Telomere und Telomerase – ihre Bedeutung als prognostischer ...

MATERIAL und METHODEN 39
um 5 Mädchen und 15 Jungen mit einem Durchschnittsalter (zum Zeitpunkt der
Probenentnahme) von 8,8 Jahren.
2.1.4.2.2. Kontrollproben
Frau PD Dr. E. Koscielniak (Olgahospital, Stuttgart) überließ uns bereits isolierte
DNA-Proben, die aus Leukozyten von EDTA (Ethylendiamintetraessigsäure) -
behandelten Vollblutproben von 19 Kindern und Jugendlichen ohne WTS im Alter
von 3 bis 17 Jahren stammten.
Als Kontrollen für die T-ALL-Proben stellte uns Herr PD Dr. J. Greil Zellpellets von
Phytohämagglutinin (PHA) stimulierten und nicht stimulierten mononukleären Zellen
des peripheren Blutes (PBMC) von drei gesunden, jungen, erwachsenen Spendern
zur Verfügung.
2.1.4.2.3. Gewebeproben von Patienten mit chronisch entzündlichen Darmerkrankungen
Die Kolonbiopsien wurden vom Robert Bosch Krankenhaus, Stuttgart, vom
Krankenhaus Bietigheim, Bietigheim-Bissingen, Krankenhaus Bad Cannstatt,
Stuttgart, und von der gastro-onkologischen Praxis Dr. E. Höring, Stuttgart, zur
Verfügung gestellt. Die Proben wurden bei endoskopischen Untersuchungen mit
Hilfe von kleinen Biopsie-Zangen entnommen. Die insgesamt 114 untersuchten
Biopsien stammten von 42 verschiedenen Patienten mit einem Durchschnittsalter
von 44 Jahren. Handelte es sich um Patienten mit chronisch entzündlicher
Darmerkrankung, wurden bis zu 5 Biopsieproben entlang des Kolons entnommen.
Dabei wurden sowohl Proben aus gesunder, normaler Schleimhaut als auch aus
entzündeten Kolonbereichen genommen. Der Entnahmeort der Biopsien wurde mit
Hilfe eines Dokumentationsbogens angegeben. Die Gewebeproben der
Kontrollgruppe stammten von Patienten, die aufgrund unspezifischer intestinaler
Beschwerden einer Koloskopie unterzogen wurden. Alle Gewebeproben wurden
nach der Entnahme sofort in flüssigem Stickstoff eingefroren und anschließend bei
-80°C gelagert. Eine entsprechende weitere Probe wurde jeweils in Paraffin
eingebettet und histologisch untersucht.