Centrifree® ultrafiltreringsenheter - Millipore
Centrifree® ultrafiltreringsenheter - Millipore
Centrifree® ultrafiltreringsenheter - Millipore
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Hur <strong>ultrafiltreringsenheter</strong>na <strong>Centrifree®</strong> ska användas, fortsättning<br />
3. Se till att både enheten och provet når den temperatur som krävs för din tillämpning.<br />
4. Centrifugera enheten vid 1 000–2 000 × g tills du fått ut önskad filtratvolym. För riktlinjer om centrifugeringstid,<br />
se avsnitt ”Ultrafiltreringshastighet”.<br />
5. Ta försiktigt ut enheten ur centrifugrotorn och frigör filtratbehållaren som innehåller ultrafiltratet.<br />
Sätt på locket på filtratbehållaren tills ultrafiltratet ska analyseras.<br />
VARNING: Vid kassering av använda komponenter, följ försiktighetsåtgärderna för kassering av<br />
föremål som kontaminerats med potentiellt smittförande och farliga biologiska ämnen.<br />
Prestanda<br />
Följande avsnitt beskriver olika prestandaegenskaper som polariseringskontroll, ultrafiltreringshastighet,<br />
membranets prestanda, pH-kontroll och icke-specifik adsorption.<br />
Polariseringskontroll<br />
Användning av en rotor med fast vinkel möjliggör polariseringskontroll och minimerar risken för artefakter<br />
orsakade av protein-proteininteraktioner. Vinkeln motverkar ansamling av protein på membranytan eftersom<br />
dess täta skikt glider utåt, sidledes och ackumuleras vid membranets kant. I en ”swinging-bucket”-<br />
rotor kompakteras polariseringsskiktet över hela membranytan och begränsar därmed lösningsmedlets<br />
flöde.<br />
Proteinfritt<br />
ultrafiltrat<br />
Ultrafiltreringshastighet<br />
Kraftvektor<br />
Flödeshastigheten beror på provets proteinkoncentration, startvolym, relativ centrifugalkraft (RCF),<br />
rotortyp och temperatur. Höga flödeshastigheter fås vid maximal membranyta, polariseringskontroll och<br />
optimalt transmembrant tryck, vilket uppnås genom att använda provvolymer på över 300 µl. Optimala<br />
filtreringshastigheter uppnås vid 1 000–2 000 × g. Större centrifugalkraft ger ingen signifikant ökning av<br />
flödeshastigheten och rekommenderas inte.<br />
Jämförelse mellan centrifugrotorer med fast vinkel och ”swinging-bucket”<br />
Rotor RCF (× g) Typisk ultrafiltratvolym (µl)<br />
Fast vinkel (33°) 1 000 160–170<br />
”Swinging-bucket” 1 000 115–120<br />
1 ml normalt humant serum, 10 minuters centrifugering<br />
Serum<br />
eller<br />
plasma<br />
4 <strong>Centrifree®</strong> <strong>ultrafiltreringsenheter</strong>
Change language