Toxizitätsmessungen von Medikamenten mit Vibrio fischeri - Sursee

Schmerzmittelwirkung auf Vibrio fischeri
2.2.2 Leuchtbakterientest
Das Luminometer LUMITESTER PD-10N ist ein Gerät, welches zur Messung der Lichtintensität
von V. fischeri dient. Damit der Luminometer die Leuchtstärke messen kann, muss die
Küvette mit 1 ml Flüssigkeit gefüllt sein. Zur Messung werden die Bakterien mit einer 2%iger
wässriger NaCl-Lösung 1:1 verdünnt.
Die Messung erfolgte bei Raumtemperatur (20°C). Die Reagenzien aus dem Kühlschrank
mussten zuerst aufgewärmen werden, da die Temperatur das Leuchten beeinflusst.
Abb. 9: Das Pipettieren der Kochsalzlösung,
Wirkstoffkonzentration und kurz
vor der Messung wurden die Leuchtbakterien
V. fischeri hinzugegeben
Abb. 10: Küvette wird in den LUMI-
TESTER PD-10N mit Applikator gesteckt
Als Erstes wurden die verschiedenen Wirkstoff-Konzentrationen in die 7 Küvetten mit der
NaCl-Lösung pipettiert (Testsubstanzen mussten zusammen 500 µl ergeben) und nur kurz vor
der Messung 500 µl V. fischeri hinzugegeben. Das ist eine Empfehlung des Herstellers (Dr.
Lange, vgl. Anhang), denn die Werte verändern sich innerhalb von wenigen Minuten wesentlich
stärker.
Pro Küvette wurden fünf Werte gemessen. Dabei wird die Küvette im Luminometer belassen,
und nach Ende der vorherigen Messung, im Zeitraum von ungefähr 20 Sekunden, nochmal
gemessen. Dank den fünf Messungen können statische Ausreisser ausgeschlossen werden.
Die Küvetten wurden nach ihrem Einsatz mit destilliertem Wasser gespült und nach dem
Trocknen wiederverwendet. Der Inhalt wurde dabei in den Ausguss geleert, da die Wirkstoffe
nur in geringen Konzentrationen verwendet wurden. V. fischeri gilt laut Hersteller als „ungefährlich
und als Bakterien ohne Risiko“.
Bei der Messung mit dem LUMITESTER PD-10N sind die Kommastellen
zu beachten. Die Zahlen, die vom Display anzeigt werden,
sind keine Kommastellen, sondern 1000er Stellen.
z.B. 20.934 = 20934
Abb. 11: LUMITESTER PD-
10N mit einer Messzahl (RLU)
Céline Ghidoni Seite 8