Повний текст (PDF) - Ivan Franko National University of L'viv

ВПЛИВ МУТАГЕНІВ НА АНТИБІОТИЧНУ АКТИВНІСТЬ ... 19
Отже, для вирощування штаму S. nogalater IMET 43 360 у наступних експериментах
ми використали соєве середовище № 14 (СС-14), на якому він виявив найвищу антибіотичну
активність. Для отримання спор цей штам вирощували на мінімальному середовищі
(МС).
Ми дослідили вплив УФ і НГ – мутагенів, які спричинюють виникнення широкого
спектра мутацій в актиноміцетів, на виживання штаму S. nogalater IMET 43 360.
Близько 50% спор штаму S. nogalater IMET 43 360 гинуло лише після 40 с опромінення
УФ (рис. 1). Збільшення часу опромінення на кожні 10 с поступово й незначно знижувало
його виживання, а після 90 і 100 с обробки виживало близько 1,2 і 0,4% спор цього
штаму, відповідно.
Для обробки штаму 43 360 ми використали 3–10 мг/мл НГ. Термін обробки становив
10–30 хв (рис. 2). Після 10 хв обробки НГ в концентрації 3 мг/мл виживання спор
штаму знижувалося майже на 50%. Збільшення часу обробки до 20–30 хв знижувало виживання
культури до 44,0 і 27,3%, відповідно. Подальше підвищення концентрації мутагену
також знижувало виживання спор штаму незначно. Найвища доза НГ, яку ми використали
у роботі (10 мг/мл; 30 хв), спричинювала 14,5% виживання.
В літературі описані оптимальні дози мутагенів для пошуку різноманітних мутантів
у бактерій [7]. УФ ефективний у дозах, які знижують виживання культури до 0,1–
1,0%. Натомість НГ індукує високу частоту мутацій у таких дозах, за яких виживання
знижується до 10–50%. Такими дозами УФ для штаму 43360 було опромінення протягом
90 і 100 с, за якого виживало 1,2 і 0,4% спор, відповідно. У випадку НГ усі перевірені
нами дози можна використати для пошуку мутантів, оскільки виживання за них становило
14,5–54,1%. Отримані дані свідчать про значно вищий рівень стійкості S. nogalater до
НГ і УФ порівняно з раніше нами вивченими штамами S. globisporus, S. peucetius subsp.
caesius [5], S. kanamyceticus [2].
Ми дослідили зміни антибіотичної активності штаму 43 360 після опромінення УФ
протягом 90 і 100 с (табл. 2). За 100% брали середнє значення антибіотичної активності
клонів вихідного штаму, неопроміненого УФ, що виросли на середовищі СС-14. Серед
342 клонів штаму 43360 виявили 2,6% “плюс“- і 1,2% “мінус“-варіантів. Коефіцієнт варі-
lg % виживання
2,0
1,5
1,0
0,5
-0,5
0
0 20 40 60 80 100
-1,0
Час обробки, с
Рис. 1. Вплив обробки УФ на виживання спор
штаму S. nogalater IMET 43 360.
2,0
1,5
1,0
0,5
0
0 5 10 15 20 25 30
Час обробки, хв
Рис. 2. Вплив обробки НГ у концентраціях 3 (1),
5 (2) і 10 мг/мл (3) на виживання спор
штаму S. nogalater IMET 43 360.
1
2
3