moleculas anfifilicas con fluor y fosforo con propiedades revestidoras.
moleculas anfifilicas con fluor y fosforo con propiedades revestidoras.
moleculas anfifilicas con fluor y fosforo con propiedades revestidoras.
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19<br />
OFICINA ESPAÑOLA DE<br />
PATENTES Y MARCAS<br />
ESPA ÑA<br />
11 kN.<br />
◦ de publicación: ES 2 060 184<br />
51 kInt.<br />
Cl. 5 : C07F 9/10<br />
A61K 31/675<br />
C07F 9/09<br />
C07F 9/6533<br />
k<br />
12 TRADUCCION DE PATENTE EUROPEA T3<br />
k<br />
86 Número de solicitud europea: 90910640.3<br />
k<br />
86 Fecha de presentación : 21.06.90<br />
k<br />
87 Número de publicación de la solicitud: 0 478 686<br />
k<br />
87 Fecha de publicación de la solicitud: 08.04.92<br />
k<br />
54 Título: Moléculas <strong>anfifilicas</strong> <strong>con</strong>teniendo flúor y fósforo <strong>con</strong> <strong>propiedades</strong> tensoactivas.<br />
k<br />
30 Prioridad: 22.06.89 EP 89401777<br />
k<br />
45 Fecha de la publicación de la mención BOPI:<br />
16.11.94<br />
k<br />
45 Fecha de la publicación del folleto de patente:<br />
16.11.94<br />
k<br />
73 Titular/es: Applications et Transferts<br />
de Technologies Avancees ATTA<br />
47, Corniche des Oliviers<br />
F-06000 Nice, FR<br />
k<br />
72 Inventor/es: Riess, Jean;<br />
Jeanneaux, François;<br />
Krafft, Marie-Pierre;<br />
Santaella, Catherine y<br />
Vierling, Pierre<br />
k<br />
74 Agente: Isern Cuyas, Jaime<br />
Aviso: En el plazo de nueve meses a <strong>con</strong>tar desde la fecha de publicación en el Boletín europeo de patentes,<br />
de la mención de <strong>con</strong>cesión de la patente europea, cualquier persona podrá oponerse ante la Oficina<br />
Europea de Patentes a la patente <strong>con</strong>cedida. La oposición deberá formularse por escrito y estar<br />
motivada; sólo se <strong>con</strong>siderará como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de<br />
oposición (art ◦ 99.1 del Convenio sobre <strong>con</strong>cesión de Patentes Europeas).<br />
Ventadefascículos: Oficina Española de Patentes y Marcas. C/Panamá, 1 – 28036 Madrid
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ES 2 060 184 T3<br />
DESCRIPCION<br />
Este invento se refiere a tensoactivos que como moléculas <strong>anfifilicas</strong> tienen una variedad de aplicaciones,<br />
en particular en la preparación de liposomas, dispersiones, y emulsiones tal como emulsiones<br />
<strong>fluor</strong>ocarbónicas.<br />
La obtención de un sistema de suministro de oxígeno intravenosamente inyectable se ha vuelto un<br />
objeto principal en la investigación biomédica. Un sistema de esta indole está destinado a servir como un<br />
sustitutotemporalparalasangre,perotambién, mas generalmente, siempre que se requiere la administración<br />
in vivo de oxígeno, como por ejemplo en casos de infarto de miocardio y ataque, durante cirugía<br />
cardiovascular, para la <strong>con</strong>versación de tejidos y organos aislados, como un coadyuvante para la radioy<br />
quimio- terapia de cancer y en hemodilución perioperativa. Los <strong>fluor</strong>ocarbonos actualmente resultan<br />
ser los vectores de oxígeno mas prometedores para esta finalidad. Los <strong>fluor</strong>ocarbonos tienen también<br />
utilidad significante como agentes de realce de <strong>con</strong>traste, tal como para diagnosis por rayos X, resonancia<br />
magnética o radiografía de ultrasonidos.<br />
Sin embargo, la inyección intravenosa de <strong>fluor</strong>ocarbonos netos, está obstaculizada por su insolubilidad<br />
en un medio acuoso. Por <strong>con</strong>siguiente es necesario prepararlos en forma de emulsiones, lo que implica el<br />
empleo de uno o más tensoactivos. Si bien se ha utilizado albúmina como un tenso activo, los tensoactivos<br />
sintéticos primarios utilizados en emulsiones de <strong>fluor</strong>ocarbono hoy día son co-polímeros en bloque<br />
de polioxietileno polioxipropileno de tipo PLURONIC F -68 (marca registrada), y tensoactivos naturales<br />
tal como lectinas de yema de huevo.<br />
Sin embargo, las lecitinas tienen su in<strong>con</strong>venientes y limitaciones; son materiales sensibles y oxidables;<br />
son pocas fuentes fiables de calidad <strong>con</strong>sistente; no son particularmente <strong>fluor</strong>ofilicas, y dejan poco espacio<br />
para manipular las características de emulsiones <strong>con</strong> el fin de ajustarlas a aplicaciones terapéuticas.<br />
Es deseable el dominio adicional del arte de la tecnología de emulsión de <strong>fluor</strong>ocarbonos, especialmente<br />
para permitir la adaptación óptima de las características de las emulsiones a cada aplicación terapéutica<br />
individual y extender su espectro de aplicación. Otro objetivo ideal sería la capacidad de modular la<br />
respuesta biológica que disparan en los organismos.<br />
Asimismo es deseable adquirir domicio adicional en el arte de la tecnología de liposomas, especialmente<br />
para permitir la modulación de las características y <strong>propiedades</strong> de las membranas de lipidos y<br />
liposomas y extender su espectro de aplicaciones, especialmente para suministro de farmacos y agentes<br />
de <strong>con</strong>traste.<br />
El presente invento proporciona diversos análogos y derivados de lecitina <strong>fluor</strong>o-sustituidos, que son<br />
útiles como tensoactivos en emulsiones de <strong>fluor</strong>ocarbono y en membranas de lípicos y en la preparación<br />
de liposomas.<br />
Se <strong>con</strong>ocen ciertos tensoactivos que <strong>con</strong>tienen flúor. Por ejemplo, la DE-A-2160783 describe ciertos<br />
derivados de ácido <strong>fluor</strong>ocarbón fosfórico que tienen un átomo de cloro sustituido sobre el átomo de carbono<br />
beta- para el grupo fosfato.<br />
Fujita et al. (JP-A-60181093, Chem. Pharm. Bull., 35:647 (1987) describe ciertos derivados de ácido<br />
<strong>fluor</strong>ocarbón fosfórico a base de glicerol en donde está presente una sola fracción <strong>con</strong>teniendo <strong>fluor</strong>o (RF )<br />
y la función de alcohol secundaria está libre (OH) o acetilada (OCOCH3). La DD -A-222595 describe<br />
ciertos derivados de glicerofosfocolina <strong>fluor</strong>ados pero estos <strong>con</strong>tienen solo un grupo de 2,2,2-tri<strong>fluor</strong>oetilo.<br />
El artículo de Gu et al [Chemical Abstract 110:15479 c (1989); HUAXUE HUEBAO o Acta Chimica<br />
Sinica, 49:913 (1988)] describe derivados de fosfatidilcolina que tienen dos cadenas de F-alquilo, pero<br />
estos <strong>con</strong>tienen un átomo de carbono en su extremidad.<br />
Kunitake et al (Memoirs of the Faculty of Engineering, Kyushu University 46 221 (1986)) describe derivados<br />
de ácido <strong>fluor</strong>ocarbón fosfórico que <strong>con</strong>tienen un enlace amidico como resultado de ser un diéster<br />
de ácido glutámico.<br />
La DE-A-2656429 describe ciertos derivados de ácido <strong>fluor</strong>ocarbón <strong>fosforo</strong>so (no fosfórico) que incluyen<br />
la presencia de un doble enlace CH=CF.<br />
Diversas publicaciones describen también una o dos fracciones de <strong>fluor</strong>ocarbono sustituidas en una<br />
fracción de ácido fosfórico; en el caso de compuestos mono-sustituidos ambos grupos restantes del ácido<br />
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fosfórico son independientemente hidroxi, alcoxi, alquiltio o alquilamino.<br />
La DE-A-3609491, DE-A-3609492 y JP-A-84204197 describen ciertos derivados de ácido fosfórico <strong>fluor</strong>ocarbón-sustituidos<br />
dibásicos.<br />
La JP-A-8623590 y JP-A-86123591 (Fuji) describen ciertos derivados de ácido fosfórico <strong>fluor</strong>ocarbónsustituidos<br />
que no tienen grupos de metileno.<br />
Mahmood et al (Inorg. Chem. 25 4081 (1986) describe moléculas que tienen cadenas <strong>fluor</strong>adas bifuncionales<br />
centrales <strong>con</strong> dos grupos fosfato, uno sobre cada extremo de la cadena.<br />
Se <strong>con</strong>ocen diversas sulfonamidas que <strong>con</strong>tienen fracciones de <strong>fluor</strong>ocarbono y un residuo de ácido<br />
fosfórico.<br />
Las US-A-3976698 y US-A-3948887 (Pennwalt) describe ciertos derivados de ácido fosforico <strong>fluor</strong>ocarbon<br />
- sustituidos <strong>con</strong>teniendo azufre.<br />
Ninguno de los documentos anteriores describe el empleo de los tensoactivos descritos en emulsiones<br />
<strong>fluor</strong>ocarbónicas. Además, ninguno de los documentos anteriores describe compuestos dentro del alcance<br />
del presente invento.<br />
Resumen del invento<br />
El invento se dirige hacia nuevos tensoactivos que tienen la fórmula general<br />
R 1 -CH2<br />
|<br />
(R 2 -CH)m O<br />
| <br />
CH2-O -P-X<br />
|<br />
Y (Ia)<br />
o<br />
R 1 -CH2 O<br />
| <br />
CH-O-P-X<br />
| |<br />
R 2 -CH2 Y<br />
en donde R 1 yR 2 son fracciones <strong>con</strong>teniendo flúor, y los sustituyentes X e Y son como aquí se ha definido.<br />
El invento se dirige también a métodos para utilizar los nuevos compuetos. La naturaleza anfifilica<br />
de las moléculas combinado <strong>con</strong> su biocompatibilidad las hace útiles en la preparación de emulsiones y<br />
formulaciones liposomales que pueden adaptarse a muchas aplicaciones biológicas y médicas.<br />
Finalmente se proporcionan métodos para la preparación de los compuestos de fórmula I.<br />
Breve descripción de los dibujos<br />
La descripción hace referencia a los dibujos que se acompañan en donde:<br />
La figura 1 muestra las estructuras de compuestos preferidos del invento;<br />
La figura 2 muestra un esquema sintético general para la preparación de compuestos de fórmulas<br />
generales Ia y Ib y ciertos compuestos intermedios;<br />
La figura 3 muestra un esquema sintético de ejemplo para la preparación de ciertos compuestos del<br />
invento que pueden extenderse por analogía para la preparación de otros compuestos del invento;<br />
La figura 4 muestra <strong>con</strong> mayor detalle parte del esquema sintético mostrado en la figura 3;<br />
La figura 5 muestra otro esquemás sintéticos de ejemplo para la preparación de ciertos compuestos<br />
del invento, que de nuevo pueden extenderse por analogía para la preparación de otros compuestos del<br />
invento.<br />
Descripción detallada del invento<br />
De <strong>con</strong>formidad <strong>con</strong> un primer aspecto del invento se proporciona un compuesto de la fórmula general:<br />
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en donde:<br />
R 1 representa:<br />
R 1 -CH2<br />
|<br />
(R 2 -CH)m O<br />
| <br />
CH2-O -P-X<br />
|<br />
Y (Ia)<br />
ES 2 060 184 T3<br />
RF (CH2)a-(CH=CH)b-(CH2)c-(CH=CH)d -(CH2)e-A-;<br />
RF -(CH2)f-OCH2CH(CH2OH)CH2-A-;<br />
RF -(CH2)g-OCH2CH(CH2OH)-A-;<br />
o<br />
R 1 -CH2 O<br />
| <br />
CH-O-P-X<br />
| |<br />
R 2 -CH2 Y<br />
en donde -A- representa -O-, -C(O)O-, -R 6 (R 7 )N + -, (en donde cada uno de R 6 yR 7 representa<br />
alquilo de C1-C4 o hidroxietilo), -(CH2)q-B,endondeqesunnúmero entero de 0 a 12, B representa<br />
-O- o -C(O)-, y R 9 es hidrógeno o R 6 , y en donde la suma de a+c+e es de 0 a 11, la suma b+d es<br />
de 0 a 12 y cada uno de f y g es de 1 a 12;<br />
RF -(CH2-CH2-O)h-;<br />
RF -[CH(CH3)CH2O]h-;<br />
en donde h es de 1 a 12; y<br />
en donde RF representa una fracción <strong>con</strong>teniendo flúor que tiene una de las estructuras siguientes:<br />
(a) F(CF2)i-, en donde i es de 2 a 12,<br />
(b) (CF3)2CF(CF2)j- en donde j es de 0 a 8,<br />
(c) RF 1[CF2CF(CF3)]k- en donde k es de 1 a 4, y RF 1representaCF3-, C2F5- o(CF3)2CF-,<br />
(d) RF 2(RF 3)CFO(CF2CF2)1-,endonde1esde1a6yendondecadaunodeRF 2yRF 3representan,<br />
independientemente CF3-, C2F5-, n-C3F7- oCF3-CF2CF(CF3)-, o RF 2yRF 3 tomados juntos<br />
representan -(CF2)4)- o -(CF2)5-, o<br />
(e) una de las estructuras (a) a (d) en donde uno o mas de los átomos de flúor se sustituyen por uno o<br />
más átomos de hidrógeno o bromo y/o por lo menos dos átomos de cloro en una proporción tal que<br />
por lo menos el 50% de los átomos enlazados al esqueleto de carbono de RF son átomos de <strong>fluor</strong>, y<br />
en donde RF <strong>con</strong>tiene por lo menos 4 átomos de flúor;<br />
mes0o1;<br />
R 2 representa R 1 ,hidrógeno o un grupo OR,<br />
en donde R representa un alquilo de C1-C20 saturado o insaturado (de preferencia alquilo de C1-C8)<br />
o acilo de C3-C20 (de preferencia acilo de C3-C8); y cuando m es 1, R 1 yR 2 pueden intercambiar<br />
sus posiciones; y<br />
cada uno de X e Y representan, independientemente:<br />
hidroxilo;<br />
-O(CH2CH2O)nR 3 ,<br />
en donde n es un número entero de 1 a 5 y R 3 representa un átomo de hidrógeno o grupo de alquilo<br />
de C1-C4;<br />
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-OCH2CH(OH)CH2OH;<br />
-NR 4 R 5 oN + R 4 R 5 R 8 ,<br />
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en donde cada uno de R 4 ,R 5 yR 8 representan, independientemente un átomo de hidrógeno, un<br />
grupo de alquilo de C1-C4, -CH2CH2O(CH2CH2O)2 R 3 , en donde s representa un número entero<br />
de1a5,oR 4 yR 5 cuando se toman juntos representan -(CH2)q en donde q es un número entero<br />
de 2 a 5, o <strong>con</strong> átomo de nitrógeno R 4 yR 5 forman un grupo morfolino;<br />
-O(CH2)P Z en donde Z representa un grupo de ácido 2 -aminoacético, -NR 4 R 5 o-NR 4 R 5 R 8 en donde<br />
R 8 tiene el significado antes indicado para R 4 yR 5 antes indicado, y p es un númeroenterode1a5;<br />
<strong>con</strong> la salvedad de que X e Y no representan ambos hidroxilo o una forma ionizada derivada de hidroxilo.<br />
Se apreciará que por lo menos algunos de los compuestos de las fórmulas generales Ia y Ib pueden<br />
existir en la gomas ionizada o no ionizada. La naturaleza exacta de las especies presentes dependerá,<br />
evidentemente, del ambiente y en particular del pH.<br />
Para un mejor entendimiento del invento y para mostrar como puede llevarse a la práctica, se describirán<br />
ahora realizaciones preferidas del invento en su primer aspecto y otros.<br />
Los compuestos preferidos de las fórmulas generales Ia y Ib tienen, independientemente o <strong>con</strong>juntamente<br />
(cuando sea compatible), una o más de las características siguientes:<br />
-enfórmula general Ia, m=0;<br />
-enfórmula general Ia, m=1;<br />
-R 2 representa R 1 ;<br />
-R1representa un grupo<br />
RF (CH2)a-(CH=CH)b-(CH2)c-(CH=CH)d -(CH2)e-A-;<br />
- de preferencia b+d=0.<br />
- de preferencia -A- representa -O-, -C(O)O-,<br />
o<br />
-(CH2)n- (en donde n=0);<br />
-RF representa cualquiera de las estructuras definidas previamente (a) a (d), en donde uno o mas<br />
de los átomos de flúor se sustituyen por uno o más átomos de hidrógeno o bromo:<br />
-RF representa F(CF2)i-, en donde i es de 2 a 12;<br />
- de preferencia RF representa F(CF2)i-, en donde i es de 4 a 8;<br />
- cada uno de X e Y representa, independientemente, hidroxilo, morfolino, un grupo OCH2CH (OH)<br />
(CH2) OH,oungrupoO(CH2 -CH2O)nR 3 , en donde es 1 o 2 y R 3 representa metilo;<br />
- cada uno de X e Y representan, independientemente, -OCH2-CH2N + (CH3)3; y<br />
- cada uno de X e Y representan, independientemente, -O(CH2)p-Z en donde p es un número entero de 1<br />
a 5; y de preferencia 2, y Z representa -NR 4 R 5 oNR 4 R 5 R 8 en donde cada uno de R 4 ,R 5 yR 8 representan<br />
ungrupodemetilooetilo;<br />
<strong>con</strong> la salvedad de que X e Y no representan ambos hidroxilo o una forma ionizada derivada de hidroxilo.<br />
En la figura 1 se muestran compuestos particularmente preferidos de <strong>con</strong>formidad <strong>con</strong> el invento.<br />
Los compuestos de <strong>con</strong>formidad <strong>con</strong> el primer aspecto pueden prepararse <strong>con</strong> cualquier método apropiado.<br />
Como práctica se preferirán ciertos métodos de preparar estos compuestos.<br />
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De <strong>con</strong>formidad <strong>con</strong> un segundo aspecto del presente invento se proporciona un procedimiento para la<br />
preparación de un compuesto de <strong>con</strong>formidad <strong>con</strong> el primero aspecto, comprendiendo el procedimiento:<br />
(a) hacer reaccionar un compuesto de fórmula general IIa, IIb, IIc o IId, como se representa en la figura<br />
2, <strong>con</strong> un compuesto HX para efectuar mono-sustitución, y en el caso de IIa y IIb, elaborar el producto<br />
mono-clorado hasta un producto mono-hidroxilado, y dejar opcionalmente que el producto reaccione <strong>con</strong><br />
el HY para efectuar di-sustitución; o<br />
(b) cuando X y/o Y representa un grupo -O(CH2)pZ, en donde p es un númeroenterode1a5yZ<br />
representa un grupo NR 4 R 5 oN + R 4 R 5 R 8 , hacer reaccionar un compuesto de fórmula general IIb o IIc,<br />
como se muestra en la figura 2, en donde L representa Z o un grupo partiente y cuando L es Z <strong>con</strong> HZ, y<br />
cuando L es un grupo partiente <strong>con</strong> HX, entonces <strong>con</strong> un compuesto HNR 4 R 5 ,HN + R 4 R 5 R 8 ,oNR 4 R 5 R 8 ,<br />
para efectuar mono- o di-sustitución y en el caso de mono-sustitución de un compuesto de fórmula general<br />
IIb o IIc elaborando el producto mono -clorado para formar un producto mono-hidroxilado;<br />
(c) opcionalmente después de la etapa (a) o (b) <strong>con</strong>vertir un compuesto de fórmulagenerlaIaoIbasí<br />
formado en otro compuesto de la fórmula general Ia o Ib.<br />
Compuestos de fórmulas generales IIb y IIc pueden prepararse a partir de compuestos de las fórmulas<br />
generales IIa y IId respectivamente, como se muestra en la figura 2, mediante reacción<strong>con</strong>uncompuesto<br />
de la fórmula general HO(CH2)pL, en donde p tiene el significado definido para las fórmula generales Ia<br />
y Ib y L representa Z, o un grupo partiente, por ejemplo un átomo de halógeno tal como bromo.<br />
Compuestos de formulas generales IIb y IIc pueden prepararse también a partir de compuestos de<br />
las fórmulas IVa y IVb respectivamente, mediante reacción<strong>con</strong>uncompuestodelafórmula general<br />
Hal2P(O)O(CH2)pL, en donde p es como se ha definido para las fórmulas Ia y Ib, L representa Z o un<br />
grupo partiente como se ha indicado antes y Hal representa un átomo de halógeno tal como cloro, que se<br />
encuentra en el arte o puede sintetizarse <strong>con</strong> métodos <strong>con</strong>ocidos por los expertos en el arte.<br />
Compuestos de las fórmulas generales IIa y IIb pueden prepararse a partir de compuestos de fórmulas<br />
generales IVa y IVb, respectivamente, como se muestra en la figura 2, mediante reacción <strong>con</strong> oxicloruro<br />
de fósforo (POCl3). Compuestos de fórmulas generales IVa y IVb y los otros reactivos utilizados se encuentran<br />
en el arte o pueden sintetizarse <strong>con</strong> métodos <strong>con</strong>ocidos por los expertos en el arte.<br />
Compuestos de fórmulas generales IIa, IIb, IIc, y IId son intermediarios valiosos en la preparación de<br />
compuestos de fórmulas generales Ia y Ib. De <strong>con</strong>formidad <strong>con</strong> un tercer aspecto del presente invento<br />
se proporciona un compuesto de fórmula general IIa o IId; de <strong>con</strong>formidad <strong>con</strong> un aspecto adicional se<br />
proporciona un compuesto de fórmula general IIb o IIc.<br />
Lasviasanterioresyotrassintéticas se ilustran en las figuras 3 a 5, cuyos procedimientos pueden<br />
generalizarse para obtener otros compuestos del invento.<br />
Los compuestos del invento son útiles en la preparación de emulsiones <strong>fluor</strong>ocarbónicas, que a su<br />
vez son útiles como sustitutos de sangre portadores de oxígeno entre otras aplicaciones médicas y de<br />
diagnóstico. Los procedimientos <strong>con</strong> los que pueden prepararse estas emulsiones resultarán familiares<br />
para el experto en el arte e incluyen el empleo de homogenizadores de alta presión mecánicos tal como<br />
homogenizador Gaulin, un Microfluidizer TM (microfluidics, Inc., Boston, Massachusetts) o aún, de ser<br />
apropiado y e<strong>con</strong>ómicamente factible, ultrasonidos. En la EP-A-0231070 y EP-A-0307087 se describen<br />
técnicas preparativas particularmente apropiadas (tanto a nombre de David M. Long, Jr.); compuestos<br />
de <strong>con</strong>formidad <strong>con</strong> el primer aspecto de este invento deben sustituirse para los tensoactivos descritos en<br />
las solicitudes de patente Europea (o en cualquier otra formulación <strong>con</strong>ocida y apropiada) en la misma<br />
cantidad o apropiadamente modificada. En la medida que la ley lo permite las EP-A-0231070 y EP-A<br />
-0307087 se incorporan ambas como referencia.<br />
De <strong>con</strong>formidad <strong>con</strong> un quinto aspecto del invento se proporciona una emulsión que comprende una<br />
fase oleosa, una fase acuosa y un tensoactivo de <strong>con</strong>formidad <strong>con</strong> el primer aspecto. Puede estar presentes<br />
también diversos aditivos apropiados, por ejemplo los descritos en EP-A-0231070 y EP -A-0307087.<br />
Los compuestos del invento son también útiles en la preparación o modificación de membranas de<br />
lipidos y liposomas o niosomas, que a su vez son útiles como farmacos o vehículos para farmacos, (incluyendo<br />
en <strong>con</strong>exión <strong>con</strong> vehículos de oxígeno tal como hemoglobina o hemoglobina modificada o quelatos<br />
sintéticos), agentes de <strong>con</strong>traste, sistemas de suministro y diagnostico, o en cosméticos. Los procedimien-<br />
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tos <strong>con</strong> los que pueden prepararse estas membranas de lípidos, liposomas o niosomas resultarán familiares<br />
a los expertos en el arte e incluyen el empleo de técnicas disolventes, inyección, o el empleo de ultrasonidos<br />
o de un homogenizador de alta presión tal como un homogenizador o un Microfluidizer TM . Asi pues, el<br />
presente invento proporciona una formulación liposomal no hemolítica estable que comprende cualquiera<br />
de los compuestos de <strong>con</strong>formidad <strong>con</strong> el primer aspecto, posiblemente junto <strong>con</strong> un agente terapéutico,<br />
cosmético o de diagnóstico, tal como un fármaco u oxígeno.<br />
El término “emulsión” tiene por objeto incluir dispersiones, liposomas, niosomas, vesiculas, geles, soluciones<br />
micelulares, y microesmulsiones, o fases estructuradas de modo similar, y <strong>con</strong>teniendo sustancias<br />
polares o no polares, incluyendo fármacos, o un aceite, que puede hidrocarbonatarse o no, y la emulsión<br />
puede <strong>con</strong>tener uno o más de otros tensoactivos.<br />
Las sustancias apolares o aceites pueden ser altamente <strong>fluor</strong>adas o per<strong>fluor</strong>adas y estar presentes a<br />
una <strong>con</strong>centración de 10% a 70% volumen/volumen.<br />
Así pues, el presente invento <strong>con</strong>templa un <strong>fluor</strong>ocarbono como la fase oleosa en cuyo caso estas composiciones<br />
son útiles como sustitudos de la sangre y agentes de mejora de <strong>con</strong>traste. En estas composiciones<br />
pueden elegirse especialmente los compuestos altamente <strong>fluor</strong>ados o per<strong>fluor</strong>ados, <strong>con</strong> pesos moleculares<br />
entre alrededor de 400 y 700, pero esta elección no es exclusiva, entre por lo menos uno de los siguientes:<br />
bis(F-alquil)-1,2-eternos y más particularmente bis -(F-butil)-1,2-eteno, los F-isoptopil-1, F-hexil-<br />
2-etenos y los bis(F-hexil)-1,2-etenos, las per<strong>fluor</strong>odecalinas, las per<strong>fluor</strong>o-metilodecalinas, las per<strong>fluor</strong>odimetildecalinas,<br />
los per<strong>fluor</strong>omono- y dimetiladamantanos, los per<strong>fluor</strong>o-trimetilbiciclo [3,3,1]nonanos y<br />
sus homólogos, éteres de fórmula (CF3)CFO(CF2 CF2)OCF(CF3)2, (CF3)2 CFO(CF2CF2)3OCF(CF3)2,<br />
(CF3)2CFO (CF2CF2)2F, (CF3)2CFO(CF2CF2)3F, F[CF(CF3)CF2O]2-CHFCF3, (C6F13)1O, las aminas<br />
N(C2F7) 3 , N(C4F9)3, las <strong>fluor</strong>ometil-quinolidinas y per<strong>fluor</strong>oisoquinolidinas, los derivados de<br />
halógeno C6F13Br, C8F17Br, C6F13CBr2 CH2Br, 1-bromoheptadeca<strong>fluor</strong>o-4-isopropilciclohexano o compuestos<br />
hidrocarbono/<strong>fluor</strong>ocarbono mixtos <strong>con</strong> una masa molecular inferior, CnF2n+1CmN2m+1,<br />
CnF2n+1CmH2m−1, en donde la cadena hidrocarbúrica <strong>con</strong>tiene un doble enlace, donde n es un número<br />
entero entre 1 y 10 y m es un número entero entre 1 y 20 y análogos, entendiendose que los compuestos<br />
pueden utilizarse por separado o en forma de mezclas. Estas composiciones se utilizan mas particularmente<br />
como portadores de gas, y en particular para oxígeno en circulos vivientes, para aplicaciones<br />
médicas humanas y veterinarias, en particular como sustitutos de la sangre, medios para tratar isquemia<br />
cerebral y cardiaca en hemodilución preparativa, para la <strong>con</strong>servación de órganos, tejidos, embrios, semen,<br />
medios utilizable en terapia y cirugia cardiovascular, por ejemplo como una angioplastia cardioplégica,<br />
reperfusión o coronaria, medio de solución utilizable como coadyuvante para redioterapia o quimioterapia<br />
de cancer, o medio utilizable como vehículo médico, como agentes de <strong>con</strong>traste o diagnosis mediante rayos<br />
X, resonancia magnética o radiografía de ultrasonidos.<br />
Las composiciones del presente invento pueden comprender de 5-80% (vol/vol) de la fase oleosa, por<br />
ejemplo un compuesto polar, y 0,5-12% (vol/vol) de por lo menos un tensoactivo del primer aspecto,<br />
y siendo el resto el disolvente, por ejemplo agua, y opcionalmente, varios aditivos, incluyendo sales<br />
inorgánicas, generalmente en forma de tampones, que permiten el ajuste del pH y obtener una composición<br />
isotónica.<br />
El tensoactivo comprende por lo menos uno de los tensoactivos <strong>fluor</strong>ados del primer aspecto del presente<br />
invento, opcionalmente en combinación <strong>con</strong> tensoactivo <strong>con</strong>vencional, representando los tensoactivos<br />
<strong>fluor</strong>ados del invento, en volumen, de 1% a 100% del volumen total de tensoactivos. El presente invento<br />
se ilustra por medio de los ejemplos que siguen, los cuales no deben entenderse limitativos de forma<br />
indebida, puesto que los métodos aquí expuestos son ampliamente aplicables a la preparación de todos<br />
los compuestos descritos.<br />
Ejemplo 1<br />
Sintesis de [2-(F-hexil)-etil]dimorfolinofosforamidato 1<br />
Se hizo reaccionar, en éter seco a 0 ◦ C y bajo argón, 20,89 g de 2-(F-hexil-)-etanol y 18 ml de trietilamina<br />
<strong>con</strong> 8,8 g de oxicloruro de fósforo, lo que dió [2-(F-(hexil)etoxi] fosforil dicloruro.<br />
Luego se adicionó a gotas a la mezcla reaccional enfriada una solución de 12,5 g de mosfolina y 18 ml<br />
de trietilamina en éter. Después de tratamiento se destiló el residuo oleoso limpido (E(b = 150 ◦ C/0,03<br />
mmHg), dando 26,72 g (80%) de [2-(F-hexil)etil]-dimorfolinofosforamidato 1.<br />
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ES 2 060 184 T3<br />
F=25 ◦ C ± 1 ◦ C; C hallado (calculado) 33.40 (32.99); H 3.52 (3.44); N 4.93 (4.81); F 40.42 (42.44); P<br />
5.36 (5.83); MS (LID/IC/NH3); m/e (%); M+1 583 (100); IR (ν cm −1 ): 1250-1150 (P=O, C-F), 972<br />
(P-N); NMR 1 H(δ ppm, CDCl3): 2.56 (tt, 2H, 3 JHH=5.3 Hz, 3 JHF =18.5 Hz, RF CH2), 3.17 (dt, 8H,<br />
3 JHH=5.3 Hz, 3 JPH=2.7Hz,NCH2), 3.68 (t, 8H, 3 JHH=5.3 Hz, CH2OCH2), 4.32 (dt, 2H, 3 JHH=5.3<br />
Hz, 3 JPH=7.9, CH2OP); NMR 13 C(δ ppm, CDCl3): 31.9 (td, 1 JCF=21 Hz, 3 JCP= 7Hz,RF CH2), 44.5<br />
(s, PNCH2), 57.1 (d, 2 JPC=5 Hz, RF CH2CH2), 67.1 (d, 3 JPC=8 Hz, CH2OCH2); NMR 31 p(δ ppm,<br />
CDCl3): 14.2; NMR 19 F(δ ppm, CDCl3): -81.3 (CF3), -114.0 (CF3 CF2), -122.3 (2F), -123.3 (2F), -124.0<br />
(2F), -126.6 (CH2CH2).<br />
Ejemplo 2<br />
Sintesis de [2-(F-octil)etil]dimorfolinofosforamidato 2<br />
El procedimiento experimental descrito antes cuando se aplica a 16,58 g de 2-(F-octil)-etanol, 5.48 g<br />
de oxicloruro de fósforo y 7,84 g de morfolina dió, después de tratamiento, cromatografía y/o recristalización<br />
en hexano, 17,04 g (70%) de 2 en forma de cristales blancos.<br />
F=60 ◦ C ± 1C; C 31.73 (31.67); H 2.96 (2.93); N 3.90 (4.10); F 47.21 (47.36); P 4.23 (4.54); MS<br />
(LID/IC/NH3); m/e (%), M + 1: 683 (100); IR (ν cm −1 ): 1250 - 1150 (P=O, C-F), 970 (P-N); NMR<br />
1 H(δ ppm, CDCl3): 2.54 (tt, 2H, 3 JHH= 5.3Hz, 3 JHF =18.5 Hz, RF CH2); 3.16 (dt, 8H, 3 JHH=5.3 Hz,<br />
3 JPH=2.7 Hz, NCH2); 3.66 (t, 8H, 3 JHH=5.3 Hz, CH2OCH2); 4.31 (dt, 2H, 3 JHH=5.3 Hz, 3 JPH=7.9<br />
Hz, CH2OP); NMR 13 C(δ ppm, CDCl3): 32.1 (td, 2 JCF=21.5 Hz, 3 JCP=7 Hz, RF CH2), 44.6 (s, NCH2),<br />
57.3 (m, 2 JPC=5 Hz, RF CH2CH2), 67.1 (d, JPC=5 Hz, CH2OCH2); NMR 31 p(δ ppm, CDCl3): 14.2;<br />
NMR 19 F(δ ppm, CDCl3): -81.3 (CF3), -114.0 (CF3 CF2), -122.4 (6F), -123.2 (2F), -124.0 (2F), -126.6<br />
(CF2CH2).<br />
Ejemplo 3<br />
Sintesis de [11-(F-hexil)undecil]dimorfolinofosforamidato 3<br />
El método anterior, cuando se aplicó a3,26gde11-(F-hexil)undecanol,1,02gdeoxiclorurodefósforo<br />
y 1,73 g de morfolina, dió, después de cromatografía 3,0 g (65%) del fosforamidato 3.<br />
F=20 ◦ C ± 1 ◦ C; C 42.56 (42.37); H 5.24 (5.36); N 3.66 (3.95); F 34.03 (34.89); P 4.43 (4.38); MS<br />
(LID/IC/NH3); m/e (%); M+1 683 (100); IR (ν cm −1 ) 2929, 2954 (C-H); 1240-1150 (P=O, C-F), 972<br />
(P-N); NMR 1 H(δ ppm, CDCl3): 1.33 (“s”, 18H, (CH2)9); 1.80 (m, 2H, RF CH2); 3.14 (dt, 8H, 3 JHH=5.3<br />
Hz, 3 JPH=2.7 Hz, NCH2); 3.64 (t, 8H, 3 JHH=5.3 Hz, CH2OCH2); 3.98 (dt, 2H, 3 JHH=5.3 Hz; 3 JPH=7.9<br />
Hz, CH2OP); NMR 13 C(δ ppm, CDCl3): 20.0 (t, 3 JCF=5 Hz, RF CH2CH2), 25.7, 29.1, 29.2, 29.3, 29.5,<br />
30.6 (all s, 8CH2), 30.8 (t, 2 JCF=20 Hz, RF CH2); 44.7 (s, NCH2), 65.5 (d, 2 JCP=4.8 Hz, CH2OP), 67.2<br />
(d, 3 JCP=6 Hz, CH2OCH2); NMR 31 p(δ ppm, CDCl3): 13.9; NMR 19 F(δ ppm, CDCl3): -81.3 (CF3);<br />
-114.9 (CF3CF2), -122.3 (6F); -123.2 (2F); -124.0 (2F); -126.6 (CF2CH2).<br />
Ejemplo 4<br />
Sintesis de [11-(F-octil)undecil)dimorfolinofosforamidato 4<br />
Como en el ejemplo 3, la reacción entre 3.5 g de oxicloruro de 11-(F-octil)undecanol-1, 0,91 g de<br />
oxicloruro de fósforo y 1,3 g de morfolina; dió; después de tratamiento y cromatografía 3,40 g (71%) del<br />
fosforamidato 4.<br />
F=65 ◦ C ± 1 ◦ C; C 40.08 (40.10); H 4.83 (4.70); N 3.43 (3.46); F 38.50 (39.97); P 3.75 (3.84); IR (ν<br />
cm −1 ): 2924, 2853 (C-H); 1258-1205 (P=O, C-F); 974 (P-N); NMR 1 H(δ ppm, CDCl3): 1.32 (s ancho<br />
18H, (CH2)9; 2.03(m,2H,RF CH2); 3.16 (dt, 8H, 3 JHH=5.3 Hz, 3 JPH=2.7 Hz, NCH2); 3.66 (t, 8H,<br />
3 JHH=5.3 Hz, CH2OCH2); 3.96 (dt, 2H, 3 JHH=5.3 Hz, 3 JPH=7.9 Hz, CH2OP); NMR 13 C(δ ppm,<br />
CDCl3): 20.5 (t, 3 JCF=5 Hz, RF CH2CH2), 26.0, 29.3, 30.0, 30.1, 30.2, 31.5 (todo s, 8 CH2), 31.7 (t,<br />
2 JCF=20 Hz, RF CH2), 44.8 (s, NCH2), 65.7 (d, 2 JCP=5 Hz, CH2OP), 67.5 (d, 3 JCP=6 Hz, CH2OCH2);<br />
NMR 31 p(δ ppm, CDCl3): 13.9; NMR 19 F(δ ppm, CDCl3): -81.3 (CF3); -114.9 (CF3CF2), -122.3 (6F);<br />
-123.2 (2F); -124.0 (2F); -126.6 (CF2CH2).<br />
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60<br />
Ejemplo 5<br />
ES 2 060 184 T3<br />
Sintesis de [2-(F-octil)etil] [2’-N,N,N trimetilamino etilo] fosfato 5<br />
Se hizo reaccionar en éter seco a 0 ◦ C y bajo argón, 2-(F-octil)-etanol (21,30 g) y trietilamina (14,5<br />
ml) primero <strong>con</strong> oxicloruro de fósforo (7,04 g) luego <strong>con</strong> 5,74 g de bromoetanol y 10 ml de trietilamina,<br />
lo que dió 29,02 g (94%) de cloruro de [2-(F-octil)etoxi][2’-bromoetil]fosforilo.<br />
Se hidrolizaron 28,86 g de este compuesto, disuelto en acetonitrilo a 0-5 ◦ C en 27,65 g (98%) de [2-(Foctil)etil]<br />
[2’-bromoetil]fosfato.<br />
Se insufló un gran exceso de trimetilamina a través de una solución de cloroformo/acetonitrilo 50/50<br />
del último compuesto. Se calentó la mezcla a 40 ◦ C durante 15 horas, luego se dejó reaccionar <strong>con</strong> carbonato<br />
argéntico (5,91 g), <strong>con</strong>duciendo, después de tratamiento, a 18,71 g (71%) de 5.<br />
F: descomposición 267 ◦ C; C(+H2O) 28.12 (27.82); H 3.01 (2.94); N 2.15 (2.16); F 48.29 (49.92); P 4.59<br />
(4.79); MS (LID/IC/NH3); m/e (%); M+1 630 (2.5); IR (ν cm −1 ): 1250-1200 (P=O, C-F); NMR 1 H<br />
(δ ppm, CH3OD); 2.55 (tt, 2H, 3 JHH=5.3 Hz, J 3 HF =18.5 Hz; RF CH2); 3.24 (s, 9H, NCH3); 3.66 (m,<br />
2H, CH2N); 4.28 (m, 4H, CH2O); NMR 13 C(δppm, CD3OD); 33.9 (dt, 2 JCF=20.5 Hz, 3 JPC=7 Hz;<br />
RF CH2); 55.3 (3 lineas debido a JCN=4 Hz, NCH3), 59 (m, 3 JPC=5 Hz, RF CH2CH2), 61 (d, 2 JCP=5.4<br />
Hz, OCH2CH2N); 68.1 (m, 1 JCN=4 Hz, 3 JPC=7 Hz, CH2N); NMR 31 p(δ ppm, CD3OD): 0.50; NMR 19 F<br />
(δ ppm, CD3OD): -80.7 (CF3); -113.0 (CF3CF2), -121.3 (6F); 122.2 (2F); -123.1 (2F); -125.7 (CH2CH2).<br />
Ejemplo 6<br />
Sintesis de [1]-(F-octil) undecil [2’-N,N,N trimetilamino etil] fosfato 6<br />
El procedimiento del ejemplo 5 se aplicó primero a 60,70 g de 11-(F-octil)-undecanol, 36 ml de trietilamina<br />
y 15,74 g de oxicloruro de fósforo, luego a 12,86 g de bromoetanol y 20 ml de trietilamina y dió 78,42<br />
g (96%) de cloruro de [11-(F-octil)undecil] 2’-bromoetil) fosforilo. Después de hidrólisis en [11-(F-octil)<br />
undecnil] [2’-bromoetil]fosfato y reacción <strong>con</strong> trimetilamina, luego <strong>con</strong> 17,70 g de carbonato argéntico y<br />
recristalizaciones suvesivas en cloroformometanol, se obtuvo 39,02 g (50% del total) de 6.<br />
F descomposición > 250 ◦ C; C (+H2O) 37.14 (37.26; H 5.20 (4.78); N 2.07 (1.81); F 40.83 (41.78); P 4.20<br />
(4.01); IR (ν cm −1 ); 2924-2954 (C-H); 1236-1204 (P=O, C-F); NMR 1 H(δ ppm, CD3OD); 1.34 (ancho<br />
s, 18H, (CH2)9); 2.03 (tt, 2H, RF CH2); 3.22 (s, 9H, NCH3), 3.65 (m, 2H, CH2Br); 3.85 (dt, 2H, 3 JPH=6<br />
Hz, (CH2)9CH2OP); 4.26 (m, 2H, 3 JPH=4 Hz, OCH2CH2; NMR 13 C(δppm, CD3OD): 21.2 (J
5<br />
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Ejemplo 8<br />
ES 2 060 184 T3<br />
Sintesis de [5-(F-octil) pentil] [2’ N,N,N trimetilamino etil]fosfato 8<br />
El procedimiento del ejemplo 7 aplicado primero a 10,1 g de 5-(F-octil) pentanol, 3,5 ml de trietilamina<br />
y 3,85 g de oxicloruro de fósforo, luego a 8,25 g de colin tosilato y 12 ml de piridina dió, después<br />
de hidrólisis y tratamiento, 9,4 g (70%) de 8.<br />
C 32.20 (32.20); H 3.78 (3.45); N 2.06 (2.09); F 44.82 (48.40); P 4.80 (4.61); RMN 1 H(δ ppm, CD3OD,<br />
TMS):1.45-1.80 (m, 6H, RF CH2(CH2)3); 2.05-2.37 (m, 2H, RF CH2-);3.27(s,9H,N(CH3)3); 3.68 (m,<br />
2H, -CH2N); 3.94 (dt, 3 JHH=6.0 Hz, 3 JHP=6.3 Hz, 2H, RF (CH2)4CH2OP); 4.28 (m, 2H, OCH2CH2N);<br />
RMN 13 C(δppm, CD3OD, TMS): 20.1 (t, 3 JCF=3.8 Hz, CF2CH2CH2); 26.4 (s, RF (CH2)2CH2); 31.4<br />
(d, 3 JCP= 7.4Hz,RF (CH2)3CH2CH2OP); 31.6 (t, 2 JCF=22.1 Hz, RF CH2); 54.6 (t, 1 JCN=4.0 Hz,<br />
N(CH3)3); 60.2 (d, 2 JCP= 4.8Hz,OCH2CH2N); 66.4 (d, 2 JCP=6.2 Hz, RF (CH2)4CH2OP); 67.5 (m,<br />
OCH2CH2 N); RMN 19 F(δ ppm, CD3OD, CFCl3): -81.0 (3F, CF3); -113.9 (2F, CF2CH2); -121,4 to<br />
-123.0 (10F, CF3CF2(CF2)3), -125,9 (2F, CF3 CF2); RMN 31 p(δ ppm, CD3OD, H3PO4): 1.18 (s).<br />
Ejemplo 9<br />
Sintesis de [5-(F-octil)pentil] [2’-N, etil-N,N dimetilamino etil]fosfato 9<br />
El procedimiento del ejemplo 7, aplicado primero a 5,2 g de 5-(F-octil) pentanol, 1,8 ml de trietilamina<br />
y1,96gdeoxiclorurodefósforo, luego a 4,45 g de N-etil -n,n-dimetil-etanolamin tosilato y 6,2 ml de<br />
piridina dió, después de hidrólisis y tratamiento, ,7 g (67%) de 9.<br />
RMN 1 H(δppm, CD3OD, TMS): 1.40 (t, 3 JHH=7.2 Hz, 3H, NCH2CH3); 1.45-1.80 (m, 6H, RF CH2<br />
(CH2)3); 2.04-2.33 (m, 2H, RF CH2-);3.16(s,6H,N(CH3)2); 3.52 (q, 3 JHH=7.2 Hz, 2Hm NCH2CH3);<br />
3.60 (m, 2H, -CH2N); 3.90 (dt, 3 JHH=6.1 Hz 3 JHP =6.3 Hz, 2H, RF (CH2)4CH2OP); 4.22 (s grande, 2H,<br />
OCH2CH2N); RMN 13 C(δ ppm, CD3OD,TMS):8.5(s,NCH2CH3); 21.1 (t, 3 JCF=4.6 Hz, CF2CH2CH2);<br />
26.5 (s, RF (CH2)2 CH2); 31.5 (d, 3 JCP=7.4 Hz, RF (CH2)3 CH2CH2OP); 31.7 (t, 2 JCF=22.2 Hz,<br />
RF CH2); 51.6 (s grande, N(CH3)2); 60.1 (d, 2 JCP=5.1 Hz, OCH2CH2N); 62.3 (s grande, NCH2CH3);<br />
64.6 (m, OCH2CH2N); 66.5 (d, 2 JCP=5.6 Hz, RF (CH2)4CH2OP); RMN 19 F(δ ppm, CD3OD, CFCl3):<br />
-81.0 (3F, CF3); -113.9 (2F, CF2CH2); -120.3 to -123.0 (10F, CF3 CF2(CF2)3); -125.9 (2F, CF3CF2);<br />
RMN 31 p(δ ppm, CD3OD, H3PO4): 1.04 (s).<br />
Ejemplo 10<br />
Sintesis de 1,2-di[(11-F-hexil) undecanoil] 3-[2’-(N,N,N-trimetilamino) etil fosforil] rac glicerol 10<br />
1) Sintesis de 1,2-di[(11-F-hexil)undecanoil] 3-bencil rac-glicerol<br />
Se dejó reaccionar 1-bencil rac-glicerol (3,92 g) y trietilamina en Et2O a0 ◦ Cbajoargón <strong>con</strong> cloruro<br />
11-F-hexil -undecanoilo (24,56 g). Después de cromatografía y recristalización, se obtuvieron 23,89 g<br />
(95%) de 1,2-di[(11-F -hexil)undecanoil] 3-bencil rac-glicerol en forma de un sólido blanco.<br />
C 46.00 (45.76), H 4.389 (4.51), F 42.97 (42.77);<br />
IR (ν cm −1 , KBr): 1742 (C=O), 1240-1100 (CF), 735, 702 (benceno monosustituido) NMR 1 H(δ ppm,<br />
CDCl3, TMS): 1.20-2.60 (m, 40H, (CH2)10), 3.6 (d, 3 JHH=5.3 Hz, 2H, CH2OBz), 4.13-4.55 (m, 2H,<br />
COOCH2CH), 4.66 (s, 2H, CH2Ph), 5.20-5.50 (m, 1H, CH), 7.46 (s, 5H, Ph); NMR 13 C (δ ppm,<br />
CDCl3/CD3OD, TMS): 20.21 (t, 3 JCF= 3.7hz,CF2CH2CH2), 24.96 Y 25.03 (s, CH2 CH2CO), 29.19,<br />
29.30 y 29.43 (s, (CH2)6), 31.03 (t, 2 JCF=22.3 Hz, CF2CH2), 34.20 y 34.41 (s, CH2CO), 62.79 y 68.46<br />
(s, CH2CHCH2), 70.21 (s, CH), 73.45 (s, CH2Ph), 127.71 y 128.51 (s, C orto y meta), 127.86 (s C para),<br />
137.89 (s, CH2-C(Ph), 173.13 and 173.41 (s, CO).<br />
2) Sintesis de 1,2-di[(11-F-hexil)-undecanoil] rac -glicerol.<br />
De adicionó 1,44 g de paladio al 10% sobre carbón activado a una solución de 1,2-di[(11-F-hexil)<br />
undecanoil] 3-bencil rac-glicerol (20,62 g) en THF. La suspensión agitada se mantuvo bajo presión de<br />
hidrógeno (1,6 bar) hasta que se completó lahidrogenólisis. Se separó por filtración el catalizador y se<br />
<strong>con</strong>centró el filtrado o utilizó directamente en la etapa siguiente. El producto se almacenó a4 ◦ C.<br />
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ES 2 060 184 T3<br />
IR (ν cm −1 , KBr); 3500 (OH), 1742 (C=O), 1232-1100 (CF); NMR 1 H(δ ppm, CDCl3, TMS): 1.16-2.60<br />
(m, 40H, (CH2)10), 3.76 (d, 3 JHH=6 Hz, 2H, CH2OH), 4.16-4.63 (m, 2H, OCH2), 5.13 (m, 1H CH).<br />
3) Sintesis de 1,2-di[(il-F-hexil) undecanoil] 3-[2’-(N,N,N-trimetilamino) etil] fosforil rac-glicerol, 10.<br />
Se adicionó una solución de 1,2-di[(il-F-hexil) undecanoil] rac-glicerol (2,59 g) en THF a una solución<br />
enfriada de (2-bromoetil)diclorofosfato (0,82 g) y trietilamina (1,23 g) en THF. La mezcla se agitó primero<br />
a temperatura ambiente y luego se sometio a reflujo suave. Después de enfriamiento a 0 ◦ C se adicionaron<br />
4,5 ml de agua, y se prosiguió la agitación. Se decantó la mezcla y se extrajo la fase acuosa <strong>con</strong> CHCl3.<br />
Después de evaporación se disolvió el residuo bruto (3,33 g) en CHCl3 yCH3CN al que se adicionaron<br />
1,23 g de trimetilamina. Se calentó la mezcla durante 24 horas a 50 ◦ C. Después de enfriamiento se adicionó<br />
Ag2CO3 (0,56 g) y se prosiguió la agitación durante 3 horas. La purificación sobre gel de sílice y<br />
recristalización dió 1,08 g (32%) de 10.<br />
NMR 1 H(δ ppm, CDCl3, TMS): 1.30 (bs, 24H, (CH2)6), 1.60 (m, 8H, CH2 in β from CF2 and CO);<br />
1.90-2.27 (m, 4H, CF2CH2); 2.25-2.40 (m, 4H, CH2CO), 3.33 (s, 9H, NCH3), 3.63 (m, 2H, CH2N);<br />
4.00 (dd, 2H, 3 JHH=6.2 Hz, 3 JHP =6.7 Hz, CHCH2OP); 4.18 Y 4.45 (parte AB de un sistema ABX,<br />
2 JAB=12.3 Hz, 3 JAX=7 Hz, 3 JBX=3.3 Hz, 2H, CH2CHCH2 OP); 4.27 (m, 2H, OCH2CH2N), 5.25 (m,<br />
1H, CH); NMR 13 C(δ ppm, CDCl3/CD3OD, TMS): 20.56 (t, 3 JCF=3.6 Hz, CF2CH2CH2), 25.30 y 25.36<br />
(s, CH2CH2CO), 29.53, 29.69 y 29.81 (s, (CH2)6), 31.29 (t, 2 JCF=22.2 Hz, CF2CH2), 34.50 and 34.65<br />
(s, CH2CO), 54.45 (tres lineas debido a 1 JCN= 1.7Hz,NCH3), 59.57 (d, 2 JCP=4.9 Hz, POCH2 CH2),<br />
63.16 (s, OCH2CH), 64.11 (d, 2 JCP=5.2 Hz, CHCH2OP), 6.95 (m, CH2NH), 70.96 (d, 3 JCP=8.2 Hz,<br />
CH), 174.02 y 174.39 (s, CO); NMR 31 p(δ ppm, CDCl3/ CD3OD, H3PO4): -0.68; NMR 19 F(δ ppm,<br />
CDCL3/CD3OD, CFCl3): -81.53 (CF3), -115.12 (CF3CF2), -122.65, -123.66 y y -124.16 ((CF2)3), -126.83<br />
(CF2CH2).<br />
Ejemplo 11<br />
Sintesis de 1,2-di[(il-F-butil) undecanoil] 3-(2’-(N,N,N-trimetilamino) etil fosforil] rac-glicerol 11<br />
El procedimiento descrito en el ejemplo 10 cuando se aplicó a 1-bencil rac-glicerol (5,3 g), (11-F-butil)<br />
undecanoil cloruro (50,3 g) y trietilamina (19 ml) dió 22,1 g (80%) de 1,2-di [(11-F-butil) undecanoil]<br />
3-bencil rac-glicerol. Hidrogenólisis, después de reacción <strong>con</strong> (2-bromoetil) diclorofosfato (6,03 g) y trietilamina<br />
(11,04 g), seguido de hidrólisis, y finalmente, reacción <strong>con</strong> trimetilamina (19 g) <strong>con</strong>dujo a 6,60<br />
g (30%) de 11.<br />
C 44.36 (44.32), H 5.75 (5.64), F 32.66 (33.21), N 1.35 (1.36) P 3.14 (3.01); RMN 1 H (δ ppm,<br />
CDCl3/CD3OD, TMS): 1.30 (bs, 24H (CH2)6), 1.60 (m, 8H, CH2 en β de CF2 y CO), 1.93-2.27 (m,<br />
4H, CF2CH2), 2.30 y 2.45 (dos t, 4H, CH2CO), 3.25 (s, 9H, NCH3), 3.6-3.7 (m, 2H, CH2N), 4.0 (dd,<br />
2H, 3 JHH=6.2 Hz, 3 JHP=6.7 Hz, CH2CH2OP), 4.18 y 4.45 (parte AB de un sistema ABS, 2 AB=12.3<br />
Hz, 3 JAX=7 Hz, 3 JBX=3.3 Hz, 2H, CH2CHCH2OP), 4.3-4.33 (m, 2H, OCH2CH2N), 5.20 (m, 1H, CH);<br />
NMR 13 C(δ ppm, CDCl3/CD3OD, TMS): 20.44 (t, 3 JCF=3.6 Hz, CF2CH2CH2), 25.2 (s, CH2CH2CO),<br />
29.42, 29.57 y 29.70 ((CH2)6), 31.08 (t, 2 JCF=22.3 Hz, CF2CH2), 34.35 y 34.51 (s, CH2CO), 54.27 (tres<br />
lineas debido a 1 JCN=1.7 Hz, NCH3), 59.53 (d, 2 JCP= 4.8Hz,POCH2), 63.03 (s, OCH2CH); 64.02 (d,<br />
2 JCP=5 Hz, CHCH2OP), 66.82 (m, CH2N), 70.91 (d, 3 JCP=8.1 Hz, CH), 173.89 y 174.24 (s, CO); NMR<br />
31 p(δ ppm, CDCl3/CD3OD, H3PO4): -0.13 (s).<br />
Ejemplo 12<br />
Sintesis de 1,2-di [(11-F-hexil)pentanoil]-3 -[2’-(N,N,N-trimetilamino)etil fosforil] rac-glicerol 12<br />
El procedimiento descrito en el ejemplo 10, cuando se aplicó a 1-bencil rac-glicerol (8,3 g), cloruro de<br />
(il -F-hexil)p-entanoilo (42 g) y trietilamina (13,5 ml) dió 38,5 g de 1,2-di [(11-F-hexil) pentanoil] 3-benil<br />
rac-glicerol. Hidrogenólisis, luego reacción <strong>con</strong> (2-bromoetilo)diclorofosfato (10,73 g) y trietilamina (19,73<br />
g), seguido de hidrólisis, y finalmente, reacción <strong>con</strong> trimetilamina (31,6 g) <strong>con</strong>dujo a 10,5 g (25%) de 12.<br />
RMN 1 H(δppm, CDCl3/CD3OD,TMS):1.73(m,8H,CH2 en β de CF2 y CO), 2.01-2.29 (m, 4H, CF2<br />
CH2), 2.31 y 2.63 (dos t, 4H, CH2CO), 3.30 (s, 9H, NCH3), 3.6-3.7 (m, 2H, CH2N), 4.0 (dd, 2H, 3 JHH=6.2<br />
Hz, 3 HHP=6.7 Hz, CH2CH2OP), 4.19 y 4.63 (parte Ab de un sistema ABX, 2 JAB=12.3 Hz, 3 JAX=7<br />
Hz, 3 JBX=3.3 Hz, 2H, CH2CHCH2OP), 4.3-4.33 (m, 2H, OCH2CH2N), 5.03 (m, 1H, CH); NMR 13 C<br />
11
5<br />
10<br />
15<br />
20<br />
25<br />
30<br />
35<br />
40<br />
45<br />
50<br />
55<br />
60<br />
ES 2 060 184 T3<br />
(δ ppm, CDCl3/CD3OD, TMS): 19.51 (t, 3 JCF=3.6 Hz, CF2 CH2CH2, 23.98 y 24.00 (s, CH2CH2CO),<br />
30.78 (t, 2 JCF=22.4 Hz, CF2CH2), 33.32 Y 33.49 (s, CH2CO), 54.05 (tres líneas debido a 1 JCN=3.7 Hz,<br />
NCH3), 58.78 (d, 2 JCP=4.8 Hz, POCH2), 62.73 (s, OCH2CH), 63038 (d, 2 JCP=5 Hz, CHCH2OP), 66.41<br />
(m, CH2N), 70.43 (d, 3 JCP=8.1 Hz, CH), 172.56 y 174.89 (s, CO); NMR 31 p(δppm, CDCl3/CD3OD,<br />
H3PO4): 0.57 (s), 19 F(δ ppm, CDCl3, CD3OD, CFCI3): -81.5 (CF3), -115.2 (CF3-CF2); -122.6, -123.6,<br />
124.2 (CF2)3, -128.63 (CF3-CF2).<br />
Ejemplo 13<br />
Sintesis de 1,2-di [(11-F-butil) undecil] 3-[2’-(N,N,N-trimetilamino) etil fosforil] rac-glicerol, 13<br />
1) Sintesis de 1,2-di [(11-F-butil) undecil] bencil -3 rac-glicerol.<br />
Se dejó reaccionar 6 g (11-F-butil) undecil tosilato en éter <strong>con</strong> 1 g de bencil-1 rac-glicerol bajo <strong>con</strong>diciones<br />
de transferencia de fase (KOH, 10N/6 g de (nBu)4N + HSO− 4 ). Se obtuvieron 3,2 g (63%) del<br />
compuesto del epígrafe después de 10 días de reacción y cromatografía de la fase orgánica.<br />
NMR 1 H (delta ppm, CCl4): 1,02-2,41 (m, 40H, (CH2)10); 3.40 (m, 9H, OCH2 y CH); 4,47 (s, 2H,<br />
CH2Ph); 7.26 (s, 5H, Ph).<br />
2) Sintesis de 1,2-di [(11-F-butil) undecil] 3-[2’ -(N,N,N-trimetilamino) etil fosforil] rac-glicerol, 13.<br />
El procedimiento descrito en el ejemplo 10, cuando se aplicó a 6.7 g de 1,2 - di [(11 - F - butil)<br />
undecil]bencil - 3 rac - glicerol <strong>con</strong>dujo, después de hidrogenólisis, reacción <strong>con</strong> 1,9 g de (2’ - bromoetil)diclorofosfato<br />
y 2 ml de trietilamina, después de hidrólisis y por último reaccional <strong>con</strong> trimetilamina<br />
(7 g), a 4 g (56%) de 13.<br />
NMR 1 H(δ ppm, CDCl3/CD3OD): 1.05-1.65 (m, 36 H, (CH2)9); 1.80-2.1 (m, 4H, CF2CH2); 3.17 (s,<br />
9H, NCH3); 3.35 (t, 2H, 3 JHH=6.5 Hz, CH2N); 3.40-3.63 (m, 8H, OCH2); 3.79 (t, 2H, 3 JHH=6.5 Hz);<br />
4.10-4.30 (m, 1H, CH); NMR 13 C(δppm, CDCl3/CD3OD): 20.3 (t, 3 JFC=3.5 Hz, CF2CH2CH2); 26.3 a<br />
30.3 (9 singletes para las dos (CH2)8 cadenas); 31.0 (t, 2 JFC=22 Hz, CF2CH2; 54.5 (s, NCH3); 59.4 (d,<br />
2 JPC=5 Hz, CH2OP); 65.34 (d, 2 JPC=5 Hz, POCH2CH); 66.65 (d, 3 JPC=6.5Hz,CH2N); 70.83, 72.01<br />
(s, CH2CH2O); 70.9 (s, CH2OCH2OH); 78.3 (d, 3 JPC=8 Hz, CH); NMR 31 p(δ ppm, CDCl3/CD3OD):<br />
-0.07; NMR 19 F(δ ppm, CDCl3/CD3OD): -81 (CF3), -114.0 (CF3CF2); -124.4 (CF2); -126.0 (CF2CH2).<br />
Ejemplo 14<br />
Sintesis de [1’-2’-di [(11-F-hexil)undecanoil] rac-gliceril] [di (2’-metoxi-etil)] fosfasto 14<br />
Se adicionó a gotas a 0 ◦ C 1,2-di [(11-F-hexil)undecaoil] 3-bencil rac-glicerol (1,99 g) a una solución de<br />
oxicloruro de fósforo (0,31 g) y trietilamina (0,66 g) en éter. Después de agitación a temperatura ambiente<br />
se adicionó 2 -metoxi etano (0,35 g) en éter y se sometió a reflujo la mezcla. Se separó por filtración<br />
cloruro de trietilaminio, se separó el disolvente y se adicionaron 15 ml de una mezcla de acetonitrilo y<br />
acetona. Se <strong>con</strong>centró la fracción soluble y se purificó sobre gel de sílice, lo que dió 1 g (42%) de 14.<br />
IR (ν cm −1 , KBr); 1744 (C=O)., 1240-1100 (CF), NMR 1 H (delta ppm, CDCl3, TMS): 1,10-1.86 (s<br />
ancho, 32H, (CH2)8); 1,87-2,06 (m, 4H, CF2CH2); 2.20-2.53 (m, 4H, CH2CO); 3,46 (s, 6H, OCH3); 3.66<br />
(m, 4H, CH2OMe); 4,10-4.66 (m, 8H, OCH2); 5.16-5.50 (m, 1H, CH).<br />
Ejemplo 15<br />
Sintesis de [2-(F-octil)etil] [di-(2’-metoxi -etil)]fosfato 15<br />
El procedimiento descrito para la preparación de 145, cuando se aplicó a30,8gde2-F-octiletanol,18<br />
ml de piridina, 10,2 g de oxicloruro de fósforo y a 11,2 g de 2 -metoxietanol <strong>con</strong>dujo a 26,5 (60%) de 15.<br />
IR (ν cm −1 ): 1242 (P=O); 1207-1140 (CF); 979 (P-O), NMR 1 H (delta ppm, CDCl3), TMS): 2.61 (m,<br />
2H, CF2CH2); 3.43 (s, 6H, OCH3); 3,66 (m, 4H, CH3OCH2); 4.32 (m, 6H, CH2OP).<br />
12
5<br />
10<br />
15<br />
20<br />
25<br />
30<br />
35<br />
40<br />
45<br />
50<br />
55<br />
60<br />
Ejemplo 16<br />
Sintesis de [5-(F-hexil) pentil][diglicerol] fosfato 16<br />
ES 2 060 184 T3<br />
Se dejó reaccionar en éter seco, a 0 ◦ C y bajo argón, 5-(F-hexil) pentanol (5,0 g) y trietilamina (2,2 ml)<br />
primero <strong>con</strong> oxicloruro de fósforo (2,4 g) luego <strong>con</strong> 10 g de isopropiliden glicerol y 8,2 ml de trietilamina<br />
para dar 5.3 g (60%) de [5-(F-hexil)pentil][diisopropiliden glicerol]fosfato.<br />
Después de hidrólisis en CF3CO2H/H2O 9/1 y tratamiento se obtuvieron 4,0 g (85%) de 16.<br />
Actividad Superficial<br />
La fuerte actividad superficial de los compuestos abarcados por este invento se ilustra en particular<br />
mediante el fuerte descenso de las tensiones superficiales (s) que causan cuando se adicionan al<br />
agua, como se muestra mediante los ejemplos de tensiones superficiales (medido a 20 ◦ C y expresado en<br />
miliNewton.metro −1 ) y calculado desplegando coeficientes recogidos en la tabla que sigue:<br />
Compuesto Concentración γs(mNm −1 ) γi (mMm −1 ) Coefi. de<br />
en agua (+O, 3 ) (+O, 3 ) desplegamiento<br />
mmol/1 g/l (mNm −1 )<br />
5 1,59 1 23,0 4,5 - 4,6<br />
6 1,32 1 30,0 9,4 - 16,5<br />
2 1,47 1 22,5 1,0 - 0,6<br />
1 1,72 1 22,5 2,0 - 1,6<br />
4 0,124 0,1 11,4 1,4 - 1,0<br />
3 0,141 0,1 24,4 7,5 - 0,9<br />
Más <strong>con</strong>cretamente, la acción de estos compuestos en la interface entre agua y <strong>fluor</strong>ocarbonos se demuestra<br />
mediante la disminución muy aguda de la tensión interfacial (γ i) entre agua y per<strong>fluor</strong>odecalin<br />
(56 mNm −1 ) en ausencia de tensoactivo) y el aumento del coeficiente de desplegamiento (-56 mNm −1 en<br />
ausencia de tensoactivo) como se ilustra en los ejemplos recogidos en la misma tabla.<br />
Biocompatibilidad<br />
La biocompatibilidad de los compuestos que pertenecen al presente invento se ilustra, en particular,<br />
por el hecho de que soluciones o dispersiones acuosas en 9% de NaCl de estos compuestos no perturban<br />
el crecimiento y multiplicación de cultivos de células limfoblastoides de la cepa Namalva <strong>con</strong> respecto a<br />
un <strong>con</strong>trol de solución de NaCl al 9% (100% de desarrollo y viabilidad).<br />
En la Tabla que sigue se ofrecen ejemplos:<br />
Compuesto Concentración Cultivo de células<br />
mm/l g/l Crecimiento % Viabilidad %<br />
5 15,9 10 96 102<br />
2 1,47 1 67 106<br />
10 0,81 1 99 95<br />
11 0,97 1 60 83<br />
13 0,99 1 55 91<br />
Asimismo, la biocompatibilidad de compuestos que pertenecen al invento se ilustra por el hecho de<br />
que soluciones o dispersiones acuosas en 9% de NaCl de estos compuestos a las <strong>con</strong>centraciones dadas en<br />
la Tabla siguiente no causan la hemólisis de globulos rojos humanos.<br />
13
5<br />
10<br />
15<br />
20<br />
25<br />
30<br />
35<br />
40<br />
45<br />
50<br />
55<br />
60<br />
ES 2 060 184 T3<br />
Compuesto Concentración<br />
mmol/l g/l<br />
8 0,94 1<br />
1 17,2 10<br />
5 15,9 10<br />
10 24,4 30<br />
11 97,2 100<br />
12 56,2 100<br />
13 59,9 60<br />
14 14,60 10<br />
De igual modo la biocompatibilidad de estos compuestos se ilustra por el hecho de que la inyección de<br />
500 µl de una solución o una dispersión en NaCl al 9% de los compuestos que siguen en <strong>con</strong>centraciones<br />
expuestas a <strong>con</strong>tinuación, en la vena de cola de 10 ratones de 10-25 g no causó muertes, y no perturbó el<br />
desarrollo normal de los animales, lo cual fue observado durante 35 días.<br />
Preparación de Liposomas<br />
Compuesto Concentración<br />
g/l<br />
5 1<br />
6 1<br />
10 30<br />
11 100<br />
12 100<br />
13 60<br />
14 10<br />
1) El lípido 12 disuelto en cloroformo se dispuso en un matraz de fondo redondo y se evaporó el<br />
disolvente mediante giro bajo argón para producir una película uniforme de lípido seco. Se extrajeron<br />
vestigios residuales de cloroformo bajo vacio (10 −3 mmHg, 3h). Se suspendió lipido seco en tampón<br />
HEPES (10 −2 M, pH 7), se vorticó durante 5 minutos, luego se sonicó <strong>con</strong> sonda (dia 7 sobre un sonificador<br />
B30, Potencia 4, Pulso 50, 3 m.) 15 ◦ C sobre la temperatura de transición de fase, para producir<br />
una dispersión azulada límpida. La <strong>con</strong>centración final de 12 es 3% (peso/vol.) Se relizaron mediciones<br />
de tamaño medio mediante esparcimiento de luz sobre un Analizador de particular sub-micron modelo<br />
Coulter N4SD: 0,12 um.<br />
2) El mismo procedimiento de dispersión aplicado a lipido en polvo 12 produjo una dispersión limpida<br />
<strong>con</strong>untamaño de partícula medio de 0,12 µ.<br />
Se observaron liposomas mediante microscopia electrónica después de ataque de <strong>con</strong>gelación como<br />
vesículas unilamellar y multilamellar. El aspecto de los liposomas no mostró diferencias o distorsiones<br />
estructurales después de esterilización (8 mm. -121 ◦ C - 15 lb/pulg. cuadrada). Las dispersiones esterilizadas<br />
almacenadas a 25 ◦ C mostraron estabilidad mejoradas ya que el tiempo transcurrido para la<br />
aparición de un precipitado <strong>con</strong>trolado mediante inspección visual fue superior a 5 meses, mientras que<br />
la estabilidad de dispersiones de fosfatidilcolina hidrocarbonatadas se sabe que es inferior a un mes.<br />
14
5<br />
10<br />
15<br />
20<br />
25<br />
30<br />
35<br />
40<br />
45<br />
50<br />
55<br />
60<br />
Preparación de emulsiones<br />
Efecto Tensoactivo<br />
ES 2 060 184 T3<br />
Tabla I<br />
Tamaño de partícula medio (µm)<br />
Compuesto EYP b F-decalin Después de Después de 1 Aumento<br />
Número % %(p/v) %(p/v) preparación a mes de 50 ◦ C relativo %<br />
5 1 0 0.48 0.55 14<br />
Ref. 0 1 no puede prepararse<br />
emulsión<br />
5 3 0 50 0.20 0.30 50<br />
6 3 0 0.25 0.36 44<br />
Ref. 0 3 0.32 0.55 22<br />
a) Emulsiones preparadas mediante sonicación<br />
b) EYP: fosfolípidos de yema de huevo natural<br />
Tabla II<br />
Tamaño de partícula medio (µm)<br />
Compuesto EYP b F-decalin Después de Después de 6 meses Aumento<br />
preparación a a4 ◦ a25 ◦ a50 ◦ C relativoa4 ◦ C<br />
Número % %(p/v) %(p/v)<br />
5 2.5 0 0.20 0.22 0.41 0.98 10<br />
6 0.5<br />
Ref. 0 3 100 0.3 0.65 0.65 1.5 117<br />
a) Emulsiones preparadas mediante microfluidificación<br />
Tabla III<br />
Tamaño de partícula medio (µm)<br />
Compuesto EYP b F-decalin Después de Después de Aumento<br />
Número % %(p/v) %(p/v) preparación a 1mes relativo %<br />
3 1 2 0.26 0.39 b 50<br />
4 1 2 0.26 0.39 b 50<br />
5 1 2 20 0.15 0.29 b 100<br />
6 1 2 0.17 0.36 b 110<br />
Ref. 0 3 0.15 0.44 b 200<br />
11 0.66 1.33 0.37 0.50 c 35<br />
Ref. 0 2 50 0.35 0.62 c 80<br />
a) Emulsiones preparadas mediante sonicación<br />
15
5<br />
10<br />
15<br />
20<br />
25<br />
30<br />
35<br />
40<br />
45<br />
50<br />
55<br />
60<br />
b) Las emulsiones se almacenan a 25 ◦ C<br />
c) Las emulsiones se almacenan a 50 ◦ C<br />
ES 2 060 184 T3<br />
Tabla IV<br />
Tamaño de partícula medio (µm)<br />
Compuesto EYP b F-decalin Después de Después Después Aumento<br />
Número % %(p/v) %(p/v) preparación a de 3 meses de 8 meses relativo %<br />
5 0.66 1.33 100 0.6 1.1 1.35 125<br />
Ref . 0 2 100 0.49 Roto<br />
a) Todas las emulsiones se prepararon mediante microfluidificación y se guardaron a 50 ◦ C.<br />
Los nuevos tensoactivos per<strong>fluor</strong>oalquilados se solubilizaron o dispersaron en agua. Luego se adicionó<br />
el <strong>fluor</strong>ocarbono bajo agitación. Puede utilizarse cualquier método de emulsionificación como sonicación,<br />
pero se prefieren procedimientos mecánicos tal como microfluidificación u homogenización de alta presión.<br />
La emulsión obtenida puede utilizarse como un vehículo de O2. El efecto de estabilización significante que<br />
puede obtenerse incorporando los nuevos tensoactivos de F-alquilo se ilustra para varias formulaciones de<br />
emulsión (véase las Tablas anteriores). Los resultados muestran que tanto los tamaños de partícula medios,<br />
medido inmediatamente después de la preparación, y la estabilidad (evaluado mediante el aumento<br />
relativo de los tamañosmediosdeparticula,para1a6mesesdealmacenamientode4,25y50 ◦ C) son<br />
siempre superiores para la emulsiones de referencia preparadas <strong>con</strong> la misma cantidad de EYP natural<br />
que para la basada en F-alquilo.<br />
Se han preparado mediante sonicación emulsiones de per<strong>fluor</strong>odecalin estables adicionales (50%<br />
peso/volumen) a base de fosfatidil colinas per<strong>fluor</strong>oalquiladas 11 o 12 (2 o 3% peso/volumen) como<br />
el único tensoactivo. Es de apreciar que el aumento en el tamaño de partícula medio resultó sermenor<br />
para las emulsiones a base de tensoactivos F-alquilados (10% de aumento) que para las emulsiones de<br />
referencia.<br />
Estos experimentos <strong>con</strong>dujeron a diveras observaciones importantes: simplemente el hecho de que es<br />
posible preparar 50% peso/volumen de emulsiones de F-decalin <strong>con</strong> anfifilos F-alquilados como el único<br />
tensoactivo, y que estas emulsiones son estables de por si, lo que es notable (véase la Tabla I). Es también<br />
notable que ha sido posible preparar emulsiones tales como del 5% de F-decalin, que permanecen estables<br />
a50 ◦ C durante por lo menos un mes, <strong>con</strong> solo 1% de 5. El comparación, cuando se utiliza la misma<br />
formulación, pero <strong>con</strong> EYP en lugar de 5, se observa separación de fase inmediatamente (véase Tabla I).<br />
Otra observación destacable es el hecho de que a 4 ◦ C no existe cambio detectable en el tamaño de<br />
partículas en el tensoactivo <strong>fluor</strong>ado 5 y 6 <strong>con</strong>teniendo emulsión de F -decalin altamente <strong>con</strong>centrada<br />
(100% peso/volumen) durante un período de 6 meses (véase la Tabla II).<br />
16
5<br />
10<br />
15<br />
20<br />
25<br />
30<br />
35<br />
40<br />
45<br />
50<br />
55<br />
60<br />
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REIVINDICACIONES<br />
1.Uncompuestodelafórmula general<br />
R1-CH2 |<br />
(R2-CH)m O<br />
| <br />
o<br />
CH2-O -P-X<br />
|<br />
Y (Ia)<br />
en donde:<br />
R 1 representa:<br />
RF (CH2)a-(CH=CH)b-(CH2)c-(CH=CH)d -(CH2)e-A-;<br />
RF -(CH2)f-OCH1CH(CH1OH)CH1-A-;<br />
RF -(CH2)g-OCH2CH(CH2OH)-A-;<br />
R 1 -CH2 O<br />
| <br />
CH-O-P-X<br />
| |<br />
R 2 -CH2 Y<br />
en donde -A- representa -O-, -C(O)O-, -R6 (R7 )N + -, (en donde cada uno de R6 yR7 representa<br />
alquilo de C1-C4 o hidroxietilo), -(CH2)n-, en donde n=0 o 1, O-C(O)N(R9 )-(CH2)q-B, en donde q<br />
es un número entero de 0 a 12, B representa -O- o -C(O)-, y R9 es hidrógeno o R6 ,<br />
y en donde la suma de a+c+e es de 0 a 11, la suma b+d es de 0 a 12 y cada uno de f y g es de 1 a<br />
12;<br />
RF -(CH2-CH2-O)h-;<br />
RF -(CH(CH3)CH2O)h-;<br />
RF -(-CH2-CH2-S)h-,<br />
en donde h es de 1 a 12; y<br />
en donde RF representa una fracción <strong>con</strong>teniendo flúor que tiene una de las estructuras siguientes:<br />
mes0o1;<br />
(a) F(CF2)i-, en donde i es de 2 a 12,<br />
(b) (CF3)2CF(CF2)j-, en donde j es de 0 a 8,<br />
(c) RF 1(CF2CF(CF3))k, endondekesde1a4,yRF 1representaCF3-, C2F5- o(CF3)2CF-,<br />
(d) RF 2(RF 3)CFO(CF2CF2)1-, en donde 1 es de 1 a 6 y en donde cada uno de RF 2yRF 3<br />
representan, independientemente, CF3-, C2F5-, n-C3F7- oCF3CF2CF(CF3)-, o RF 2yRF 3<br />
tomados juntos representan -(CF2)4- o-(CF2)5-, o<br />
(e) una de las estructuras (a) a (d) en donde uno o mas de los átomos de flúor estan sustituidos<br />
porunoomás átomos de hidrógeno o bromo y/o por lo menos dos átomos de cloro en una<br />
porción tal que por lo menos el 50% de los átomos enlazados al esqueleto de carbono de RF<br />
son átomos de <strong>fluor</strong>, y en donde RF <strong>con</strong>tiene por lo menos 4 átomos de flúor,<br />
R2 representa R1 ,hidrógeno o un grupo OR,<br />
donde R representa un alquilo de C1-C20 saturado o insaturado, alquilo o acilo de C3-C20; y<br />
cuando m es 1, R1 yR2 pueden intercambiar sus posiciones; y<br />
cada uno de X e Y representan, independientemente:<br />
hidroxilo;<br />
-OCH2CH(OH)CH2OH;<br />
-O(CH2CH2O)nR 3 ,<br />
17<br />
(Ib)
5<br />
10<br />
15<br />
20<br />
25<br />
30<br />
35<br />
40<br />
45<br />
50<br />
55<br />
60<br />
ES 2 060 184 T3<br />
en donde n es un número entero de 1 a 5; y<br />
R 3 representa un átomo de hidrógeno o grupo de alquilo de C1-C4;<br />
-NR 4 R 5 oN + R 4 R 5 R 8 ,<br />
en donde cada uno de R 4 ,R 5 yR 8 representan, independientemente un átomo de hidrógeno; un<br />
grupo de alquilo de C1-C4; -CH2CH2O(CH2CH2O)sR 3 , en donde s representa un número entero de<br />
1a5,oR 4 yR 5 cuando se toman juntos representan -(CH2)q en donde q es un número entero de<br />
2 a 5, o <strong>con</strong> cuando <strong>con</strong> el átomo de nitrógeno R 4 yR 5 forman un grupo morfolino;<br />
-O(CH2)pZ representa un grupo de ácido 2-aminoacético, -NR 4 R 5 o-N + R 4 R 5 R 8 donde R 8 es como<br />
se ha definido para R 4 yR 5 ,pesunnúmero entero de 1 a 5;<br />
<strong>con</strong> la salvedad de que X e Y no representan ambos hidroxilo o una forma ionizada derivada de hidroxilo.<br />
2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde RF es F(CF2)i ymes0.<br />
3. El compuesto de la reivindicación 1, donde RF es F(CF2)i ymes1.<br />
4. El compuesto de la reivindicación 3, donde R 2 es igual a R 1 .<br />
5. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde R 1 es RF (CH2)a-(CH=CH)b<br />
-(CH2)c-(CH=CH)d-(CH2)e-A-.<br />
6. El compuesto de la reivindicación 5, en donde b+d=0.<br />
7. El compuesto de la reivindicación 5, en donde A representa -O-, -C(O)O- o -(CH2)n-, donde n=0<br />
o1.<br />
8. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde RF es F(CF2)i-, y donde i es<br />
de 2 a 12.<br />
9. El compuesto de la reivindicación 8, en donde i es de 4 a 8.<br />
10. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde cada uno de X e Y representa, independientemente,<br />
hidroxilo, morfolino o un grupo -O(CH2CH2O)n R 3 , donde n es 1 o 2 y R 3 representa<br />
un grupo de metilo, <strong>con</strong> la salvedad de que X e Y no representan ambos hidroxilo o una forma ionizada<br />
derivada de hidroxilo.<br />
11. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde cada uno de X e Y presenta,<br />
independientemente, -OCH2CH2N + (CH3)3.<br />
12. Un métodoparalapreparación de un compuesto que tiene la estructura expuesta en la reivindicación<br />
1, que comprende las etapas de:<br />
(a) hacer reaccionar un compuesto de la fórmula general<br />
R 1 -CH2<br />
|<br />
(R 2 -CH)m O ;<br />
| <br />
CH2-O -P-Cl2<br />
(IIa)<br />
o<br />
R1-CH2 O<br />
| <br />
CH-O-P-Cl2<br />
|<br />
R2-CH2 <strong>con</strong> un compuesto HX para efectuar mono-sustitución de uno de los átomos de Cl, y <strong>con</strong>vertir el producto<br />
mono-clorado a un producto mono-hidroxilado,<br />
en donde X representa:<br />
hidroxilo;<br />
18<br />
(IId)
5<br />
10<br />
15<br />
20<br />
25<br />
30<br />
35<br />
40<br />
45<br />
50<br />
55<br />
60<br />
-OCH2CH(OH)CH2OH;<br />
-O(CH2CH2O)nR 3 ,<br />
donde n es un númeroenterode1a5,y<br />
ES 2 060 184 T3<br />
R 3 representa un átomo de hidrógeno o un grupo de alquilo de C1-C4;<br />
-NR 4 R 5 oN + R 4 R 5 R 8 ,<br />
donde cada uno de R 4 ,R 5 yR 8 representan independientemente un átomo de hidrógeno, un grupo<br />
de alquilo de C1-C4, -CH2CH2O(CH2CH2O)s R 3 , donde s representa un número de 1 a 5 cuando<br />
tomados juntos representan -(CH2)q donde q es un número entero de 2 a 5, o <strong>con</strong> el átomo de<br />
nitrógeno R 4 yR 5 forman un grupo morfolino;<br />
-O(CH2)pZ<br />
donde Z representa un grupo partiente, un grupo de ácido 2-aminoacético, -NR 4 R 5 o-N + R 4 R 5 R 8<br />
donde R 8 es como se ha definido para R 4 yR 5 antes, y p es un número entero de 1 a 5.<br />
13. El método de la reivindicación 12, que comprende adicionalmente la etapa de permitir que el<br />
producto reaccione <strong>con</strong> HY para efectuar disustitución, en donde Y representa, independientemente, los<br />
grupos como se ha definido para X antes,<br />
<strong>con</strong> la salvedad de que X e Y no representan ambos hidroxilo.<br />
14. El método de la reivindicación 12 o 13, caracterizado porque X y/o Y representan un grupo<br />
-O(CH2)pZ, donde p es un númeroenterode1a5yZrepresentaungrupopartiente,L,comprendiendo<br />
la etapa adicional de hacer reaccionar dicho producto mono- o di-sustituido por un compuesto HNR 4 R 5<br />
oNH 4 R 5 R 8 .<br />
15. El método de la reivindicación 12 o 13, que comprende la etapa adicional de sustituir dicho grupo<br />
XoYdelproducto<strong>con</strong>ungrupoXoYdiferente.<br />
16. Una formulación liposomal no hemolítica estable que comprende cualquiera de los compuestos de<br />
las reivindicaciones 1 a 4.<br />
17. Una formulación liposomal que comprende un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1<br />
a 4, junto <strong>con</strong> un agente terapéutico, cosmético o diagnóstico.<br />
18. La formulación de la reivindicación 17, en donde dicho agente es un farmaco u oxígeno.<br />
19. Una emulsión que comprende una fase oleosa, una fase acuosa y un tensoactivo, en donde dicho<br />
tensoactivo es un compuesto de <strong>con</strong>formidad <strong>con</strong> cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4.<br />
20. La emulsión de la reivindicación 19, en donde la fase oleosa comprende un <strong>fluor</strong>ocarbono.<br />
21. La emulsión de la reivindicación 20, en donde el <strong>fluor</strong>ocarbono está altamente <strong>fluor</strong>ado o per<strong>fluor</strong>ado<br />
y está presente en dicho emulsión a una <strong>con</strong>centración de 10% a 70% volumen/volumen.<br />
22. La emulsión de la reivindicación 21, en donde el compuesto altamente <strong>fluor</strong>ado o per<strong>fluor</strong>ado<br />
tiene una masa molecular de 400 a 700 y es un bis(F - alquil) - 1,2 - eteno, per<strong>fluor</strong>odecalin, per<strong>fluor</strong>o<br />
- metildecalin, per<strong>fluor</strong>odimetildecalin, per<strong>fluor</strong>omono - o dimetildamantano, per<strong>fluor</strong>o - trimetil - biciclo<br />
- [3.3.1]nonano o sus homólogos, un éter que tiene la fórmula (CF3) CFO(CF2CF2) OCF(CF3)2,<br />
(CF3)2CFO (CF2CF2)3OCF (CF3)2 (CF3)2CFO (CF2CF2)2F, (CF3)2CFO (CF2CF2)3F, F(CF(CF3)<br />
CF2O CHF-CF3, o(C6F13)2O, una amina que es N(C3F7)3, N(C4F9)3, una per<strong>fluor</strong>ometil - quinolidina<br />
o per<strong>fluor</strong>oisoquinolidina, o un derivado de halógeno C6F13Br, C8F17Br, C6F13CBr2CH2Br, 1 - bromoheptadeca<strong>fluor</strong>o<br />
- 4 - isopropilciclohexano o compuestos dehidrocarbono/<strong>fluor</strong>ocarbono <strong>con</strong> una masa<br />
molecular inferior, CnF2n+1CmN2m+1, CnF2n+1CmH2m−1, en donde la cadena hidrocarbúrica <strong>con</strong>tiene<br />
un doble enlace, n es un número entero entre 1 y 10 y m es un númeroenteroentre1y20oanálogos o<br />
sus mezclas.<br />
19
5<br />
10<br />
15<br />
20<br />
25<br />
30<br />
35<br />
40<br />
45<br />
50<br />
55<br />
60<br />
ES 2 060 184 T3<br />
23. La emulsión de la reivindicación 21, en donde dicho bis(F-alquil)-1,2-eteno es un bis(F-butil)-1,2eteno,<br />
un F-isopropil-1, un F-hexil-2-eteneo o un bis (F-hexil)-1,2 -eteno.<br />
24. Un compuesto que tiene la estructura general<br />
R 1 -CH2<br />
|<br />
(R 2 -CH)m O ;<br />
| <br />
CH2-O -P-Cl2<br />
R 1 -CH2<br />
|<br />
(R 2 -CH)m O ;<br />
| <br />
CH2-O -P-O(CH2)pL<br />
|<br />
Y<br />
o<br />
R 1 -CH2 O<br />
| <br />
CH-O-P-Cl2 ;<br />
|<br />
R 2 -CH2<br />
R 1 -CH2 O<br />
| <br />
CH-O-P-O(CH2)pL<br />
| |<br />
R 2 -CH2 Y<br />
en donde R 1 ,R 2 , Y, m y p tienen el mismo significado que en la reivindicación 1; y L es Z que tiene el<br />
mismo significado expuesto en la reivindicación 1 o un grupo partiente.<br />
NOTA INFORMATIVA: Conforme a la reserva del art. 167.2 del Convenio de Patentes Europeas (CPE)<br />
y a la Disposición Transitoria del RD 2424/1986, de 10 de octubre, relativo a la<br />
aplicación del Convenio de Patente Europea, las patentes europeas que designen a<br />
España y solicitadas antes del 7-10-1992, no producirán ningún efecto en España en<br />
la medida en que <strong>con</strong>fieran protección a productos químicos y farmacéuticos como<br />
tales.<br />
Esta información no prejuzga que la patente esté onoincluída en la mencionada<br />
reserva.<br />
20
ES 2 060 184 T3<br />
21
ES 2 060 184 T3<br />
22
ES 2 060 184 T3<br />
23
ES 2 060 184 T3<br />
24
ES 2 060 184 T3<br />
25