Monika Suszko M.Sc. - ZakÅad Chemii Analitycznej
Monika Suszko M.Sc. - ZakÅad Chemii Analitycznej
Monika Suszko M.Sc. - ZakÅad Chemii Analitycznej
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
5.<br />
WYNIKI I DYSKUSJA<br />
5.1. Przygotowanie próbki – chromatografia preparatywna<br />
Próbki były przygotowywane (usuwanie matrycy tłuszczowej i zatężanie) przy użyciu<br />
preparatywnej chromatografii wykluczania sterycznego. Metoda ta wcześniej została<br />
opracowana w Instytucie Przemysłu Mięsnego i Tłuszczowego [26]. Okazało się, że może być<br />
ona zastosowana do bardzo różnorodnych próbek. W literaturze opisane zostały metody<br />
przygotowania próbki oparte na kilkukrotnie powtarzanych ekstrakcjach ciecz-ciecz i/lub<br />
ekstrakcjach na ciele stałym. Te trudności spowodowane są dużymi podobieństwami<br />
fizykochemicznymi tłuszczy i WWA. Należy zaznaczyć, że w tym przypadku bardzo istotne jest<br />
całkowite usunięcie lipidów gdyż uniemożliwiają one rozdział na fazach odwróconych (lipidy<br />
nie są rozpuszczalne w rozpuszczalnikach polarnych) oraz wpływają na przesunięcie<br />
fluorescencyjnych pasm wzbudzenia/emisji. Olbrzymią zaletą zastosowanej metody jest<br />
możliwość przeprowadzenia oczyszczenia próbki w jednym kroku.<br />
Przykładowy chromatogram SEC oliwy z oliwek pokazano na Rysunku 3. Okazało się,<br />
że w przypadku oliwy zebrany eluat zawierał wprawdzie małe ilości tłuszczy, ale były one<br />
rozpuszczalne w acetonitrylu, stosowanym jako faza ruchoma. Przesunięcie czasu zbierania<br />
eluatu powodowało niecałkowite zbieranie WWA.<br />
Rysunek 3. Chromatogram SEC oliwy z oliwek. Warunki chromatograficzne: Plgel column - 5<br />
μm, 50 Å, 600x7,8 mm I.D.; faza ruchoma – dichlorometan, detektor spektrofotometryczny,<br />
długość fali - 254 nm; temperatura – pokojowa, szybkość przepływu – 1 ml/min, objętość<br />
próbki– 400 μl.<br />
27
Change language