2 Material und Methoden

Material und Methoden
SDS-Probenpuffer (2fach):
Sammelgelpuffer für SDS-PAGE (4fach):
Trenngelpuffer für SDS-PAGE (4fach):
Färbelösung für Proteingele:
Entfärber für Proteingele:
Trocknungslösung für Proteingele:
Western-Blotting-Puffer für Proteinsequenzierung:
124 mM Tris, 100 mM DTT; 20 % (w/v)
Glycerol; 2 % (w/v) SDS, 0,.2 % (w/v)
Bromphenolblau
500 mM Tris-HCl, pH 6,8; 0,4 % (w/v) SDS
3 M Tris-HCl, pH 8,85; 0,4 % (w/v) SDS
40 % (v/v) Methanol; 10 % (v/v) Eisessig;
0,1 % (w/v) Coomassie R250
40 % (v/v) Methanol; 10 % (v/v) Eisessig
10 % (v/v) Methanol; 3 % (v/v) Glycerol
50 mM Na-Borat, pH 9,0; 20 % (v/v) Methanol
2.1.12 Geräte
Absorptionsspektrophotometer:
• DU-7400 Beckmann Coulter (Fullerton, CA, USA)
Chromatographieeinheiten:
• ÄKTA Explorer mit UV-Detektor UV-900, Fraktionskollektor Frac-900, Pumpe P-900, pH und
Leitfähigkeitsmonitor pH/C-900, Auswertungssoftware Unicorn Version 3.10.11 von Amersham
Pharmacia Biotech, Uppsala, Schweden.
• HiLoad mit UV-Monitor UV-MII, Fraktionekollektor Super Frac, Schreiber Rec 102,
Programmer GP-250 Plus, Pumpe P-50, Conductivity Monitor von Amersham Pharmacia Biotech,
Uppsala, Schweden.
• P-1 Pumpe von Amersham Pharmacia Biotech, Uppsal, Schweden.
• Beckmann Gold HPLC-system mit Software „Gold“ V 8.10, Pumpe 125 NM, Autosampler 507
und Detektor 168 von Beckman Coulter, Fulerton, CA, USA.
DNA-Sequenzierer:
• 4000 mit Steuer- und Auswertungssoftware BaseImaqIR V.4 von Li-Cor, Lincoln, NE, USA.
Kryostaten:
• Wasserbad C25 und Thermostat F6 von Haake, Karlsruhe.
Pipetten
• Research 10, 20, 200, 1000 µl von Eppendorf, Hamburg.
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