Elektrophorese - eine Einführung - Mtaschule-os.de
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Streifen <strong>eine</strong>r Cellul<strong>os</strong>e-Azetat-<br />
Folie (weiß, man sieht hier nichts!)<br />
Elektronenmikr<strong>os</strong>kopische Detail-<br />
Aufnahme<br />
Die Abbildung zeigt das grobe<br />
Geflecht <strong>de</strong>r Zellul<strong>os</strong>e und die relativ<br />
großen Zwischenräume. Diese sind<br />
weit größer als die Prot<strong>eine</strong> und<br />
lassen diese daher praktisch<br />
ungehin<strong>de</strong>rt durchwan<strong>de</strong>rn.<br />
Durchführung <strong>de</strong>r CA-<strong>Elektrophorese</strong><br />
• Ein Puffer-getränkter Zellul<strong>os</strong>e-Azetat-Träger wird so in <strong>de</strong>n <strong>Elektrophorese</strong>-<br />
Apparat eingelegt, dass bei<strong>de</strong> En<strong>de</strong>n <strong>de</strong>r Folie in <strong>de</strong>n Puffer eintauchen.<br />
• Die Probe wird mit <strong>eine</strong>m Auftragsstempel auf die Folie aufgetragen.<br />
Allerdings nicht in <strong>de</strong>r Mitte <strong>de</strong>r Folie son<strong>de</strong>rn versetzt Richtung Minus-Pol (Katho<strong>de</strong>), weil<br />
die Prot<strong>eine</strong> ja in Richtung Plus-Pol (Ano<strong>de</strong>) wan<strong>de</strong>rn wer<strong>de</strong>n.<br />
• Die bei<strong>de</strong>n Pole (Katho<strong>de</strong> und Ano<strong>de</strong>) <strong>de</strong>s <strong>Elektrophorese</strong>-Apparates tauchen<br />
ebenfalls in <strong>de</strong>n Puffer ein.<br />
• Der <strong>Elektrophorese</strong>-Apparat wird dann an das Netzgerät (d.h. <strong>de</strong>n Strom)<br />
angeschl<strong>os</strong>sen.<br />
Typische Trennungsbedingungen (können von Gerät zu Gerät variieren):<br />
Die Auftrennung <strong>de</strong>r Prot<strong>eine</strong> erfolgt bei <strong>eine</strong>r konstanten Spannung von 200 - 250 V. Die<br />
Laufzeit beträgt ca. 20 Minuten. Die Pufferlösung hat <strong>eine</strong>n pH-Wert von 8.2 bis 8.6, ist also im<br />
alkalischen Bereich.