BProbeTec ET Legionella pneumophila (LP) Amplified DNA ... - BD

Nødvendige materialer, der ikke er vedlagt: Klasse II biologisk sikkerhedsskab (biological safety cabinet, BSC),
vortexmixer, -20 °C og/eller -70 °C (eller koldere) en ikke-selvafrimende fryser, mikrocentrifuge, der kan klare 16 000 x g,
vandbade, digitalt termometer, vandbadstativ med låg, der kan skrues på, andre hensigtsmæssige prøveglasstativer,
QIAGEN QIAamp DNA fæces minikits, 96 - 100 % ethanol, BBL CultureSwab EZ podepinde, BD ProbeTec ET 2 mL
Sample Tubes and Caps (prøveglas og hætter), engangshandsker, sprit-resistente penne, mikropipetter i stand til at
overføre volumener på 25 - 1000 µL, aerosol-resistente pipettespidser, destilleret vand, L pneumophila ATCC 33152
(Philadelphia-1), oksealbumin (Fraktion V) 0,2 % (vægt/vol) i 0,85 % (vægt/vol) saltvand, 1 % (vol/vol) natriumhypochlorit
med Alconox*
* Opløs 7,5 g Alconox med 1 L af en 1 % (vol/vol) natriumhypochloritopløsning og bland Klargør frisk blanding dagligt
Krav til opbevaring og håndtering: BD ProbeTec ET LP reagenspakker kan opbevares ved 2 - 33 °C De uåbnede
reagenspakker må ikke anvendes efter udløbsdatoen Så snart en pose er åbnet, er mikrobrøndene stabile i 12 uger,
hvis de genlukkes korrekt, eller indtil udløbsdatoen, alt efter hvad der kommer først Må ikke fryses
BD ProbeTec ET luftvejspræparat- og mediefortynder og kontrolkit (CF/LP/MP) kan opbevares ved 2 - 33 °C Reagenserne
må ikke anvendes efter udløbsdatoen Må ikke fryses
Advarsler og forholdsregler
Til in vitro diagnostik
1 Patogene mikroorganismer, herunder hepatitisvira og humant immundefekt virus, kan forekomme i kliniske
prøver "Standardforholdsregler" 4-7 og institutionelle retningslinier skal overholdes ved håndtering af alle
emner, der er kontamineret med blod og andre legemsvæsker
2 Håndtering og bearbejdning af præparater fra de nedre luftveje inden 70 °C inkubationstrinet bør udføres i et
Klasse II biologisk sikkerhedsskab (BSC)
3 Under 70 °C inkubationstrinet bruges en vandbadstativ med et låg, der kan skrues på, til at sørge for ekstra
inddæmning af potentielt biologisk farlige præparater fra de nedre luftveje
4 BD ProbeTec ET luftvejspræparat- og mediefortynder og kontrolkit indeholder dimethylsulfoxid (DMSO)
DMSO er skadelig ved indånding, ved hudkontakt eller ved indtagelse Undgå kontakt med hud og øjne og bær
altid handsker ved håndtering Kommer stof i øjnene, skylles straks grundigt med vand og læge kontaktes
Kommer stoffet på huden, vaskes straks med store mængder vand
5 Se QIAamp DNA fæces minikit håndbogen for sikkerhedsoplysninger om QIAGEN reagenser, der anvendes i
denne procedure QIAGEN reagenser må ikke bortskaffes i blegeopløsninger QIAGEN reagenser må ikke
udsættes for blegeopløsninger
6 Der har været rapporter, der antyder, at QIAGEN DNA ekstraktionskits ikke er egnet til Legionella PCR
(Polymerase Chain Reaction, polymerasekædereaktion), på grund af muligheden for, at reagenserne bliver
forurenet med Legionella DNA8,9 Selvom sandsynligheden for dette er ringe, og andre Legionella arter ud over
L pneumophila blev identificeret i disse undersøgelser, bør brugeren verificere funktionen af hvert nyt lot af
QIAGEN reagenser inden brug med patientpræparater
7 Selv om specielle arbejdsområder ikke kræves, fordi BD ProbeTec ET designet nedsætter muligheden for
kontaminering med forstærket DNA-fragment i testmiljøet, er andre forholdsregler til kontrol af
kontaminering nødvendige, især for at undgå kontaminering af præparater under bearbejdning
8 Reagensposer indeholdende ubrugte primermikrobrønde og amplifikationsmikrobrønde SKAL lukkes
omhyggeligt igen efter åbning Bekræft, at der findes et tørremiddel, inden reagensposerne lukkes
9 Pladen indeholdende amplifikationsmikrobrønde SKAL være korrekt lukket med amplifikationsforsegleren,
inden pladen flyttes fra BD ProbeTec ET primer- og opvarmerapparat til BD ProbeTec ET instrumentet
Forsegling sikrer en lukket reaktion til amplifikation og påvisning og er nødvendig for at undgå kontaminering
med amplifikationsprodukter af instrumentet og arbejdsområdet Forseglingsmaterialet må ikke på noget
tidspunkt fjernes fra mikrobrønde
10 Primermikrobrønde med residualvæske (efter overførsel af væske fra primermikrobrønde til amplifikationsmikrobrønde)
udgør en kilde til kontaminering af fokus Forsegl omhyggeligt primermikrobrønde med en pladeforsegler inden
bortskaffelse
11 For at forhindre kontaminering af arbejdsmiljøet med amplifikationsprodukter bruges engangsposerne, der
følger med reagenspakkerne, til at kassere testede amplifikationsmikrobrønde Sørg for, at poserne er korrekt
lukket inden bortskaffelse
12 SKIFT HANDSKER ved specificerede trin under bearbejdning af prøver og analyseproceduren for at undgå
krydskontaminering af præparater Hvis handsker får kontakt med præparater, skiftes handskerne straks for at
undgå at kontaminere andre præparater
13 I tilfælde af, at arbejdsområdet eller udstyret kontamineres med prøver eller kontroller, rengøres det
kontaminerede område grundigt med 1 % (vol/vol) natriumhypochlorit med Alconox, og der skylles grundigt
med vand Lad overfladen tørre fuldstændigt, inden De fortsætter med yderligere testning Inden eventuel
QIAGEN prøvebearbejdningsreagenser tørres op, aftørres de pågældende områder med vand inden den 1 %
(vol/vol) natriumhypochlorit opløsning med Alconox bruges
14 Brug kun BD ProbeTec ET pipettor og BD ProbeTec ET pipettespidser til overførsel af bearbejdede prøver til
primermikrobrønde og overførsel af prøver fra primermikrobrøndene til amplifikationsmikrobrøndene
15 Anvend fastlagt laboratoriepraksis ved bortskaffelse af brugte pipettespidser, prøveglas, primermikrobrønde
og andre engangsartikler Bortskaf engangsartikler omhyggeligt Forsegl og kassér affaldsbeholdere, når de er
¾ fyldte eller dagligt (alt efter hvad der kommer først)
16 Mikrobrønde, kontroller eller bearbejdningsreagenser fra kits med forskellige lotnumre må ikke ombyttes eller
blandes
17 Kontakt Teknisk service i tilfælde af en usædvanlig situation, som for eksempel, hvis der spildes ned i BD ProbeTec
ET instrumentet, eller kontaminering med DNA, som ikke kan fjernes ved hjælp af rengøring
OPSAMLING OG TRANSPORT AF PRØVE
1 Prøveopsamling
Præparater skal opsamles som anbefalet i Clinical Microbiology Procedures Handbook10 (håndbogen om
kliniske mikrobiologiprocedurer) eller Deres laboratoriemanual
2