Toxizitätsmessungen von Medikamenten mit Vibrio fischeri - Sursee

Schmerzmittelwirkung auf Vibrio fischeri
2.2 Methode
2.2.1 Anfertigung der Stammlösungen
Ein paar Tage vor den Versuchstagen wurden die sechs Stammlösungen der Wirkstoffe (Acetylsalicylsäure,
Paracetamol, Ibuprofen, Diclofenac, Coffein und Ascorbinsäure) hergestellt.
Es wurde eine 2%ige-NaCl-Lösung (200 ml) angefertigt, die bei den Tests zugeführt werden.
So wird sichergestellt, dass eine Abnahme des Leuchtens wirklich an der Substanz liegt und
nicht durch andere Faktoren entsteht.
Um die gewollte Konzentration von 10mg/ml des jeweiligen Wirkstoffs mit der 2%-
Kochsalzlösung zu erreichen, wurde zuerst 500µg Wirkstoff genau auf einer Analysewaage
abgemessen. Anschliessend wurde dieser mit 40 ml destilliertem Wasser gemischt und in die
beschrifteten 50 ml Falcon-Röhrchen abgefüllt. Für die Einstellung des pH-Werts bleibt 10 ml
noch Platz, da es anschliessend mit Natronlauge und destilliertem Wasser auf die 50ml aufgefüllt
wird.
Der pH-Wert wurde mithilfe von pH-Indikatorenstäbchen gemessen und zwischen pH 6.5 und
7.5 standardisiert, da saure Lösungen auf das Leuchten von V. fischeri einwirken.
Aufgefallen ist, dass die Acetylsalicylsäure-Lösung sehr sauer war und 1.8 ml NaOH zugegeben
werden musste.
Darauf wurde jede Lösung in einem geeichten Messkolben mit dest. Wasser exakt auf 50 ml
pipettiert.
Damit die Salzkonzentration das Leuchten der Bakterien nicht beeinflusst, wurden die
Stammlösungen mit 1.0 g NaCl aufgesalzen. Die Aufsalzung ahmt den V. fischeri-
Lebensraum nach. Weil Acetylsalicylsäure und Diclofenac sich schlecht in der Kochsalzlösung
lösten, wurden diese gevortext. Die Diclofenac-Lösung reagierte unerwartet stark auf
das zusätzliche Gramm Salz, es wurde trüb und begann zu schäumen. Dieses Verhalten lässt
sich aufgrund der schlechten Löslichkeit des Diclofenac im Wasser (2.37 mg/l bei 25°C) erklären.
Bei Diclofenac musste deshalb auf eine Aufsalzung verzichtet werden. Die fertigen
Lösungen wurden in den Kühlschrank gestellt.
Abb. 5: Wirkstoffe in der 2%-NaCl-
Lösung gelöst und aufgesalzen, in Falconröhrchen,
Konzentration 10mg/ml
Céline Ghidoni Seite 6