PASTOREX™ MENENJİT ÇÖZÜLEBİLİR ANTİJENLERİN ... - Bio-Rad

a)CSF (Omurilik sıvısı)
Eğer CSF çok bulanık veya kırmızı kan hücreleri içeriyor ise 350 g’de 5
dakika santriüj edin ve süpernatant’ı toplayın.
• Numuneyi 100ºC’de (kurutma inkübatörü veya su banyosu) 3
dakika ısıtın. Numunenin oda ısısına gelmesini sağlayın. 3000
g’de 5 dakika santrifüj edin veya 0.45 µm’lik filtre kullanarak
süzün.
b)Serum
• Bir volüm seruma (0.5 ml) 3 volüm (1,5 ml) dilüent
(kod:61717) eklenir.
• 100ºC’de (kurutma inkübatörü veya su banyosu) 3 dakika ısıtın.
• 3000 g’de 5 dakika santrifüj edin.
Dikkat: Plazma numunesi kullanmayın. Albumin, lipit,
hemoglobin ve bilirubin fazlalığından oluşan etkileşim test
edilmedi. En iyi sonuçlar taze serum kullanılarak elde edildi.
c)İdrar
Testten önce antijen konsantrasyonunu artırmak için Amikon B15 tipi
memran üzerinde 25 kat’a kadar numune konsantre edilebilir.
• 100ºC’de (kurutma inkübatörü veya su banyosu) 3 dakika ısıtın.
• 3000 g’de 5 dakika santrifüj edin veya 0.45 µm’lik filtre
kullanarak süzün.
B)TEST İŞLEMİ
• Aglütinsyon kartının her bir dairesine ön işlem yapılan numunenin
süpernatantı bir damla (40 – 50 µl) koyulur.
• Lateks reaktif şişesini iyice çalkalayın.
• Şişeyi dik pozisyonda tutunuz, Dispozıbl kart’ın üzerine her bir lateks
reaktifinden bir damla koyunuz. Aşağıdaki belirtilen dağıtım şeklini
uygulayın. Beyaz daire içinde R9, R6,R7,R1,R2 ve siyah daire içinde
R8, R3,R4,R5.
• Çubuk kullanarak numuneleri ve lateks reaktiflerini karıştırın ve her
bir lateks için çubuğu değiştirin.
• Kartı 10 dakika 120 RPM’de döndürün. 10 dakika içinde çıplak gözle
görülebilir herhangi bir aglütünasyon oluşumunu izleyin (120 RPM
hız da orbital tipli agitatör kullanılabilir.)
8 – KAN KÜLTÜRÜ İŞLEMİ:
Olası oryantasyon için gram boyası ve şekilleri kontrol edin.
• Pozitif kan kültüründen 1-2 ml alın.
• 2000 g’de 5 dakika santrifüj edin.