BProbeTec ET Legionella pneumophila (LP) Amplified DNA ... - BD

More documents

Recommendations

Info

PAT Score LP fokus IAC fokus Resultat Tolkning Rapport > 0 > eller = 0 Positiv L pneumophila DNA påvist ved SDA = 0 > 0 Negativ L pneumophila DNA ikke påvist ved SDA a Gentag BD ProbeTec ET LP analysen fra det bearbejdede prøveglas Hvis der ikke er tilstrækkelig volumen tilbage fra den bearbejdede prøve, gentages fra det oprindelige præparat Hvis resultatet fra gentagelsen er positivt eller negativ, tolkes som beskrevet ovenfor Hvis resultatet gentager som inkonklusivt, bør der anmodes om et nyt præparat Bestemmelse af LP og IAC tærskel: Tærskelværdierne for L pneumophila fokus-DNA og IAC blev initialt fastlagt ved hjælp af Receiver Operator Characteristic kurveanalyse af data opnået fra positive og negative kontroller Disse tærskelværdier blev verificeret i kliniske undersøgelser og med retrospektive L pneumophila-positive og -negative præparater fra de nedre luftveje Tærskelværdierne blev dernæst valideret i yderligere kliniske undersøgelser PROCEDURENS BEGRÆNSNINGER 1 BD ProbeTec ET LP analysen er kun specifik for L pneumophila serogrupperne 1-14 Andre L pneumophila serogrupper er ikke blevet testet 2 BD ProbeTec ET LP analysen påviser ikke infektioner forårsaget af andre Legionella arter 3 Funktionsdata for BD ProbeTec ET LP analysen er kun blevet fastlagt med ekspektoratpræparater Ydelse med andre præparattyper er ikke blevet bestemt 4 BD ProbeTec ET LP analysen er kun evalueret med patienter på 13 år og ældre 5 Som det er tilfældet med mange diagnostiske tests, bør resultater fra BD ProbeTec ET LP analysen tolkes sammen med andre laboratorie- og kliniske data, som er til rådighed for lægen 6 Et negativt testresultat udelukker ikke muligheden for infektion, fordi testresultater kan være påvirket af ukorrekt opsamling af præparatet, teknisk fejl, sammenblanding af præparater, samtidig antibiotikabehandling eller tilstedeværelsen af en mængde L pneumophila DNA i præparatet, som ligger under testens analytiske sensitivitet 7 BD ProbeTec ET LP analysen kan ikke bruges til at vurdere terapeutisk succes eller fiasko, da nukleinsyrer fra L pneumophila kan persistere efter behandling med antibiotika 8 BD ProbeTec ET LP analysen er ikke blevet evalueret med miljøprøver (fx drikkevand eller 9 vandkvalitetstestning) Optimal ydelse af denne analyse kræver adækvat præparatopsamling og -håndtering 10 Brug af BD ProbeTec ET LP analysen begrænses til personale, som er blevet uddannet i analyseproceduren og BD ProbeTec ET systemet 11 BD ProbeTec ET LP analysen giver kvalitative resultater Der kan ikke bestemmes en sammenhæng mellem størrelsen af PAT scoren og mængden af L pneumophila DNA i en prøve FORVENTEDE RESULTATER A Prævalens Hastigheden af positiviteten, der kan observeres i L pneumophila testning, vil variere afhængigt af prøvetagningsmetoden, patientens alder, tilstedeværelse af underliggende risikofaktorer, geografisk beliggenhed, og vigtigst af alt, den lokale sygdomsprævalens, herunder mulige udbrudssituationer B Fordeling af PAT score hyppighed Der blev opsamlet i alt 83 retrospektive ekspektoratpræparater fra fire kliniske steder i USA, Europa og Canada og testet med BD ProbeTec ET LP analysen En fordeling af hyppigheden af LP PAT scores sammenlignet med dyrkning vises i Figur 1 8 Positiv for organismer tilhørende L pneumophila serogrupperne 1-14, antydende aktuel infektion Yderligere testning nødvendig for at identificere serogrupperne, hvis dette er påkrævet af epidemiologiske årsager Formodet negativ for L pneumophila serogrupperne 1 - 14 i et præparat fra de nedre luftveje, antydende ingen nylig eller aktuel infektion Infektion pga Legionella kan ikke udelukkes, fordi: 1) serogrupper ud over 1 - 14 og andre Legionella arter kan forårsage sygdom og, 2) niveauet af tilstedeværende DNA kan være under påvisningsgrænsen for testen = 0 = 0 Inkonklusiv Amplifikationskontrol inhiberet Yderligere testning nødvendig for tolkning af resultat a
Hyppighed 60 50 40 30 20 10 0 Figur 1: Fordeling af hyppighed af LP PAT score sammenlignet med dyrkning 52 Dyrkningsresultat 0 1 – 19 20 – 39 40 – 60 I alt Negativ Positiv 2 (-) (+) 0 0 4 2 4 0 1 - 19 20 - 39 40 - 60 LP PAT score 52 0 4 4 2 0 2 19 I alt 54 0 6 23 83 C Kontroller Under den kliniske evaluering blev kontrolfejl iagttaget i en ud af 46 kørsler for BD ProbeTec ET LP analysen (dvs en kørsel havde en procedurerelateret fejl) LP PAT scores for de resterende 45 kørsler er sammenfattet i Tabel 1 Tabel 1: Fordeling af LP PAT score for kontroller fra luftvejsprøver og medier Kontrol N Område 5 percentil Middel Median 95 percentil LP Negativ 45 0 – 0 0 0 0 0 LP Positiv 45 29,4 – 50,7 40,1 46,7 47,6 49,7 FUNKTIONSDATA Prospektiv undersøgelse BD ProbeTec ET LP analysen blev evalueret prospektivt ved syv kliniske centre i USA og Canada i 2002 - 2003 sæsonen for luftvejslidelser Et ekspektoratpræparat og en urinprøve blev opsamlet fra hver patient Ekspektoratpræparaterne blev testet ved hjælp af BD ProbeTec ET LP analysen, Legionella dyrkning og en Direkte Fluorescens Antistof (Direct Fluorescent Antibody, DFA) analyse Urinprøverne blev testet ved hjælp af en kommercielt tilgængelig L pneumophila urin antigen analyse I alt 118 patienter opfyldte kriterierne for inklusion i undersøgelsen (dvs radiologisk tegn på pneumoni, patienter på ≥ 13 år, på antibiotika ≤ 14 dage, valide præparattyper opsamlet, relevante referencemetoder udført osv) Af de 118 patienter var der 114 valide resultater med BD ProbeTec ET LP analysen Resultater for ekspektoratpræparaterne blev sammenlignet med resultatet fra ekspektoratdyrkningen for at give et estimat af funktionsdata Et præparat blev betragtet som positivt, hvis dyrkningsresultatet var positivt Et resultat blev betragtet som negativt, hvis dyrkningsresultatet var negativt Alle initialt inkonklusive resultater skulle gentages med det bearbejdede præparat eller med det oprindelige præparat (hvis der ikke var tilstrækkeligt bearbejdet præparat til rådighed) Præparater, som gav et initialt og et gentaget (dvs endeligt) inkonklusivt resultat, blev ikke inkluderet i funktionsdataene Et præparat, som gav et initialt inkonklusivt resultat og ved gentagelse gav et positivt eller negativt resultat, blev inkluderet i funktionsdataene Et præparat, som gav et initialt inkonklusivt resultat, og som ikke kunne gentages på grund af en utilstrækkelig præparatmængde, gav fortsat et "initialt inkonklusivt" resultat og blev ikke inkluderet i funktionsdataene BD ProbeTec ET LP analysens resultater for ekspektoratpræparaterne sammenlignet med resultater fra dyrkning er sammenfattet i Tabel 2 9 19 60 23 Dyrkning - Dyrkning +
Page 1 and 2: BProbeTec ET Legionella pneumophila
Page 3 and 4: 2 Prøveopbevaring og -transport
Page 5 and 6: 33 Mærk et 2 mL glas med skruehæt
Page 7: Præparatbearbejdningskontroller Pr
Page 11 and 12: BEMÆRK: PCR metoden anvendt til at
Page 13 and 14: 6 US Department of Health and Human

BProbeTec ET Legionella pneumophila (LP) Amplified DNA ... - BD

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?