Centrifree® ultrafiltreringsenheter - Millipore

Riktlinjer för användning
● Serum, plasma eller andra biologiska vätskor kan användas med Centrifree®-enheter. För effektivare
flödeshastighet, avlägsna fibrin genom att centrifugera provet innan du häller det i provkärlet.
● Den rekommenderade provvolymen är 0,15–1,0 ml.
● Använd en rotor med fast vinkel snarare än en ”swinging-bucket”-centrifugrotor för bästa resultat och
centrifugera vid 1 000–2 000 × g.
FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRD: Använd inte en relativ centrifugalkraft på över 2 000 × g.
● Gör preliminära studier av ligandadsorption och proteinretention för att säkerställa att systemet passar
din tillämpning.
● Ultrafiltreringsenheterna Centrifree® är avsedda att användas för biologiska vätskor och
vattenlösningar. Enheterna får inte användas med organiska lösningsmedel.
● Bestäm lämplig temperatur för din tillämpning. För att noggrant bestämma provets temperatur före
och efter centrifugering, för in en termistor eller ett termoelement genom provkärlets lock ner i provet
i provkärlet. Upprätthåll den önskade temperaturen med en värmecentrifug eller genom att förvärma
centrifugkammaren och rotorn. I en rotor med fast vinkel når enhetens innehåll värmejämvikt med
rotorn inom 5–10 minuter. Tack vare att ultrafiltreringen kan göras snabbt med Centrifree®-enheterna
minimeras temperaturens effekt på ligandbindning.
● Får inte användas för att koncentrera eller återvinna makromolekyler.
● Komponenterna får inte autoklaveras.
● Centrifree®-enheterna får inte återanvändas.
● Låt inte membranet i ultrafiltreringsenheterna torka ut efter att det har vätts. Om du inte tänker
använda enheten direkt efter försköljningen, lämna vätska på membranet tills enheten används igen.
● Ultracel®-membranet i enheten innehåller spårmängder av glycerin (~ 2 µl). Om detta ämne interfererar
med analysen, skölj enheten med avjoniserat vatten eller 0,1 N NaOH tills det inte längre finns
någon interferens. Om 0,1 N NaOH används för att tvätta bort glycerin, skölj enheten noggrant med
avjoniserat vatten eller buffert före användning. Centrifugera i minst 15 minuter för att avlägsna så
mycket vätska som möjligt. För att undvika spädningsfel p.g.a. att vätska har fastnat (~ 10 µl) efter
sköljningen, släng den första alikvoten av ultrafiltratet.
Hur ultrafiltreringsenheterna Centrifree® ska användas
Innan du använder en Centrifree®-enhet ska du avlägsna det röda locket på provkärlet.
1. Håll provkärlet i en vinkel på ungefär 45° med pipettspetsen mot provkärlets vägg. Pipettera
provlösningen i ett jämnt flöde för att undvika luftbubblor.
OBS! Undvik att röra vid membranet med pipettspetsen.
2. Sätt på locket på provkärlet och sätt ned enheten i en centrifugrotor med fast vinkel med 17 × 100 mm
adaptrar. Sätt ned en liknande enhet som motvikt för att balansera centrifugen.
OBS! Provkärlets röda lock får inte täcka mer än 3–4 mm av provkärlets övre kant. Om locket trycks
ned ytterligare kan detta orsaka förfiltrering, vilket kan leda till analysfel om provet inte har rätt
temperatur.
Centrifree® ultrafiltreringsenheter
3