1 1. Leuchtbakterientest nach DIN 38412 Prinzip: Bestimmung der ...

Studiengang Ingenieurökologie Praktikum Umweltbiotechnologie Dr. Uta Langheinrich
10. Wirksamkeit verschiedener Desinfektionsmittel
Grundlagen:
Desinfektion bedeutet, daß Mikroorganismen auf / in totem oder lebendem Material
durch Behandlung mit keimvermindernden oder keimtötenden chemische Substanzen
in einen Zustand versetzt werden, in dem sie nicht mehr infizieren können. Die Beseitigung
aller pathogenen Mikroorganismen muß gewährleistet sein. Zur Desinfektion werden
geeignete chemische Substanzen eingesetzt. Die Wirkungsweise beruht auf:
− Oxidationsvorgängen innerhalb der Zelle ( z.B. durch Halogene, H2O2, Ozon),
− auf Zerstörung der Cytoplasmamembran ( Phenole, Alkohole, oberflächenaktive
Substanzen),
− oder auf Strukturveränderungen von Proteinen (Schwermetalle, Aldehyde)
Mittels Agar - Diffusionstest (Lochplattentest) kann die Wirkung von verschiedenen Desinfektionsmitteln
auf unterschiedliche Stämme getestet werden.
Material:
verschiedene Desinfektionsmittel (gebrauchsfertig) z.B. :1. Lyso AM - Flächendesinfektionsmittel
für Fußböden, 2. Lyso Rapid - Arbeitsflächen- und Gerätedesinfektion,
3. Mentex HD -Händedesinfektionsmittel, 4. 70 % - Ethanol – Arbeitsflächenreinigung,
5. Sprühdesinfektionsmittel für Laminarboxen, 6. Spülmittel-Lösung
sterile Pipetten, Spatel, Korkbohrer
3 Platten DEV - Nähragar
Übernachtkulturen von Bac. subtilis, E. coli, Micrococcus oder Stämme A, B, C in Flüssigkultur
Durchführung:
1. je eine Platte mit 0,1 ml Testorganismus beimpfen und mit Drigalsky - Spatel sorgfältig
ausplattieren
2. die Platten gut trocknen lassen
3. die Platten in 6 Sektoren teilen und in jeden mittels ausgeglühten Korkbohrer ein
Loch stanzen, Agar mittels Impfnadel aus den gestanzten Löchern heben
4. 0,1 ml eines Desinfektionsmittels in die Löcher pipettieren, vorher beschriften
5. die Proben werden 24 h bei 36 °C bebrütet
Auswertung:
Messen Sie den Hemmhofdurchmesser und stellen Sie in tabellarischer Form zusammen,
welches Desinfektionsmittel bei welchem Stamm Wirkung zeigt. ( - ... keine Wirkung,
+ ... schwache Wirkung, ++ ...gering gehemmtes Wachstum, +++ ... vollständig
gehemmtes Wachstum, 0 ... kein eindeutiges Ergebnis)
Desinfektionsmittel Stamm 1 Stamm 2 Stamm 3
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Dicke des Hemmhofes
s
0 mm: keine Wirkung
0-1 mm: schwache Wirkung
1-4 mm: mäßige Wirkung
>4 mm: starke Wirkung
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