cele obţinute pe plan internaţional. Am