22.08.2013 Views

PASTOREX™ MENENJİT ÇÖZÜLEBİLİR ANTİJENLERİN ... - Bio-Rad

PASTOREX™ MENENJİT ÇÖZÜLEBİLİR ANTİJENLERİN ... - Bio-Rad

PASTOREX™ MENENJİT ÇÖZÜLEBİLİR ANTİJENLERİN ... - Bio-Rad

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

PASTOREX <strong>MENENJİT</strong><br />

25 Test<br />

61607 61611 61616<br />

61608 61613 61618<br />

61610 61614 61717<br />

<strong>ÇÖZÜLEBİLİR</strong> <strong>ANTİJENLERİN</strong><br />

BELİRLENMESİ VE STREPTOKOK B,<br />

STREPTOKOK ZATÜRRE, BAKTERİYAL<br />

GRİP b, B/E.KOLI K1, NEISSERIA<br />

MENENJIT A,C,Y/W 135’İN TEŞHİSİ.


1-KLİNİK DEĞERİ<br />

Bakteriyal menenjit, beyin- omurilik zarı enfeksiyonudur. Neden olan<br />

başlıca organizmalar: Streptokok grup B, Haemophilus grip tip b,<br />

streptokok zatürre, Neisseria menenjit.<br />

Menenjit ciddi bir durumdur, bu nedenle uygun tedavinin başlaması için<br />

enfeksiyonun hızla teşhis edilmesi önemlidir. Kültür ile belirleme<br />

alışılagelmiş yöntemdir, teşhisin konfirmasyonu ve antibiyogram için<br />

mutlaka gereklidir. Eğer numune transfer edilecek ise, uygun olmayan<br />

koşullarda saklanmamış ise ve numune alınmadan önce antibiyotik<br />

tedavisine başlanmış ise yanlış negatif sonuçlar verebilir.<br />

İnfeksiyon esnasında serum, idrar ve CSF gibi biyolojik sıvıların içindeki<br />

neden olan organizmalar ile serbest kalan çözünür antijenlerin<br />

belirlenmesi için immünolojik yöntemdir ve teşhisin daha hızlı olmasını<br />

sağlar. Bu kitle dedekte edilebilen çözünür antijenler, kesin serogrup<br />

veya serotipler için spesifik polisakkaridlerdir: Streptokok zatürre(83 tip),<br />

Haemophilus grip tip b, Neisseria menenjit A grubu, grup B/E.koli K1,<br />

grup C, grup Y/W 135ve streptokok grup B.<br />

Meningococcus serogrup B için spesifik polisakkarid antijeni sadece çok<br />

yavaş antijeniktir ve bu antijene karşı direkt özel olan tekrar üretilebilir<br />

tavşan antikorlarını elde etmek her zaman çok zor olmuştur.<br />

Monoklonal antikor tekniği,Meningococcus serogrup B polisakkarid<br />

antijeninin yeniden üretilebilirliğini tanımlayan ve özelliğini belirleyen<br />

monoclonal fare antikorlarının üretimine izin veren spesifik bakteriyal<br />

polisakkarid antijenlerinin hazırlanması için uygulandı.<br />

Meningococcus serogrup B için bu polisakkarid spesifik antijen, E.koli<br />

K1 ile bulunan polisakkarid antijeni ile benzerdir. Meningococcus B ve<br />

E. koli K1 arasındaki bu antijenik benzerlik . yenidoğanlarda yaklaşık<br />

%80 K1 türünden olan E.koli menenjitin teşhisini sağlar.<br />

E.koli ve streptokok B yenidoğan veya premature doğumlarda menenjit’e<br />

neden olan en önemli bakteridir ve meningococcal infeksiyon bu yaş<br />

grubunda çok seyrek görülür.<br />

2-PRENSİP<br />

Spesifik homolog antikorları ile kaplı lateks partikülleri kullanılarak<br />

numunenin içerdiği antijeni test eder. Homolog antijenlerin varlığında<br />

lateks partiküllerine yapışır. Antijenin yokluğunda homojen süspansiyon<br />

içinde kalır.


3-TANITIM<br />

1. PASTOREX <strong>MENENJİT</strong>, 25 testlik kit- kod 61607 şunları içerir:<br />

• Reaktif 1 (R1): N. menenjıt B/E. koli K1<br />

1 şişe, 0.4 ml, N. menenjıt grup B/E. koli K1 için fare monoclonal<br />

özel antikorları ile hassaslaştırılmış kırmızı lateks.<br />

• Reaktif 2 (R2): N. menenjıt B/E. koli K1 negatif kontrol<br />

1 şişe, 0.4 ml, tetanus toxoidler için fare monoclonal özel antikorları<br />

ile hassaslaştırılmış kırmızı lateks.<br />

• Reaktif 3 (R3): H. grip b<br />

1 şişe, 0.4 ml, H. grip tip b için tavşan özel antikorları ile<br />

hassaslaştırılmış beyaz lateks.<br />

• Reaktif 4 (R4): S. zatürre<br />

1 şişe, 0.4 ml, S.zatürre için tavşan özel antikorları ile<br />

hassaslaştırılmış yeşil lateks.<br />

• Reaktif 5 (R5): Steroptokop B<br />

1 şişe, 0.4 ml, Steroptokop B için tavşan özel antikorları ile<br />

hassaslaştırılmış sarı lateks.<br />

• Reaktif 6 (R6): N.Menenjit A<br />

1 şişe, 0.4 ml, N.Menenjit A grubu için tavşan özel antikorları ile<br />

hassaslaştırılmış mavi lateks.<br />

• Reaktif 7 (R7): N.Menenjit C<br />

1 şişe, 0.4 ml, N.Menenjit C grubu için tavşan özel antikorları ile<br />

hassaslaştırılmış kırmızı lateks.<br />

• Reaktif 8 (R8): N.Menenjit Y/W 135<br />

1 şişe, 0.4 ml, N.Menenjit Y/W 135 için tavşan özel antikorları ile<br />

hassaslaştırılmış pembe lateks.<br />

• Reaktif 9 (R9): Polivalent negatif kontrol<br />

1 şişe, 0.4 ml, bağışıklığı olamayan tavşan’dan alınan IgG<br />

immünglobülinleri ile hassaslaştırılmış mor lateks.<br />

• Reaktif 10 (R10): Polivalent pozitif kontrol<br />

Pozitif control: Dondurularak kurutulmuş antijenik madde.1 ml distile su<br />

ile çözülür. S.zatürre, storoptokok B, H. grip b, N.menenjit<br />

A,C,B,Y/W135’in polisakkarid antijenlerini içerir. Miktar 20 reaksiyon<br />

için yeterlidir.<br />

Tüm reaktifler %0.02 trimesol içerir.<br />

R1,R2,R3,R4,R5,R6,R7,R8,R9 reaktifleri %0.1’den az sodium azid<br />

içerir.


• Tek kullanımlık aglütinasyon kartları<br />

• Tek kullanımlık karıştırma çubukları<br />

2. PASTOREX <strong>MENENJİT</strong> LATEKS TEST (her biri25 testlik):<br />

• Tek lateks testi (kontrolsüz)<br />

1. N.Menenjit A (R6) kod:61608<br />

2. N.Menenjit C (R7) kod:61610<br />

3. N.Menenjit B/E Koli K1 (R1) kod:61611<br />

4. Streptokok B(R5) kod:61613<br />

5. zatürre streptokok (R4) kod:61614<br />

6. Grip b Hemaphilius (R3) kod:61616<br />

• Pastorex Menenjit Kontrol<br />

1. Kontrol reaktif kitleri tek lateks testi için (2x25 test) kod: 61618<br />

2. 2 şişe, 0.4 ml polyvalent negatif control (R9)<br />

3. 2 şişe, dondurularak kurutulmuş polivalent pozitif control(R10),1<br />

ml distile su ile çözülür.<br />

4. 2 şişe, 0.4 ml N.m.B./E koli K1 (R2) negatif control<br />

5. Tek kullanımlık kart<br />

6. Tek kullanımlık karıştırma çubuğu<br />

• Pastorex Menenjit Dilüent<br />

1 şişe, 40 ml serum için dilüent kod: 61717<br />

4-DEPOLAMA<br />

• Tüm reaktifler 2-8ºC’de saklandığındaa ve açılan şişeler dahil<br />

mikrobiyal kontaminasyon olmadığında,son kullanma tarihine kadar<br />

stabildir.<br />

• Polivalent kontrol R10, çözüldükten sonra mikrobiyal kontaminasyon<br />

yok ise 2-8ºC’de 1 ay stabildir veya hemen porsiyonlanıp -20ºC’de<br />

saklanır ise daha uzun süre kullanılabilir.<br />

• Lateks reaktiflerini dik pozisyonda tutun<br />

• LATER REAKTİFLERİ DONDURULMAMALIDIR..<br />

5-GEREKLİ AMA SAĞLANMAYAN MATERYALLER<br />

• Serum dağıtmak için 40-50µl’lik pipet.<br />

• Kapiler veya Ependorf tüpler<br />

• Kurutma inkübatörü veya 100ºC’de su banyosu<br />

• Kapiler veya ependorf tüpler için santrifüj


• Dezenfektan banyosu<br />

• Steril distile su, steril izotonik veya dilüent (kod:61717)<br />

6-ÖNLEMLER<br />

Sonuçların kalitesi ,iyi laboratuvar çalışmalarının sıkıca uygulanmasına<br />

bağlıdır.<br />

• Tüm numune ve reaktifler oda ısısısnda 18-25 ºC’de kullanılmalıdır.<br />

• Aglütünasyon kartının reaksiyon yüzeyine dokunmayınız.<br />

• Test edilecek her numune için pipet veya pipet ucunu değiştirin.<br />

• Kullanım öncesi latex şişesini çalkalayın.<br />

• İyi kalibre edilmiş damlaları elde etmek için kit şişe damlalığının<br />

ucunu temizleyin.<br />

• Kalıntı damlalar için kit şişesini yatay tutun.<br />

• Her reaksiyon için test çubuğunu değiştirin.<br />

• Tüm tek kullanımlık materyalleri otoklavlanabilir çöp kutularına veya<br />

infeksiyonu arındırıcı banyolara atın.<br />

• Polivalent pozitif kontrolü herhangi bir kontaminasyondan sakınmak<br />

için steril distile su ile çözün.<br />

HİJYEN VE GÜVENLİK TALİMATLARI<br />

Daima ,mikrobiyal tehlikelere karşı korunma ile ilgili güncel teknikleri<br />

ve önlemleri gözlemleyin.<br />

• Tüm numuneleri potensiyal infekte edici gibi düşünün.<br />

7- SERUM, İDRAR VE CSF İÇİN KULLANIM TALİMATLAR<br />

Numuneler<br />

Numuneler toplanır toplanmaz işleme alınmalıdır. Eğer bu mümkün değil<br />

ise,2-8 ºC’de birkaç saat saklanabilirler veya daha uzun süreler için –20<br />

ºC’de derecede (santrifüjden sonra -20ºC’de sadece üstfaz tutulabilir)<br />

saklanabilir. Tekrar çözündürüp dondurmaktan sakının. Numunenin<br />

kontaminasyonunu önlemek için öncelikli olarak bakteriyal inceleme(kültür)<br />

yapılmalıdır. Lateks kit ile test için minumum numune volümü 0.5 ml’dir.<br />

A) KLİNİK NUMUNELERİN HAZIRLANMASI<br />

Dikkat: Su banyosu kullanırken suyun tüpe girmemesi için su geçirmez<br />

tüpler kullanın. Eğer mümkünse kurutma inkübatörü kullanın.


a)CSF (Omurilik sıvısı)<br />

Eğer CSF çok bulanık veya kırmızı kan hücreleri içeriyor ise 350 g’de 5<br />

dakika santriüj edin ve süpernatant’ı toplayın.<br />

• Numuneyi 100ºC’de (kurutma inkübatörü veya su banyosu) 3<br />

dakika ısıtın. Numunenin oda ısısına gelmesini sağlayın. 3000<br />

g’de 5 dakika santrifüj edin veya 0.45 µm’lik filtre kullanarak<br />

süzün.<br />

b)Serum<br />

• Bir volüm seruma (0.5 ml) 3 volüm (1,5 ml) dilüent<br />

(kod:61717) eklenir.<br />

• 100ºC’de (kurutma inkübatörü veya su banyosu) 3 dakika ısıtın.<br />

• 3000 g’de 5 dakika santrifüj edin.<br />

Dikkat: Plazma numunesi kullanmayın. Albumin, lipit,<br />

hemoglobin ve bilirubin fazlalığından oluşan etkileşim test<br />

edilmedi. En iyi sonuçlar taze serum kullanılarak elde edildi.<br />

c)İdrar<br />

Testten önce antijen konsantrasyonunu artırmak için Amikon B15 tipi<br />

memran üzerinde 25 kat’a kadar numune konsantre edilebilir.<br />

• 100ºC’de (kurutma inkübatörü veya su banyosu) 3 dakika ısıtın.<br />

• 3000 g’de 5 dakika santrifüj edin veya 0.45 µm’lik filtre<br />

kullanarak süzün.<br />

B)TEST İŞLEMİ<br />

• Aglütinsyon kartının her bir dairesine ön işlem yapılan numunenin<br />

süpernatantı bir damla (40 – 50 µl) koyulur.<br />

• Lateks reaktif şişesini iyice çalkalayın.<br />

• Şişeyi dik pozisyonda tutunuz, Dispozıbl kart’ın üzerine her bir lateks<br />

reaktifinden bir damla koyunuz. Aşağıdaki belirtilen dağıtım şeklini<br />

uygulayın. Beyaz daire içinde R9, R6,R7,R1,R2 ve siyah daire içinde<br />

R8, R3,R4,R5.<br />

• Çubuk kullanarak numuneleri ve lateks reaktiflerini karıştırın ve her<br />

bir lateks için çubuğu değiştirin.<br />

• Kartı 10 dakika 120 RPM’de döndürün. 10 dakika içinde çıplak gözle<br />

görülebilir herhangi bir aglütünasyon oluşumunu izleyin (120 RPM<br />

hız da orbital tipli agitatör kullanılabilir.)<br />

8 – KAN KÜLTÜRÜ İŞLEMİ:<br />

Olası oryantasyon için gram boyası ve şekilleri kontrol edin.<br />

• Pozitif kan kültüründen 1-2 ml alın.<br />

• 2000 g’de 5 dakika santrifüj edin.


• Dispozıbl kartların her bir dairesine süpernatant’ın bir damlasınını<br />

(40-50 µl) koyun.Gram boyasına göre ilgili lateks reaktileri test<br />

edilmelidir.<br />

• Test için seçilen lateks reaktif şişeleri iyice çalkalanmalıdır.<br />

• Şişeyi dik pozisyonda tutunuz, süpernatant damlalarının dış<br />

yüzeyine her bir seçili lateks reaktifinin bir damlası koyulur.<br />

• Çubuk kullanarak numuneleri ve lateks reaktiflerini karıştırın ve<br />

her bir lateks için çubuğu değiştirin.<br />

• Kartı 5 dakika 120 RPM’de döndürün. 5 dakika içinde<br />

aglütünasyon oluşumunu kontrol edin.<br />

Bazı kan kültürleri spesifik reaksiyon vermeyebilir veya yorumu<br />

problemli olabilir. Negatif kontrol olarak steril kan ile aşılı kan<br />

kültürü kullanın veya Pastorex Menenjit ile dedekte edilenden farklı<br />

bir organizma kullanın.<br />

9-SONUÇLARIN YORUMLANMASI<br />

POSİTİF REAKSİYON<br />

Positif reaksiyon iyi aglütünasyon ile belirlenir, çıplak gözle görülebilir,<br />

negatif kontrol ile karşılaştırılır.<br />

Aglütünasyonun şiddeti ve görünme zamanı test edilen numunedeki<br />

antijen konsantrasyonuna bağlıdır.<br />

Pozitif antijen testi ile negatif kültür arasındaki fark, kültür yapılan<br />

numunedeki uygun bakterinin yokluğu ile açıklanabilir (Numune,<br />

antibiotik tedavisi başlamadan önce alınmalıdır veya transfer koşulları<br />

narin bakterilerin hayatta kalmasına uygun olmamalıdır.<br />

Çogu zaman yeni veya pramatüre doğumda anti-N.menenit B/E koli K1<br />

lateks ile pozitif bir reaksiyon E.koli K1 ile infeksiyon oluşturur. Eski<br />

konularda meningococcus B daha fazla olasıdır.. Numune kültürü teşhis<br />

ile konfirme edilmelidir.<br />

NEGATİF REAKSİYON<br />

Kümesiz homojen süspansiyon.<br />

YORUMLANAMAYAN SONUÇLAR<br />

Lateks negatif kontrolleri (R2 veya R9) ile numune aglütine olursa veya<br />

kitin içinde birden fazla lateks reaktifi var ise bu durumda reaksiyon<br />

yorumlanmazdır. Bu durumda test bir başka numune ile tekrarlanmalıdır ve<br />

kültür sonucu için beklenmelidir.( Çok seyrek olarak infeksiyon iki farklı<br />

bakteri türünden olabilir.)


10-PROSEDÜR:AGAR’DA İZOLE EDİLEN BAKTERİ TÜRLERİNİN<br />

GRUBU( Taze ve saf kültürden koloniler)<br />

Lateks Y/W 135, bakteri türleri grubu için kullanılamaz.<br />

Bu grubu belirlemek için alışılagelmiş antisera kullanımı önerilir (Kit Y,<br />

W135,29E: Ref:58704,3x1 ml).<br />

Test’e başlamadan önce olası oryantasyon için:<br />

• Gram boyasını ve morfolojiyi kontrol edin.<br />

• Gram negatif bakteri için oksidaz testi yapın (N menenjit için<br />

pozitif, E koli K1 için negatif).<br />

• Gram pozitif koküs için katalaz testi yapın.(Pozitif tür için katalaz<br />

test etmeyin)<br />

Sarmalanmayan S.zatürre ve hemophilis grip türleri bu teknik ile<br />

belirlenemez.<br />

a) Gruplandırma: N.menenjit (sadece A,B,C), H.grip, E.koli, S.zatürre.<br />

• Steril izotonik solüsyonunun 30 µl’sini dispozıbl kartaki<br />

yuvarlağın içine damlatın.<br />

• Numune:<br />

Eşşarie koli, hemolipus grip ve neserrria Menenjit için: 1 µl<br />

düğümün eşdeğeri, maximum 2-3 koloni olanlar<br />

• Stereptokok zatürre için düğümün 5 µl’sinin eşdeğeri<br />

minumum, 10-12 kolonidir.<br />

• Homojen süspansiyon elde etmek için numune kolonilerini<br />

dikkatlice emilsiyon yapılmalı.<br />

• Tanımlama için seçilen lateks reaktif şişesini iyice<br />

çalkalayın, şişeyi dik konumda tutun, bakteri<br />

süspansiyonunun damlasının dış kenarında bu lateksin bir<br />

damlasını yerleştirin.<br />

• Bir çubuk kullanarak süspansiyonu ve lateksi karıştırın.<br />

• Kartı 120 RPM’de çevirin.<br />

• 2 dakikadan az bir sürede temiz herhangi bir aglütünasyonun<br />

oluşması gözlenir.<br />

Alışılagelmiş biyokimyasal testler kullanılarak tür belirleme<br />

konfirme edilir.<br />

b)Gruplandırma: Stereptokok B( B-hemolitik koloni)<br />

• Tood Hewitt’in 2 ml’sinin içinde 5 koloni durdurun.<br />

• 37 ˚C su banyosund 2-3 saat inkübe edin.


• Süpernatantın 1 damlasını (40-50 µl) dispozıbl kartın<br />

üzerindeki bir daireye yerleştirin.<br />

• Lateks reaktif şişesini iyice çalkalayın, şişeyi dik<br />

pozisyonda tutun, bu lateksin bir damlasını ,<br />

süpernatantın damlasının dış kenarına yerleştirin.<br />

• Bir çubuk kullanarak numuneyi ve lateksi karıştırın.<br />

• Kartı 120 RPM’de döndürün.<br />

• 1 dakikadan az bir sürede herhangi bir temiz<br />

aglütünasyonun oluşmasını gözlemleyin.<br />

Alışılagelmiş biyokimyasal testler kullanılarak tür belirleme<br />

konfirme edilir. İzole kolonilerden direkt ekstraksiyon için<br />

PASTOREX STREP kiti (kod:61721) kullanın.<br />

11-TESTİN KALİTE KONTROLÜ<br />

Lateks reaktifi çalkalandıktan sonra tamamen homojen hale gelmelidir.<br />

Polivalent pozitif kontrol (R10), her bir lateks immuno reaktiviteyi<br />

geçerlendirebilmek için kullanılır.<br />

• Kalite kontrol testini çalışmak için, dispozıbl kartın her bir<br />

dairesine pozitif kontrolün (R10) bir damlası (40 µl) yerleştirilir.<br />

• Lateks reaktif şişesini iyice çalkalayın.<br />

• Şişeyi dik pozisyonda tutun, dispozıbl karta her bir latek<br />

reaktifinde 1 damla yerleştirin, aşağıda belirtilen dağıtım sırasına<br />

uyun: beyaz yuvarlaklarda R9, R6, R7, R1,R2 ve siyah<br />

yuvarlaklarda R8, R3, R4, R5.<br />

• Çubuk kullanarak pozitif kontrol ve lateks reaktifini kullanın ve<br />

her bir lateks için çubuğu değiştirin.<br />

• Kartı 120 rpm’de 10 dakika döndürün. Bu 10 dakika içinde çıplak<br />

gözle herhangi bir aglütünasyon oluşumunu kontrol edin (test<br />

lateks reaksiyonunu, negatif kontrol lateksi ile karşılaştırın).<br />

Aglütünasyon şiddeti ve oluşma hızı antijen/antikor aviditesine<br />

bağlıdır. Sonuç olarak reaksiyonlar, her bir lateks’in değişkenliği ile<br />

gözlenebilir. NmB/Koli K1 lateksi diğerlerinden daha iyidir.<br />

• Her bir lateksin spesifik olmayan aglütünasyonlarının yokluğunu<br />

izotonik solüsyonu veya dilüent (kod: 61717) kontrol eder.<br />

Kalite kontrol testini çalışmak için, polivalent pozitif kontrol<br />

protokolüne göre fizyolojik izotonik veya dilüent R11 (kod:61717)<br />

kullanılır.


• Polivalent pozitif kontrol (R10) ile aglütine olmadığında, izotonik<br />

veya dilüent (kod 61717) ile spesifik olmayan aglütünasyon<br />

olmadığında lateks reaktifi kullanılmamalıdır (kitin yanlış<br />

depolanmasından veya lateks reaktifinin kontaminasyonundan<br />

kaynaklanabilir).<br />

12-ÜRETİCİNİN KALİTE KONTROLÜ<br />

Tüm üretilen reaktifler, ham maddeden başlayarak son olarak<br />

ticari ürün haline gelene kadar bizim kalite sistemimize göre<br />

hazırlanmıştır. Her bir lot kalite kontrol’e tabi tutulmuştur ve<br />

kabul edilebilir sınırlar içinde olan ürünler pazara sunulmuştur.<br />

Her bir lot için kalite kontrol kayıtları <strong>Bio</strong>-<strong>Rad</strong>’da tutulmaktadır.<br />

13- TEST PERFORMANSI<br />

HASSASİYET<br />

Kitteki her bir reaktifin hassasiyeti aşağıda belirtilen numunelerin analizi ile<br />

belirlenmiştir.<br />

• Saflaştırılmış antijen izotonikde dilüe<br />

• Alışılagelmiş analiz tekniği ile belgelenmiş beyin omurilik<br />

sıvısının klinik numunesi<br />

• Mueller Hinton agarı, çikolatalı + PVS agarı, Kolombia %+5<br />

koyun kanlı agar üzerindeki kültürden izole edilen çeşitler.


ÖZGÜLLÜK<br />

Her bir reaktifin hassasiyeti aşağıda belirtilen numunelerin analizi ile<br />

belirlenmiştir.<br />

• Steril CSF (a) veya menenjitden sorumlu bakteri ile kontamine olmuş<br />

CSF ve lateks(b) ile belirlenenlerden farklı.<br />

• Genuses Neisseria, Branhamella, Acinetobacter, streptokok,<br />

Klepsiella, Haemophilus, Eschericha coli non K1, Pseudomonas’a ait<br />

türler lateksden başka kaynaklar ile test edildi.


Neisseria flavescens’in 1/1 türü, Klebsiella pneumoniae ‘nin 2/4 türü,<br />

Acinetobacter’in 2/5 türü spesifik olmayan reaksiyon verir.<br />

KAN KÜLTÜRÜ<br />

Pastorex Menenjit’in performansı kan kültüründe test edildi. Bu ölçümün<br />

sonuçları:<br />

• Hassasiyet: %100 (4/4 S.pneumoniae’nin 2çeşidini ve streptokok<br />

B’nin 2 çeşidini içerir)<br />

• Özgüllük: %100 (37/37). R3, R4, R5, R6, R7 ve R8 reaktifleri için.<br />

• Özgüllük : %97.5 (39/40). R1 reaktifi için.<br />

Klebsiella pneumoniae ile 3 kan kültürü içinde 1 tanesi spesifik<br />

olmayan reaksiyon verir.<br />

14.TESTİN LİMİTLERİ<br />

• Pek çok vakada immunolojik lateks tekniği, organizmanın olası<br />

teşhisini sağlar. Bununla beraber numunedeki antijen<br />

konsantrasyonu lateksde belirtilen düşük limitin altında olabilir ve<br />

sonuç negatif olarak kabül edilir. Bu durumda daha sonra<br />

numunenin tekrarlanması yararlı olabilir.


• Bu yöntem bakteri ekimi yerine koyulamaz, antimikrobial süpheli<br />

sonuçların oluşmasını sağlar.<br />

• Kan kültürünün geniş çeşitliliği gözönünde bulundurularak tüm<br />

ortamlar için performans garanti edilemez.(Cf. 7-D)<br />

• Lateks reaktifi kullanarak serum ve idrardaki antijenin belirlenmesi<br />

ile ilgili klinik ve biyolojik bilgiler şu anda sınırlıdır.<br />

• Benzer antijen alakasız bakteri işlemine bir kaç örnek rapor edildi.<br />

Her zaman çapraz reaksiyon olasılıgı göz önünde<br />

bulundurulmalıdır (1,4,5).<br />

• Tüm laboratuvar teşhisleri için son teşhis, bir test sonucuna<br />

dayandırılmamalıdır, hastanın klinik verileri ve biyokimyasal,<br />

stolojik ve immunolojik sonuçları da değerlendirilmelidir.<br />

• Bakteri türünün spesifik olarak belirlenmesi için kan kültüründe<br />

çözünür antijen belirlemenin yanısıra, agar’da isole türlerin<br />

gruplandırılması da tamamlanmalıdır.<br />

15-REFERANSLAR<br />

1. BRADSHAW M.W., CHNEERSON R., PARKE J.C. Jr., ROBBINS<br />

J.B. Bacterial antigens cross-reactive with the capsular<br />

polysaccharide of Haemophilus influenzae, type b. Lancet, 1971,<br />

i (May 29), 1095-1097<br />

2. DENIS F. et MOUNIER M. Le diagnostic rapide des méningites<br />

cérébrospinales: techniques, résultats, limites et perspectives.<br />

Méd. Mal. Infect.,1984, 14, 27-36<br />

3. DENIS F., SAULNIER M. et CHIRON J.P. Diagnostic étiologique<br />

rapide des méningites purulentes par agglutination passive<br />

indirecte de particules de latex et par contreimmunoéléctrophorèse<br />

: expérience et perspectives. Bull. O.M.S.,<br />

1981, 59, 143-151<br />

4. KASPER D.L., WINKELHAKE J.L., ZOLLINGER W.D., BRANDT<br />

B.L., and ARTENSTEIN M.S. Immunochemical similarity between<br />

polysaccharide antigens of Escherichia coli 07:K1 (L) : NM and<br />

group B Neisseria meningitidis. J. Immunol., 1973, 110, 262-268.<br />

25


5. LEE P.C. and WETHERALL B.L. Cross-reaction between<br />

Streptococcus pneumoniae and group C streptococcal latex<br />

reagent. J. Clin. Microbiol., 1987, 25, 152-153<br />

6. LEINONEN M. and HERVA E. The latex agglutination test for the<br />

diagnosis of meningococcal and Haemophilus influenzae<br />

meningitis. Scand. J. Infect.,1977, 9,187-191<br />

7. LUND E. and HENRICHSEN J. Laboratory diagnosis, serology<br />

and epidemiology of Streptococcus pneumoniae. In Methods in<br />

Microbiology, T. Bergan and J.R. Norris edit., 1978, 12, chap. XI,<br />

241-262 (Academic press, London, New-York, San Francisco)<br />

8. TESSIER F. Dépistage et identification des streptocoques du<br />

groupe B. Intérêt en périnatologie. Extrait de LABORAMA n°14,<br />

oct. 1982, Institut Pasteur Production edit.<br />

9. NEWMAN R.B., STEVENS R.W. and GAAFAR H.A. Latex<br />

agglutination test for the diagnosis of Haemophilus influenzae<br />

meningitis. J. Lab. Clin. Med., 1970, 76, 107-113<br />

10. ROBBINS J.B., Mc CRACKEN G.H. Jr., GOTSCHLICH G.C.,<br />

ORSKOV F., ORSKOV I., HANSON L.A. Escherichia coli K1<br />

capsular polysaccharide associated with neonatal meningitis. New<br />

Engl. J. Med. 1974, 290, 1216-1220<br />

11. P. GESLIN et coll., Centre National de Référence des<br />

Pneumocoques: Rapport d'activité 1997.<br />

12. ASUNCIÓN FENOLL, ISABEL JADO, DOLORES VICIOSO,<br />

AMALIA PÉREZ, and JULIO CASAL. Evolution of Streptococcus<br />

pneumoniae Serotypes and Antibiotic Resistance in Spain :<br />

Update (1990 to 1996). J. Clin. Microbiol.,1998, 36, 3447-3454<br />

<strong>Bio</strong>-<strong>Rad</strong><br />

3, boulevard Raymond Poincaré<br />

92430 Marnes-la-Coquette France<br />

Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00 06/2008<br />

Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33 code : 881019

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!