Tehnici utilizate in imunologie - PIM Copy

4. Şoareci SCID (severe combined immunodeficiency–
imunodeficienţa severă combinată)...............................................140
5. Şoareci nuzi.................................................................................141
6. Şoareci transgenici......................................................................143
7. Şoareci knock out (KO)..............................................................145
8. Şoareci knock-in.........................................................................146
Tehnici de biologie moleculară (manipulare a acizilor nucleici şi
producţie de proteine)
Metode de manipulare a genelor.................................................149
1. Extragerea ADN din ţesuturi şi culturi de celule........................149
2. Extragerea ARN-ului din ţesuturi sau culturi de celule..............151
3. Electroforeza ADN în gel...........................................................152
3.1 Electroforeza în gel de agaroză.................................................153
3.2 Electroforeza în gel de poliacrilamidă......................................156
3.3 Electroforeza în câmp electric pulsatil .....................................157
4. Southern blot...............................................................................157
5. Northern blot...............................................................................161
Metode de evidenţiere a secvenţelor nucleotidice în celule şi
ţesuturi...........................................................................................161
1. Hibridizarea in situ......................................................................161
2. FISH – Fluorescence in situ hybridization..................................168
3. CISH – Chromogenic in situ hybridization.................................169
Manipularea enzimatică a ADN-ului..........................................170
1. Digestia cu enzime de restricţie..................................................170
2. Utilizarea ligazelor în ingineria genetică....................................171
3. Amplificarea prin PCR................................................................172
4. RT-PCR (reverse transcription-PCR).........................................177
5. Real time PCR – PCR în timp real..............................................178
6. Secvenţierea ADN.......................................................................179
Metode de introducere a ADN-ului recombinant în bacterii şi
celule eucariote
1. Vectori.........................................................................................182
1.1 Plasmide....................................................................................182
1.2 Virusuri.....................................................................................186