PASTOREX™ MENENJİT ÇÖZÜLEBİLİR ANTİJENLERİN ... - Bio-Rad
PASTOREX™ MENENJİT ÇÖZÜLEBİLİR ANTİJENLERİN ... - Bio-Rad
PASTOREX™ MENENJİT ÇÖZÜLEBİLİR ANTİJENLERİN ... - Bio-Rad
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
PASTOREX <strong>MENENJİT</strong><br />
25 Test<br />
61607 61611 61616<br />
61608 61613 61618<br />
61610 61614 61717<br />
<strong>ÇÖZÜLEBİLİR</strong> <strong>ANTİJENLERİN</strong><br />
BELİRLENMESİ VE STREPTOKOK B,<br />
STREPTOKOK ZATÜRRE, BAKTERİYAL<br />
GRİP b, B/E.KOLI K1, NEISSERIA<br />
MENENJIT A,C,Y/W 135’İN TEŞHİSİ.
1-KLİNİK DEĞERİ<br />
Bakteriyal menenjit, beyin- omurilik zarı enfeksiyonudur. Neden olan<br />
başlıca organizmalar: Streptokok grup B, Haemophilus grip tip b,<br />
streptokok zatürre, Neisseria menenjit.<br />
Menenjit ciddi bir durumdur, bu nedenle uygun tedavinin başlaması için<br />
enfeksiyonun hızla teşhis edilmesi önemlidir. Kültür ile belirleme<br />
alışılagelmiş yöntemdir, teşhisin konfirmasyonu ve antibiyogram için<br />
mutlaka gereklidir. Eğer numune transfer edilecek ise, uygun olmayan<br />
koşullarda saklanmamış ise ve numune alınmadan önce antibiyotik<br />
tedavisine başlanmış ise yanlış negatif sonuçlar verebilir.<br />
İnfeksiyon esnasında serum, idrar ve CSF gibi biyolojik sıvıların içindeki<br />
neden olan organizmalar ile serbest kalan çözünür antijenlerin<br />
belirlenmesi için immünolojik yöntemdir ve teşhisin daha hızlı olmasını<br />
sağlar. Bu kitle dedekte edilebilen çözünür antijenler, kesin serogrup<br />
veya serotipler için spesifik polisakkaridlerdir: Streptokok zatürre(83 tip),<br />
Haemophilus grip tip b, Neisseria menenjit A grubu, grup B/E.koli K1,<br />
grup C, grup Y/W 135ve streptokok grup B.<br />
Meningococcus serogrup B için spesifik polisakkarid antijeni sadece çok<br />
yavaş antijeniktir ve bu antijene karşı direkt özel olan tekrar üretilebilir<br />
tavşan antikorlarını elde etmek her zaman çok zor olmuştur.<br />
Monoklonal antikor tekniği,Meningococcus serogrup B polisakkarid<br />
antijeninin yeniden üretilebilirliğini tanımlayan ve özelliğini belirleyen<br />
monoclonal fare antikorlarının üretimine izin veren spesifik bakteriyal<br />
polisakkarid antijenlerinin hazırlanması için uygulandı.<br />
Meningococcus serogrup B için bu polisakkarid spesifik antijen, E.koli<br />
K1 ile bulunan polisakkarid antijeni ile benzerdir. Meningococcus B ve<br />
E. koli K1 arasındaki bu antijenik benzerlik . yenidoğanlarda yaklaşık<br />
%80 K1 türünden olan E.koli menenjitin teşhisini sağlar.<br />
E.koli ve streptokok B yenidoğan veya premature doğumlarda menenjit’e<br />
neden olan en önemli bakteridir ve meningococcal infeksiyon bu yaş<br />
grubunda çok seyrek görülür.<br />
2-PRENSİP<br />
Spesifik homolog antikorları ile kaplı lateks partikülleri kullanılarak<br />
numunenin içerdiği antijeni test eder. Homolog antijenlerin varlığında<br />
lateks partiküllerine yapışır. Antijenin yokluğunda homojen süspansiyon<br />
içinde kalır.
3-TANITIM<br />
1. PASTOREX <strong>MENENJİT</strong>, 25 testlik kit- kod 61607 şunları içerir:<br />
• Reaktif 1 (R1): N. menenjıt B/E. koli K1<br />
1 şişe, 0.4 ml, N. menenjıt grup B/E. koli K1 için fare monoclonal<br />
özel antikorları ile hassaslaştırılmış kırmızı lateks.<br />
• Reaktif 2 (R2): N. menenjıt B/E. koli K1 negatif kontrol<br />
1 şişe, 0.4 ml, tetanus toxoidler için fare monoclonal özel antikorları<br />
ile hassaslaştırılmış kırmızı lateks.<br />
• Reaktif 3 (R3): H. grip b<br />
1 şişe, 0.4 ml, H. grip tip b için tavşan özel antikorları ile<br />
hassaslaştırılmış beyaz lateks.<br />
• Reaktif 4 (R4): S. zatürre<br />
1 şişe, 0.4 ml, S.zatürre için tavşan özel antikorları ile<br />
hassaslaştırılmış yeşil lateks.<br />
• Reaktif 5 (R5): Steroptokop B<br />
1 şişe, 0.4 ml, Steroptokop B için tavşan özel antikorları ile<br />
hassaslaştırılmış sarı lateks.<br />
• Reaktif 6 (R6): N.Menenjit A<br />
1 şişe, 0.4 ml, N.Menenjit A grubu için tavşan özel antikorları ile<br />
hassaslaştırılmış mavi lateks.<br />
• Reaktif 7 (R7): N.Menenjit C<br />
1 şişe, 0.4 ml, N.Menenjit C grubu için tavşan özel antikorları ile<br />
hassaslaştırılmış kırmızı lateks.<br />
• Reaktif 8 (R8): N.Menenjit Y/W 135<br />
1 şişe, 0.4 ml, N.Menenjit Y/W 135 için tavşan özel antikorları ile<br />
hassaslaştırılmış pembe lateks.<br />
• Reaktif 9 (R9): Polivalent negatif kontrol<br />
1 şişe, 0.4 ml, bağışıklığı olamayan tavşan’dan alınan IgG<br />
immünglobülinleri ile hassaslaştırılmış mor lateks.<br />
• Reaktif 10 (R10): Polivalent pozitif kontrol<br />
Pozitif control: Dondurularak kurutulmuş antijenik madde.1 ml distile su<br />
ile çözülür. S.zatürre, storoptokok B, H. grip b, N.menenjit<br />
A,C,B,Y/W135’in polisakkarid antijenlerini içerir. Miktar 20 reaksiyon<br />
için yeterlidir.<br />
Tüm reaktifler %0.02 trimesol içerir.<br />
R1,R2,R3,R4,R5,R6,R7,R8,R9 reaktifleri %0.1’den az sodium azid<br />
içerir.
• Tek kullanımlık aglütinasyon kartları<br />
• Tek kullanımlık karıştırma çubukları<br />
2. PASTOREX <strong>MENENJİT</strong> LATEKS TEST (her biri25 testlik):<br />
• Tek lateks testi (kontrolsüz)<br />
1. N.Menenjit A (R6) kod:61608<br />
2. N.Menenjit C (R7) kod:61610<br />
3. N.Menenjit B/E Koli K1 (R1) kod:61611<br />
4. Streptokok B(R5) kod:61613<br />
5. zatürre streptokok (R4) kod:61614<br />
6. Grip b Hemaphilius (R3) kod:61616<br />
• Pastorex Menenjit Kontrol<br />
1. Kontrol reaktif kitleri tek lateks testi için (2x25 test) kod: 61618<br />
2. 2 şişe, 0.4 ml polyvalent negatif control (R9)<br />
3. 2 şişe, dondurularak kurutulmuş polivalent pozitif control(R10),1<br />
ml distile su ile çözülür.<br />
4. 2 şişe, 0.4 ml N.m.B./E koli K1 (R2) negatif control<br />
5. Tek kullanımlık kart<br />
6. Tek kullanımlık karıştırma çubuğu<br />
• Pastorex Menenjit Dilüent<br />
1 şişe, 40 ml serum için dilüent kod: 61717<br />
4-DEPOLAMA<br />
• Tüm reaktifler 2-8ºC’de saklandığındaa ve açılan şişeler dahil<br />
mikrobiyal kontaminasyon olmadığında,son kullanma tarihine kadar<br />
stabildir.<br />
• Polivalent kontrol R10, çözüldükten sonra mikrobiyal kontaminasyon<br />
yok ise 2-8ºC’de 1 ay stabildir veya hemen porsiyonlanıp -20ºC’de<br />
saklanır ise daha uzun süre kullanılabilir.<br />
• Lateks reaktiflerini dik pozisyonda tutun<br />
• LATER REAKTİFLERİ DONDURULMAMALIDIR..<br />
5-GEREKLİ AMA SAĞLANMAYAN MATERYALLER<br />
• Serum dağıtmak için 40-50µl’lik pipet.<br />
• Kapiler veya Ependorf tüpler<br />
• Kurutma inkübatörü veya 100ºC’de su banyosu<br />
• Kapiler veya ependorf tüpler için santrifüj
• Dezenfektan banyosu<br />
• Steril distile su, steril izotonik veya dilüent (kod:61717)<br />
6-ÖNLEMLER<br />
Sonuçların kalitesi ,iyi laboratuvar çalışmalarının sıkıca uygulanmasına<br />
bağlıdır.<br />
• Tüm numune ve reaktifler oda ısısısnda 18-25 ºC’de kullanılmalıdır.<br />
• Aglütünasyon kartının reaksiyon yüzeyine dokunmayınız.<br />
• Test edilecek her numune için pipet veya pipet ucunu değiştirin.<br />
• Kullanım öncesi latex şişesini çalkalayın.<br />
• İyi kalibre edilmiş damlaları elde etmek için kit şişe damlalığının<br />
ucunu temizleyin.<br />
• Kalıntı damlalar için kit şişesini yatay tutun.<br />
• Her reaksiyon için test çubuğunu değiştirin.<br />
• Tüm tek kullanımlık materyalleri otoklavlanabilir çöp kutularına veya<br />
infeksiyonu arındırıcı banyolara atın.<br />
• Polivalent pozitif kontrolü herhangi bir kontaminasyondan sakınmak<br />
için steril distile su ile çözün.<br />
HİJYEN VE GÜVENLİK TALİMATLARI<br />
Daima ,mikrobiyal tehlikelere karşı korunma ile ilgili güncel teknikleri<br />
ve önlemleri gözlemleyin.<br />
• Tüm numuneleri potensiyal infekte edici gibi düşünün.<br />
7- SERUM, İDRAR VE CSF İÇİN KULLANIM TALİMATLAR<br />
Numuneler<br />
Numuneler toplanır toplanmaz işleme alınmalıdır. Eğer bu mümkün değil<br />
ise,2-8 ºC’de birkaç saat saklanabilirler veya daha uzun süreler için –20<br />
ºC’de derecede (santrifüjden sonra -20ºC’de sadece üstfaz tutulabilir)<br />
saklanabilir. Tekrar çözündürüp dondurmaktan sakının. Numunenin<br />
kontaminasyonunu önlemek için öncelikli olarak bakteriyal inceleme(kültür)<br />
yapılmalıdır. Lateks kit ile test için minumum numune volümü 0.5 ml’dir.<br />
A) KLİNİK NUMUNELERİN HAZIRLANMASI<br />
Dikkat: Su banyosu kullanırken suyun tüpe girmemesi için su geçirmez<br />
tüpler kullanın. Eğer mümkünse kurutma inkübatörü kullanın.
a)CSF (Omurilik sıvısı)<br />
Eğer CSF çok bulanık veya kırmızı kan hücreleri içeriyor ise 350 g’de 5<br />
dakika santriüj edin ve süpernatant’ı toplayın.<br />
• Numuneyi 100ºC’de (kurutma inkübatörü veya su banyosu) 3<br />
dakika ısıtın. Numunenin oda ısısına gelmesini sağlayın. 3000<br />
g’de 5 dakika santrifüj edin veya 0.45 µm’lik filtre kullanarak<br />
süzün.<br />
b)Serum<br />
• Bir volüm seruma (0.5 ml) 3 volüm (1,5 ml) dilüent<br />
(kod:61717) eklenir.<br />
• 100ºC’de (kurutma inkübatörü veya su banyosu) 3 dakika ısıtın.<br />
• 3000 g’de 5 dakika santrifüj edin.<br />
Dikkat: Plazma numunesi kullanmayın. Albumin, lipit,<br />
hemoglobin ve bilirubin fazlalığından oluşan etkileşim test<br />
edilmedi. En iyi sonuçlar taze serum kullanılarak elde edildi.<br />
c)İdrar<br />
Testten önce antijen konsantrasyonunu artırmak için Amikon B15 tipi<br />
memran üzerinde 25 kat’a kadar numune konsantre edilebilir.<br />
• 100ºC’de (kurutma inkübatörü veya su banyosu) 3 dakika ısıtın.<br />
• 3000 g’de 5 dakika santrifüj edin veya 0.45 µm’lik filtre<br />
kullanarak süzün.<br />
B)TEST İŞLEMİ<br />
• Aglütinsyon kartının her bir dairesine ön işlem yapılan numunenin<br />
süpernatantı bir damla (40 – 50 µl) koyulur.<br />
• Lateks reaktif şişesini iyice çalkalayın.<br />
• Şişeyi dik pozisyonda tutunuz, Dispozıbl kart’ın üzerine her bir lateks<br />
reaktifinden bir damla koyunuz. Aşağıdaki belirtilen dağıtım şeklini<br />
uygulayın. Beyaz daire içinde R9, R6,R7,R1,R2 ve siyah daire içinde<br />
R8, R3,R4,R5.<br />
• Çubuk kullanarak numuneleri ve lateks reaktiflerini karıştırın ve her<br />
bir lateks için çubuğu değiştirin.<br />
• Kartı 10 dakika 120 RPM’de döndürün. 10 dakika içinde çıplak gözle<br />
görülebilir herhangi bir aglütünasyon oluşumunu izleyin (120 RPM<br />
hız da orbital tipli agitatör kullanılabilir.)<br />
8 – KAN KÜLTÜRÜ İŞLEMİ:<br />
Olası oryantasyon için gram boyası ve şekilleri kontrol edin.<br />
• Pozitif kan kültüründen 1-2 ml alın.<br />
• 2000 g’de 5 dakika santrifüj edin.
• Dispozıbl kartların her bir dairesine süpernatant’ın bir damlasınını<br />
(40-50 µl) koyun.Gram boyasına göre ilgili lateks reaktileri test<br />
edilmelidir.<br />
• Test için seçilen lateks reaktif şişeleri iyice çalkalanmalıdır.<br />
• Şişeyi dik pozisyonda tutunuz, süpernatant damlalarının dış<br />
yüzeyine her bir seçili lateks reaktifinin bir damlası koyulur.<br />
• Çubuk kullanarak numuneleri ve lateks reaktiflerini karıştırın ve<br />
her bir lateks için çubuğu değiştirin.<br />
• Kartı 5 dakika 120 RPM’de döndürün. 5 dakika içinde<br />
aglütünasyon oluşumunu kontrol edin.<br />
Bazı kan kültürleri spesifik reaksiyon vermeyebilir veya yorumu<br />
problemli olabilir. Negatif kontrol olarak steril kan ile aşılı kan<br />
kültürü kullanın veya Pastorex Menenjit ile dedekte edilenden farklı<br />
bir organizma kullanın.<br />
9-SONUÇLARIN YORUMLANMASI<br />
POSİTİF REAKSİYON<br />
Positif reaksiyon iyi aglütünasyon ile belirlenir, çıplak gözle görülebilir,<br />
negatif kontrol ile karşılaştırılır.<br />
Aglütünasyonun şiddeti ve görünme zamanı test edilen numunedeki<br />
antijen konsantrasyonuna bağlıdır.<br />
Pozitif antijen testi ile negatif kültür arasındaki fark, kültür yapılan<br />
numunedeki uygun bakterinin yokluğu ile açıklanabilir (Numune,<br />
antibiotik tedavisi başlamadan önce alınmalıdır veya transfer koşulları<br />
narin bakterilerin hayatta kalmasına uygun olmamalıdır.<br />
Çogu zaman yeni veya pramatüre doğumda anti-N.menenit B/E koli K1<br />
lateks ile pozitif bir reaksiyon E.koli K1 ile infeksiyon oluşturur. Eski<br />
konularda meningococcus B daha fazla olasıdır.. Numune kültürü teşhis<br />
ile konfirme edilmelidir.<br />
NEGATİF REAKSİYON<br />
Kümesiz homojen süspansiyon.<br />
YORUMLANAMAYAN SONUÇLAR<br />
Lateks negatif kontrolleri (R2 veya R9) ile numune aglütine olursa veya<br />
kitin içinde birden fazla lateks reaktifi var ise bu durumda reaksiyon<br />
yorumlanmazdır. Bu durumda test bir başka numune ile tekrarlanmalıdır ve<br />
kültür sonucu için beklenmelidir.( Çok seyrek olarak infeksiyon iki farklı<br />
bakteri türünden olabilir.)
10-PROSEDÜR:AGAR’DA İZOLE EDİLEN BAKTERİ TÜRLERİNİN<br />
GRUBU( Taze ve saf kültürden koloniler)<br />
Lateks Y/W 135, bakteri türleri grubu için kullanılamaz.<br />
Bu grubu belirlemek için alışılagelmiş antisera kullanımı önerilir (Kit Y,<br />
W135,29E: Ref:58704,3x1 ml).<br />
Test’e başlamadan önce olası oryantasyon için:<br />
• Gram boyasını ve morfolojiyi kontrol edin.<br />
• Gram negatif bakteri için oksidaz testi yapın (N menenjit için<br />
pozitif, E koli K1 için negatif).<br />
• Gram pozitif koküs için katalaz testi yapın.(Pozitif tür için katalaz<br />
test etmeyin)<br />
Sarmalanmayan S.zatürre ve hemophilis grip türleri bu teknik ile<br />
belirlenemez.<br />
a) Gruplandırma: N.menenjit (sadece A,B,C), H.grip, E.koli, S.zatürre.<br />
• Steril izotonik solüsyonunun 30 µl’sini dispozıbl kartaki<br />
yuvarlağın içine damlatın.<br />
• Numune:<br />
Eşşarie koli, hemolipus grip ve neserrria Menenjit için: 1 µl<br />
düğümün eşdeğeri, maximum 2-3 koloni olanlar<br />
• Stereptokok zatürre için düğümün 5 µl’sinin eşdeğeri<br />
minumum, 10-12 kolonidir.<br />
• Homojen süspansiyon elde etmek için numune kolonilerini<br />
dikkatlice emilsiyon yapılmalı.<br />
• Tanımlama için seçilen lateks reaktif şişesini iyice<br />
çalkalayın, şişeyi dik konumda tutun, bakteri<br />
süspansiyonunun damlasının dış kenarında bu lateksin bir<br />
damlasını yerleştirin.<br />
• Bir çubuk kullanarak süspansiyonu ve lateksi karıştırın.<br />
• Kartı 120 RPM’de çevirin.<br />
• 2 dakikadan az bir sürede temiz herhangi bir aglütünasyonun<br />
oluşması gözlenir.<br />
Alışılagelmiş biyokimyasal testler kullanılarak tür belirleme<br />
konfirme edilir.<br />
b)Gruplandırma: Stereptokok B( B-hemolitik koloni)<br />
• Tood Hewitt’in 2 ml’sinin içinde 5 koloni durdurun.<br />
• 37 ˚C su banyosund 2-3 saat inkübe edin.
• Süpernatantın 1 damlasını (40-50 µl) dispozıbl kartın<br />
üzerindeki bir daireye yerleştirin.<br />
• Lateks reaktif şişesini iyice çalkalayın, şişeyi dik<br />
pozisyonda tutun, bu lateksin bir damlasını ,<br />
süpernatantın damlasının dış kenarına yerleştirin.<br />
• Bir çubuk kullanarak numuneyi ve lateksi karıştırın.<br />
• Kartı 120 RPM’de döndürün.<br />
• 1 dakikadan az bir sürede herhangi bir temiz<br />
aglütünasyonun oluşmasını gözlemleyin.<br />
Alışılagelmiş biyokimyasal testler kullanılarak tür belirleme<br />
konfirme edilir. İzole kolonilerden direkt ekstraksiyon için<br />
PASTOREX STREP kiti (kod:61721) kullanın.<br />
11-TESTİN KALİTE KONTROLÜ<br />
Lateks reaktifi çalkalandıktan sonra tamamen homojen hale gelmelidir.<br />
Polivalent pozitif kontrol (R10), her bir lateks immuno reaktiviteyi<br />
geçerlendirebilmek için kullanılır.<br />
• Kalite kontrol testini çalışmak için, dispozıbl kartın her bir<br />
dairesine pozitif kontrolün (R10) bir damlası (40 µl) yerleştirilir.<br />
• Lateks reaktif şişesini iyice çalkalayın.<br />
• Şişeyi dik pozisyonda tutun, dispozıbl karta her bir latek<br />
reaktifinde 1 damla yerleştirin, aşağıda belirtilen dağıtım sırasına<br />
uyun: beyaz yuvarlaklarda R9, R6, R7, R1,R2 ve siyah<br />
yuvarlaklarda R8, R3, R4, R5.<br />
• Çubuk kullanarak pozitif kontrol ve lateks reaktifini kullanın ve<br />
her bir lateks için çubuğu değiştirin.<br />
• Kartı 120 rpm’de 10 dakika döndürün. Bu 10 dakika içinde çıplak<br />
gözle herhangi bir aglütünasyon oluşumunu kontrol edin (test<br />
lateks reaksiyonunu, negatif kontrol lateksi ile karşılaştırın).<br />
Aglütünasyon şiddeti ve oluşma hızı antijen/antikor aviditesine<br />
bağlıdır. Sonuç olarak reaksiyonlar, her bir lateks’in değişkenliği ile<br />
gözlenebilir. NmB/Koli K1 lateksi diğerlerinden daha iyidir.<br />
• Her bir lateksin spesifik olmayan aglütünasyonlarının yokluğunu<br />
izotonik solüsyonu veya dilüent (kod: 61717) kontrol eder.<br />
Kalite kontrol testini çalışmak için, polivalent pozitif kontrol<br />
protokolüne göre fizyolojik izotonik veya dilüent R11 (kod:61717)<br />
kullanılır.
• Polivalent pozitif kontrol (R10) ile aglütine olmadığında, izotonik<br />
veya dilüent (kod 61717) ile spesifik olmayan aglütünasyon<br />
olmadığında lateks reaktifi kullanılmamalıdır (kitin yanlış<br />
depolanmasından veya lateks reaktifinin kontaminasyonundan<br />
kaynaklanabilir).<br />
12-ÜRETİCİNİN KALİTE KONTROLÜ<br />
Tüm üretilen reaktifler, ham maddeden başlayarak son olarak<br />
ticari ürün haline gelene kadar bizim kalite sistemimize göre<br />
hazırlanmıştır. Her bir lot kalite kontrol’e tabi tutulmuştur ve<br />
kabul edilebilir sınırlar içinde olan ürünler pazara sunulmuştur.<br />
Her bir lot için kalite kontrol kayıtları <strong>Bio</strong>-<strong>Rad</strong>’da tutulmaktadır.<br />
13- TEST PERFORMANSI<br />
HASSASİYET<br />
Kitteki her bir reaktifin hassasiyeti aşağıda belirtilen numunelerin analizi ile<br />
belirlenmiştir.<br />
• Saflaştırılmış antijen izotonikde dilüe<br />
• Alışılagelmiş analiz tekniği ile belgelenmiş beyin omurilik<br />
sıvısının klinik numunesi<br />
• Mueller Hinton agarı, çikolatalı + PVS agarı, Kolombia %+5<br />
koyun kanlı agar üzerindeki kültürden izole edilen çeşitler.
ÖZGÜLLÜK<br />
Her bir reaktifin hassasiyeti aşağıda belirtilen numunelerin analizi ile<br />
belirlenmiştir.<br />
• Steril CSF (a) veya menenjitden sorumlu bakteri ile kontamine olmuş<br />
CSF ve lateks(b) ile belirlenenlerden farklı.<br />
• Genuses Neisseria, Branhamella, Acinetobacter, streptokok,<br />
Klepsiella, Haemophilus, Eschericha coli non K1, Pseudomonas’a ait<br />
türler lateksden başka kaynaklar ile test edildi.
Neisseria flavescens’in 1/1 türü, Klebsiella pneumoniae ‘nin 2/4 türü,<br />
Acinetobacter’in 2/5 türü spesifik olmayan reaksiyon verir.<br />
KAN KÜLTÜRÜ<br />
Pastorex Menenjit’in performansı kan kültüründe test edildi. Bu ölçümün<br />
sonuçları:<br />
• Hassasiyet: %100 (4/4 S.pneumoniae’nin 2çeşidini ve streptokok<br />
B’nin 2 çeşidini içerir)<br />
• Özgüllük: %100 (37/37). R3, R4, R5, R6, R7 ve R8 reaktifleri için.<br />
• Özgüllük : %97.5 (39/40). R1 reaktifi için.<br />
Klebsiella pneumoniae ile 3 kan kültürü içinde 1 tanesi spesifik<br />
olmayan reaksiyon verir.<br />
14.TESTİN LİMİTLERİ<br />
• Pek çok vakada immunolojik lateks tekniği, organizmanın olası<br />
teşhisini sağlar. Bununla beraber numunedeki antijen<br />
konsantrasyonu lateksde belirtilen düşük limitin altında olabilir ve<br />
sonuç negatif olarak kabül edilir. Bu durumda daha sonra<br />
numunenin tekrarlanması yararlı olabilir.
• Bu yöntem bakteri ekimi yerine koyulamaz, antimikrobial süpheli<br />
sonuçların oluşmasını sağlar.<br />
• Kan kültürünün geniş çeşitliliği gözönünde bulundurularak tüm<br />
ortamlar için performans garanti edilemez.(Cf. 7-D)<br />
• Lateks reaktifi kullanarak serum ve idrardaki antijenin belirlenmesi<br />
ile ilgili klinik ve biyolojik bilgiler şu anda sınırlıdır.<br />
• Benzer antijen alakasız bakteri işlemine bir kaç örnek rapor edildi.<br />
Her zaman çapraz reaksiyon olasılıgı göz önünde<br />
bulundurulmalıdır (1,4,5).<br />
• Tüm laboratuvar teşhisleri için son teşhis, bir test sonucuna<br />
dayandırılmamalıdır, hastanın klinik verileri ve biyokimyasal,<br />
stolojik ve immunolojik sonuçları da değerlendirilmelidir.<br />
• Bakteri türünün spesifik olarak belirlenmesi için kan kültüründe<br />
çözünür antijen belirlemenin yanısıra, agar’da isole türlerin<br />
gruplandırılması da tamamlanmalıdır.<br />
15-REFERANSLAR<br />
1. BRADSHAW M.W., CHNEERSON R., PARKE J.C. Jr., ROBBINS<br />
J.B. Bacterial antigens cross-reactive with the capsular<br />
polysaccharide of Haemophilus influenzae, type b. Lancet, 1971,<br />
i (May 29), 1095-1097<br />
2. DENIS F. et MOUNIER M. Le diagnostic rapide des méningites<br />
cérébrospinales: techniques, résultats, limites et perspectives.<br />
Méd. Mal. Infect.,1984, 14, 27-36<br />
3. DENIS F., SAULNIER M. et CHIRON J.P. Diagnostic étiologique<br />
rapide des méningites purulentes par agglutination passive<br />
indirecte de particules de latex et par contreimmunoéléctrophorèse<br />
: expérience et perspectives. Bull. O.M.S.,<br />
1981, 59, 143-151<br />
4. KASPER D.L., WINKELHAKE J.L., ZOLLINGER W.D., BRANDT<br />
B.L., and ARTENSTEIN M.S. Immunochemical similarity between<br />
polysaccharide antigens of Escherichia coli 07:K1 (L) : NM and<br />
group B Neisseria meningitidis. J. Immunol., 1973, 110, 262-268.<br />
25
5. LEE P.C. and WETHERALL B.L. Cross-reaction between<br />
Streptococcus pneumoniae and group C streptococcal latex<br />
reagent. J. Clin. Microbiol., 1987, 25, 152-153<br />
6. LEINONEN M. and HERVA E. The latex agglutination test for the<br />
diagnosis of meningococcal and Haemophilus influenzae<br />
meningitis. Scand. J. Infect.,1977, 9,187-191<br />
7. LUND E. and HENRICHSEN J. Laboratory diagnosis, serology<br />
and epidemiology of Streptococcus pneumoniae. In Methods in<br />
Microbiology, T. Bergan and J.R. Norris edit., 1978, 12, chap. XI,<br />
241-262 (Academic press, London, New-York, San Francisco)<br />
8. TESSIER F. Dépistage et identification des streptocoques du<br />
groupe B. Intérêt en périnatologie. Extrait de LABORAMA n°14,<br />
oct. 1982, Institut Pasteur Production edit.<br />
9. NEWMAN R.B., STEVENS R.W. and GAAFAR H.A. Latex<br />
agglutination test for the diagnosis of Haemophilus influenzae<br />
meningitis. J. Lab. Clin. Med., 1970, 76, 107-113<br />
10. ROBBINS J.B., Mc CRACKEN G.H. Jr., GOTSCHLICH G.C.,<br />
ORSKOV F., ORSKOV I., HANSON L.A. Escherichia coli K1<br />
capsular polysaccharide associated with neonatal meningitis. New<br />
Engl. J. Med. 1974, 290, 1216-1220<br />
11. P. GESLIN et coll., Centre National de Référence des<br />
Pneumocoques: Rapport d'activité 1997.<br />
12. ASUNCIÓN FENOLL, ISABEL JADO, DOLORES VICIOSO,<br />
AMALIA PÉREZ, and JULIO CASAL. Evolution of Streptococcus<br />
pneumoniae Serotypes and Antibiotic Resistance in Spain :<br />
Update (1990 to 1996). J. Clin. Microbiol.,1998, 36, 3447-3454<br />
<strong>Bio</strong>-<strong>Rad</strong><br />
3, boulevard Raymond Poincaré<br />
92430 Marnes-la-Coquette France<br />
Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00 06/2008<br />
Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33 code : 881019