labbrapport läkemedelskemi 1.pdf - Karlstads universitet

Isolering av lykopenLäkemedelskemiLabrapport I2011-05-02Student xStudent yKarlstads Universitet

InnehållsförteckningSammanfattning .............................................................................................................................................. 3Inledning ............................................................................................................................................................ 4Utförande ........................................................................................................................................................... 5Resultat och diskussion................................................................................................................................ 6Referenser ......................................................................................................................................................... 82

SammanfattningLykopen är det röda färgämnet som återfinns i röda frukter t.ex. tomat, grapefrukt ochvattenmelon. Lykopen är en mycket vanlig karoten som cirkulerar i blodplasman ikroppen och den har visat sig ha antioxidativa egenskaper. Syftet med laborationen varatt bestämma halten lykopen i tomatpuré. Metoden som användes var återloppskokningoch separation med silicakolonn. Resultatet visade något högre halt lykopen i tomatpuréän vad tidigare studier gjort, 2,08% jämfört med tidigare studiers resultat som varit0,29%.3

InledningLykopen är det röda färgämnet som återfinns i röda frukter t.ex. tomat, grapefrukt ochvattenmelon. Lykopen är en mycket vanlig karoten som cirkulerar i blodplasman ikroppen och den har visat sig ha antioxidativa egenskaper, vilket innebär att den hjälperkroppen att bekämpa fria radikaler som bildas 1, 2 Det har gjorts många studier pålykopen som visat att om man äter mat med hög lykopenhalt minskar risken att drabbasav olika hjärt-kärlsjukdomar och olika former av cancer. Genom att laga tomatbaseradmat, använda tomatpuré eller ketchup eller äta färsk tomat till sina måltider kan manlätt få i sig dagsbehovet av lykopen 3. Lykopen är unikt, då det vid upphettning inteförstörs som andra antioxidanter gör. Det har till och med visat sig att halterna lykopenär högre i tillagade tomatprodukter än i färska tomater 4Syftet med laborationen var att bestämma halten lykopen i tomatpuré. Metoden somanvändes var återloppskokning och separation med silicakolonn.4

Metod och utförande10 g tomatpuré vägdes in och blandades med 25ml Etanol och 50 ml Diklormetan, och fickåterloppskokas (enligt Figur till höger) i 5 min.Resterna av tomatpurén sugfiltrerades bort ochblandningen fördes över till en separationstratt.Till seperationstratten tillsattes 150 ml mättadNatriumklorid (NaCl). Separationstrattenskakades och det tryck som uppstod i trattensläpptes ut. Detta gjordes för att eventuellaföroreningar som fanns i DKM+Lycopen skullevandra över till NaCl- fasen. DKM+Lycopentappades urtratten och NaCl hälldes bort. DKM+Lycopenhälldes tillbaka i separationstratten och reningen med 150 ml NaCl upprepadesytterligare två gånget till. När detta var gjort och den renade DKM+Lycopen hade hälltsöver till en bägare tillsattes torkmedel, Magnesiumsulfat MgSO4, för att få bort vattensom eventuellt fanns kvar i blandning. Ett snötest gjordes och MgSO4 sugfiltrerades bort.DKM+Lycopen hälldes över till en rundbottnad flaska och rullindunstades för att få ettråutbyte…För att få fram den rena Lykopen så separerades lösningen med hjälp av ”Dry Flash”Kolonn Kromatogafi. (Figuren till Höger) Glasskolonnen packades med 40 g Silica. Dettagjordes i dragskåp eftersom Silican dammar. Silican packades så jämt som möjligt så attinga sprickor eller fickor fanns. Översta kanten jämnades till. Kolonnen prov elueradesmed lösning som innehöll 5 delar toluen och 1 del lätt petroleum och kolonnen ficksedan gå torrt.Råutbytet av Lykopen löstes upp med 5 ml lättpetroleum och fördes över till kolonnen.Kolonnen eluerades med Blandning av 5 delar toluen och 1 del lätt petroleum. 50 ml åtgången tillsattes till kolonnen och kolonnen fick gå torrt i mellan. Den första gulafraktionen som kom ut ur kolonnen hälldes bort. Den orangea fraktionen som kom efteratt ca 150 ml elueringslösning hade tillsatts, samlades upp i en flaska. Den orangeafraktionen var den renade lykopenen. Flaska vägdes och rullindunstades. Efterrullindunstningen vägdes flaskan igen och utbytet av Lykopen kunde räknas ut.5

Resultat och DiskussionRåutbyte lykopen:Vikt lykopen = 0,62 gVikt tomatpuré = 10,09 g0,62 g/10,09 g x 100 % = 6,14%Utbyte av ren lykopen:Vikt lykopen efter rullindunstning = 0,21 g0,21 g/10,09 g x 100 % = 2,08 %Enligt våra beräkningar är lykopenhalten i tomatpuré 2,08 %. Vi jämför vårt värde medett värde vi fann på NyfikenVital.org där det står att lykopenhalten i tomatpuré är 0,29% 5. Vårt resultat är ju betydligt högre än 0,29 %.Felkällor i laborationen kan vara att vi spillt ut delar av provlösningen underlaborationens gång, då det var många separationer och provlösningen hälldes fram ochtillbaka flera gånger. Vårt höga värde kan bero på att endel vätska fanns kvar irundkolven efter rullindunstningen.6

Ren Lykopen ger ett absorbans maximun på våglängd 444nm, 470nm och 501nmVårt UV-spektra visar att vi har fått ut ren lykopen.7

Referenser1 Nyfiken Vital, Hälsoblad: Lykopen och tomater, 2008, Tillgänglig på:http://www.nyfikenvital.org/?q=node/135 besökt: 2011-05-102 Medical Link 3W AB, Lykopen, tomatens röda antioxidant, kan skydda motateroskleros, 1999, Tillgänglig på:http://www.medicallink.se/news/shownews.cfm?newsid=1260 besökt: 2011-05-103 NiMaDe, Vad är lykopen?, Tillgänglig på:http://www.nimade.info/laka/2010/06/Vad-ar-Lykopen.html besökt: 2011-05-104 Kroppsnytt, Tomat, 2009, Tillgänglig på: http://www.kroppsnytt.se/Tomat.htmbesökt: 2011-05-105 Nyfiken Vital, Hälsoblad: Lykopen och tomater, 2008, Tillgänglig på:http://www.nyfikenvital.org/?q=node/135 besökt: 2011-05-108