thesis - Theses

Obr. 14 Diskový difúzní test [64].
b) Diluční test v bujonu – při MIC testovaného kmene se stanovuje nejnižší
koncentrace antibiotika, která inhibuje viditelný růst (zákal) v mikrotitrační jamce
(to je první čirá jamka). Při MBC testování se zkumavky nebo mikrotitrační jamky
s čirým bujónem vyočkují na pevné půdy bez přídavku antibiotika a inkubují se. Ze
zkumavek s bakteriostatickou koncentrací vyrůstají kolonie přežívajícího inokula.
Poslední zkumavka či jamka bez nárustu kolonií na agaru udává MBC.
Obr. 15 Diluční test v bujonu [64].
c) Diluční test v agaru – testování vybraných kmenů se provádí na Müller–Hintonově
agaru s definovanou koncentrací iontů, kde každá plotna osahuje příslušnou
koncentraci testovaného antibiotika. Výška agaru je 4 mm a pH je 7,4. Pro
testování streptokoků nebo pneumokoků je nutné přidat 5% defibrinovaných
beraních erytrocytů do média. Jednotlivé plotny jsou naočkovány speciálním
inokulátorem a na jedné plotně může být otestováno až 36 různých kmenů. Po
naočkování se plotny inkubují při doporučené teplotě stanovenou dobu (obvykle 18
– 20 hodin při 35°C). Současně s testovanými kmeny je nutné provést test citlivosti
i pro daný referenční kmen, jehož hodnota MIC je známá.
26