Biochemie Praktikum I

Praktikumsskript Biochemie für Biologen-Bachelor SS2011
Michaelis-Menten-Kinetik
A V =
∆t
⋅
ε ⋅ d ⋅ V P
Achtung: Hier keine Verdünnung des Enzyms einberechnen, da für diesen Versuch die
Aktivität in der Küvette relevant ist!
Graphische Ermittlung von v max und K M :
1. v in U/ml gegen Substratkonzentration C S in µmol/l auftragen
2. Auftragung nach Lineweaver-Burk: d.h. 1/v gegen 1/C S
K M = _________
v max = ___________
3. Ermittlung der katalytischen Konstante
v max in Küvette (in U/ml=µmol/ml*min)
K 2 = K cat = __________________________________________
Enzymkonzentration in Testküvette (µmol/ml)
Molekulargewicht der LDH = 130 000 g / mol
K cat
= _________
Achtung: Überlegt Euch, ob sich alle Werte auf das gleiche Volumen beziehen!
Die Auswertung findet im Praktikum statt. Die Michaelis-Menten - und Lineweaver-
Burk –Diagramme werden den Assistenten vorgelegt.
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