1 1. Leuchtbakterientest nach DIN 38412 Prinzip: Bestimmung der ...

Studiengang Ingenieurökologie Praktikum Umweltbiotechnologie Dr. Uta Langheinrich
5.1.2. Ermittlung der Intensität der Cellulosezersetzung im Laborversuch
Prinzip:
Auf die Bodenprobe wird steriles Filterpapier gedrückt. Der Besiedelungsgrad durch
Bakterien oder Pilze und der Zersetzungsgrad der Cellulose sind zu ermitteln.
Geräte und Chemikalien:
2 sterile Petrischalen
Filterpapier in Streifen 1 cm x 5 cm
Objektträger, steriler Spatel, Pinzette
steriles Wasser
Lupe oder Stereomikroskop
Ausführung:
Eine etwa 6 mm hohe Schicht Feinerde wird in der Petrischale ausgebreitet, mit sterilem
Wasser angefeuchtet und mit einem Objektträger oder Spatel eingeebnet. Auf die
Oberfläche drückt man 3 Streifen Filterpapier.
Die Bebrütung erfolgt bei Zimmertemperatur im Dunklen.
Auswertung:
Nach 1 und 2 Wochen wird die Streifenoberfläche beobachtet und die Anteile der mit
Bakterien, Aktinomyceten und Pilzen bewachsenen Fläche (bzw. die Abbaurate) ermittelt.
Als Hilfsmittel zur Abschätzung der Flächenanteile kann eine Schablone verwendet
werden, die über dem Papierstreifen auf den Deckel gelegt wird.
5.2. Nachweis der Antibiotikabildung von Aktinomyceten
Die in Aufgabe 3.2. isolierten MO werden auf ihre antibiotische Wirkung hin an den
Stämmen A,B und C aus Versuch 3.1. getestet.
Material:
Impfösen,
DEV-Nähragar : 2 Platten, Doppelbestimmung
Stämme A, B, C
Durchführung:
Wählen Sie aus den Platten „Aktinomycet-Verdächtiger“ die am besten gewachsene
aus und kontrollieren mittels mikroskopischem Präparat, ob es sich um Aktinomyceten
handelt (Hyphenbildung).
Die Agarplatten werden mit je 3 Teststämmen und dem Aktinomyceten beimpft.
Dazu wird von einer Reinkultur ein Teil strichartig auf eine Platte aufgetragen. Parallel
dazu werden die beiden anderen Reinkulturen aufgetragen.
Dann wird senkrecht dazu ein Teil Aktinomycet aufgestrichen.
Auswertung:
Es wird beobachtet, auf welchen Testorganismus eine Hemmwirkung zu beobachten
ist.
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