Elektrophorese - eine EinfÃ¼hrung - Mtaschule-os.de

Weitere Magazine

Empfehlungen

Info

Färbung der Proteine Nach der Auftrennung wird die Cellulose-Azetat-Folie aus dem Elektrophorese-Apparat genommen und mit einem Proteinfarbstoff (z.b. Ponceau-Rot) gefärbt. Danach wird der nicht an Protein gebundene, überschüssige Farbstoff in sog. Entfärbebädern ausgewaschen. Jetzt zeigt sich die unterschiedliche Anfärbung der einzelnen, aufgetrennten Proteine. Man erkennt verschiedene Proteingruppen. So sieht eine gefärbte Serumeiweiß- Elektrophorese auf Cellulose- Azetat aus. Rechts die Proteine, die am schnellsten und daher am weitesten gewandert sind. Für die weitere Besprechung drehen wir die Folie um. Dies hat einen einzigen Grund: diese Darstellung hat sich eingebürgert. Auf den ersten Blick erkennt man verschiedene Gruppen von Proteinen, man spricht auch von Protein-Fraktionen. Abtrennung der wichtigsten Protein-Fraktionen Die größte Fraktion (links) ist das Albumin. Den anderen, die zur Proteingruppe der Globuline gehören, gab man der Reihenfolge nach griechische Buchstaben. Man spricht daher vom Alpha-1-Globulin, Alpha-2-Globulin, Beta-Globulin und Gamma-Globulin.
Bestimmung des Anteils der einzelnen Fraktionen Da die Vermehrung oder Verminderung der einzelnen Fraktionen von medizinischer Bedeutung sein kann, ist es notwendig, den Anteil der einzelnen Fraktionen zu bestimmen, das heißt, die einzelnen Fraktionen zu quantifizieren. Dazu gibt es verschiedene Verfahren. Meist wird die Folie, nachdem sie durch spezielle Chemikalien transparent (durchsichtig) gemacht wurde, in einer Art Photometer abgetastet. Dadurch entsteht aus der verschieden stark gefärbten Folie eine Kurve. Mit Computern ist es dann kein Problem, die Fläche unter der Kurve für die einzelnen Fraktionen zu berechnen und damit ihren Anteil zu bestimmen. Die Elektrophoresekurve Durch Abtasten der transparent gemachten Folie in einem Photometer oder einem Scanner entsteht aus den Unterschieden der Färbeintensität in der Folie eine Kurve - die Elektrophoresekurve. Früher wurde die Fläche unter der Kurve mit Millimeterpapier bestimmt, heute übernehmen das Computer. Die Ergebnisse werden zuerst einmal als Anteil am Gesamtprotein angegeben. Beta-Globulin 10 % hieße z.B., dass die Beta-Globulin Fraktion 10 % des Gesamtproteins ausmacht. Kennt man die Konzentration des Gesamtproteins im Blut (z.B. 60 g/l) kann man auch die absolute Konzentration der Beta-Globulin- Fraktion berechnen (das ergäbe 6 g/l) Viele Proteine bilden eine Fraktion Wie bei der Prinzipdarstellung schon kurz erwähnt, muss man sich bewusst sein, dass die Fraktionen keine einzelnen Proteine sind, sondern dass in einer Gruppe viele verschiedene Proteine enthalten sind. Anfangs wusste man nicht, welche Proteine sich in einer Fraktion befinden, ja man kannte diese Proteine zum Teil noch gar nicht. Heute kennt man die wichtigsten Proteine, die die einzelnen Fraktionen bilden. Welche Eiweißstoffe befinden sich in den einzelnen Fraktionen Im Serum findet sich eine enorme Zahl zu gutem Teil noch unbekannter Proteine, sodass in jeder Fraktion der Elektrophorese hunderte, ja vielleicht tausende Eiweißstoffe enthalten sind. Die meisten liegen aber in so geringer Konzentration vor, dass sie zum Entstehen der Elektrophoresekurve praktisch nichts beitragen. Die Hauptbestandteile der jeweiligen Fraktionen kennt man heute und viele dieser Proteine tragen in ihrem Namen den Buchstaben derjenigen Fraktion, in der man sie gefunden hat.
Seite 1 und 2: Elektrophorese - eine Einführung Z
Seite 3 und 4: Die Ladung Stoffe mit größerer ne
Seite 5 und 6: Der pH der Lösung muss im alkalisc
Seite 7: Streifen einer Cellulose-Azetat- Fo
Seite 11 und 12: Agarose-Gel Das durchsichtige und d
Seite 13 und 14: entsteht dann eine Elektrophoreseku
Seite 15 und 16: Dies passiert auch in der Realität
Seite 17 und 18: Auch dies ist für die Protein-Elek
Seite 19 und 20: Akute Entzündung Die Alpha-1- und
Seite 21: Beta-Gamma-Typ Vom Beta-Gamma-Typ s

Elektrophorese - eine EinfÃ¼hrung - Mtaschule-os.de

Sie wollen auch ein ePaper? Erhöhen Sie die Reichweite Ihrer Titel.

Template löschen?

Als Template speichern?