LSM 7 LIVE und LSM 7 DUO - Carl Zeiss
LSM 7 LIVE und LSM 7 DUO - Carl Zeiss
LSM 7 LIVE und LSM 7 DUO - Carl Zeiss
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<strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> <strong>und</strong> <strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong><br />
Ihre Visionen bewegen<br />
Mikroskopie von <strong>Carl</strong> <strong>Zeiss</strong><br />
Lokalisieren, manipulieren, visualisieren <strong>und</strong> analysieren
2<br />
Inhalt<br />
<strong>LIVE</strong>-Übertragung 4<br />
Zugang zu lebenden Zellen 8<br />
Dynamische Ereignisse analysieren<br />
mit FRAP, FLIP <strong>und</strong> FRET 10<br />
Moleküle verfolgen mit<br />
PA-GFP, DRONPA <strong>und</strong> KAEDE 12<br />
Geschwindigkeit zählt bei Ihren<br />
physiologischen Messungen 14<br />
Tief blicken durch Multiphotonenanregung 16<br />
Detaillierte Bewegungsstudien 17<br />
Schneller als in Echtzeit 18<br />
Konfokale Mikroskopie ohne Limits 20<br />
Technische Daten 22<br />
Systemüberblick 24<br />
Gut kombiniert 27<br />
Titel:<br />
Bewegungsbahnen von Bakterien der Spezies<br />
Shewanella oneidensis. Maximum-Intensity-<br />
Projektionen von 500 Bildern einer XYZ-<br />
Zeitserie mit 44 fps.<br />
Präparat: Dr. T. Teal, Dr. D. Newman,<br />
Biological Imaging Center, Caltech,<br />
Pasadena, USA<br />
Seite 3:<br />
GalT-Y BFP Washout von kultivierten Zellen,<br />
Zeitserie der intraplasmatischen Bewegung.<br />
Präparat: Dr. Lippincott-Schwartz, NIH,<br />
Bethesda, USA
Schnelle Reaktion<br />
von Nervenzellen<br />
auf äußere Reize<br />
<strong>LIVE</strong>–Übertragung<br />
Bilden Sie lebende Zellen live in Bewegung ab,<br />
um f<strong>und</strong>amentale Vorgänge zu entschlüsseln.<br />
Teilung befruchteter<br />
Eizellen von<br />
Insekten<br />
1μs<br />
1ms<br />
Lebenszyklus<br />
von Drosophila<br />
melanogaster<br />
1s<br />
10 3 s<br />
10 6 s<br />
Zeit<br />
Zeitkonstanten ausgewählter zellulärer Prozesse.<br />
4
5<br />
Die ZEN Software –<br />
Schnittstelle zu Ihren Applikationen.
6<br />
Das <strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong> vereint <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> <strong>und</strong><br />
<strong>LSM</strong> 710 am Axio Observer.Z1
Das <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> mit dem Manipulationsmodul<br />
<strong>LSM</strong> DuoScan am Axio Observer.Z1<br />
7
8<br />
Zugang zu lebenden Zellen<br />
Die Flut hochaufgelöster <strong>und</strong> multidimensionaler digitaler Daten erfordert neue<br />
Strategien bei der Aufnahme, Verarbeitung <strong>und</strong> Visualisierung von Bildserien.<br />
Das <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> navigiert <strong>und</strong> analysiert für Sie diese Datenströme zuverlässig <strong>und</strong> effektiv.<br />
64-bit-Performance für Ihre Bilddaten<br />
1000 Bilder von je 512x512 Pixeln in 10 Sek<strong>und</strong>en? Das sind<br />
250 MB in 10 Sek<strong>und</strong>en, oder mehr als eine CD-ROM voller<br />
Daten jede halbe Minute. Für das <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> ist das nichts<br />
Ungewöhnliches. Dank der neuen Echtzeit-Elektronik <strong>und</strong><br />
dem neuen Echtzeit-Computersystem mit Windows 64-bit<br />
verarbeitet das <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> diese riesigen 4D-Datenmengen<br />
mit Übertragungsraten von bis zu 100 MB je Sek<strong>und</strong>e.<br />
Erkennen Sie Objekte an ihren Bahnen<br />
Ihre Zeitserien verarbeiten Sie zum Beispiel mit Offline-<br />
Particle-Tracking-Software in AxioVision. So erfassen Sie die<br />
Bewegungsbahnen Ihrer Objekte quantitativ <strong>und</strong> ziehen<br />
wertvolle Schlüsse.<br />
Präzises Spiel des Laserlichts<br />
Kompakte <strong>und</strong> langlebige Festkörperlaser setzen auch<br />
dicke oder nur schwach fl uoreszierende Präparate ins rechte<br />
Licht <strong>und</strong> halten Gewebeschädigungen in Grenzen. Die<br />
neue feinjustierte Lasereinkopplung <strong>und</strong> Strahlformung des<br />
<strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> setzt einen neuen Standard für Bildqualität bei<br />
schnellen Linienscannern. Aus den verfügbaren Lasern (405,<br />
488, 532, 561 <strong>und</strong> 635 nm) können Sie die idealen Linien<br />
für Ihre Farbstoffe auswählen.<br />
Zytoskelett <strong>und</strong> Mitochondrien<br />
einer kultivierten Zelle. Die neue<br />
feinjustierte Lasereinkopplung <strong>und</strong><br />
Strahlformung des <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong><br />
verschafft Ihnen auch bei sehr<br />
homogenen Präparaten ein artefaktfreies<br />
Bild – eine Innovation bei<br />
Linienscansystemen.
Das <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong>: leistungsfähige <strong>und</strong> bedienerfre<strong>und</strong>liche<br />
ZEN Software mit 64-bit-Betriebssystem<br />
<strong>und</strong> Scankopf für verbesserte Bildqualität<br />
Nehmen Sie ROIs automatisiert auf<br />
Defi nieren Sie komplexe wiederkehrende Abläufe in Zeitserien:<br />
Der neue Multilocation Scan der ZEN 2009 Software<br />
zeichnet Ihre gewählten Positionen oder eine ganze<br />
Multiwellplatte automatisch auf – mit korrekter Z-Position<br />
selbst in extrem langen Serien. So gewinnen Sie Zeit für<br />
anspruchsvollere Aufgaben.<br />
Multilocation Scan<br />
für Ihre Zeitserien.<br />
9
FRAP: Bleichen einer ROI<br />
<strong>und</strong> Regeneration in einer<br />
GFP-markierten CD3-<br />
Zelle mit dem <strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong>.<br />
10<br />
Dynamische Ereignisse analysieren mit<br />
FRAP, FLIP <strong>und</strong> FRET<br />
Mit dem <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> DuoScan <strong>und</strong> dem <strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong> untersuchen Sie die<br />
Kinetik von Molekülen enorm präzise. In extrem schnellen Zeitserien führen<br />
Sie Ihre FRAP- <strong>und</strong> FLIP-Experimente mit gezieltem Laserbleichen durch.<br />
Das <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> bildet Zellen zügig ab. Und es kann mehr:<br />
Zwei unabhängige Scannergruppen in der Kombination als<br />
<strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong> oder mit dem <strong>LSM</strong> DuoScan geben Ihnen wertvolle<br />
Flexibilität für das Photobleichen. Sie führen schnelle<br />
FRAP-Experimente in frei defi nierbaren ROIs bei unterschiedlichen<br />
Wellenlängen durch – sogar gleichzeitig mit schneller<br />
Bildaufnahme in zwei Kanälen. Das <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> ermöglicht<br />
so nicht nur FRAP <strong>und</strong> FLIP, sondern auch FLAP mit Doppelmarkierung,<br />
wo das Dynamikverhältnis zwischen einem<br />
ungebleichten <strong>und</strong> einem gebleichten Fluoreszenzmarker<br />
verglichen wird.<br />
In einem FRAP-Experiment wird eine definierte Region in einer Zelle,<br />
die ein GFP-Fusionsprotein exprimiert, durch kurzzeitige intensive<br />
Laserbestrahlung gebleicht. Zeitrafferaufnahmen dokumentieren <strong>und</strong><br />
messen die Regeneration der Fluoreszenz.<br />
In einem FLIP-Experiment wird dieselbe Region innerhalb einer Zelle<br />
mehrfach gebleicht <strong>und</strong> der Fluoreszenzverlust außerhalb dieser Region<br />
gemessen.
Neben den gängigen Methoden zur Analyse der Kinetik <strong>und</strong> Mobilität von Molekülen<br />
gibt Ihnen das <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> noch weitere ausgefeilte Methoden an die Hand,<br />
mit denen Sie molekulare Wechselwirkungen <strong>und</strong> Prozesse erforschen.<br />
Mit FRET untersuchen Sie die räumliche Nachbarschaft <strong>und</strong><br />
die Wechselwirkung von Molekülen. Das <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> ist<br />
besonders geeignet für das Akzeptor-Photobleichen, eine<br />
sehr sichere FRET-Methode.<br />
In Entwicklungsstudien kann das selektive Bleichen von<br />
Strukturen die Antworten auf viele Fragen der Lokalisierung<br />
<strong>und</strong> Proliferation liefern, die mit bloßer Anfärbung allein<br />
nicht gelöst werden können.<br />
Hefezellen, Tubulinfärbung.<br />
Die Mikrotubuli werden mit dem <strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong> präzise gebleicht.<br />
Präparat: Prof. M. Yoshida, Chemical Genetics Laboratory,<br />
RIKEN, Wako, Japan<br />
-32 s 0 s<br />
32 s<br />
CFP<br />
CFP<br />
FRET-Auswertung von CFP <strong>und</strong> YFP in kultivierten Zellen,<br />
Kontrollbleichung des Akzeptors <strong>und</strong> verstärktes Donor-Signal.<br />
64 s 96 s 128 s 160 s<br />
11<br />
YFP<br />
YFP
Mit DRONPA transfizierte<br />
Kulturzelle, mehrfach mit<br />
Lichtimpulsen bei 405 nm<br />
aktiviert; schnelle Bildaufnahme<br />
mit Anregung bei<br />
488 nm.<br />
12<br />
Moleküle verfolgen mit<br />
PA-GFP, DRONPA <strong>und</strong> KAEDE<br />
Erweitern Sie den Spielraum Ihrer biomedizinischen Forschung <strong>und</strong> führen Sie<br />
Experimente mit fl exibler Probenmanipulation, beispielsweise Photoaktivierung<br />
<strong>und</strong> Photokonversion – bei exzellenter Präzision <strong>und</strong> Zeitaufl ösung, durch.<br />
PA-GFP<br />
Die in jüngster Zeit entwickelten Fluoreszenzproteine PA-GFP,<br />
DRONPA <strong>und</strong> KAEDE ermöglichen es Ihnen, dynamische Vorgänge<br />
direkt zu untersuchen. Die beiden unabhängigen Scannergruppen<br />
der kombinierten Systeme <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> DuoScan <strong>und</strong><br />
<strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong> bieten Ihnen die für effi ziente Photoaktivierungs-<br />
<strong>und</strong> Photokonversionsexperimente benötigte Flexibilität.<br />
Mit PA-GFP, DRONPA oder KAEDE markiert, lassen sich defi nierte<br />
Subpopulationen von Proteinen, ganze Organellen oder sogar<br />
Zellen in einem Gewebeverband durch lokale Bestrahlung mit<br />
violettem Licht selektiv aktivieren oder konvertieren. Mehrere<br />
Hochleistungslaser der Wellenlängen 405, 488 <strong>und</strong> 561 nm, die<br />
von beiden Scanmodulen arbeitsteilig genutzt <strong>und</strong> über eine<br />
komfortable ROI-Bleach-Benutzeroberfl äche gesteuert werden,<br />
sind für solche Anwendungen ideal geeignet. Sie können am<br />
<strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong> darüber hinaus zwischen mehreren Detektionsmöglichkeiten<br />
wählen: spektral über den QUASAR-Detektor des<br />
<strong>LSM</strong> 710 oder superschnell durch Linienscannen in die CCD-<br />
Detektoren des <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong>.<br />
PA-GFP + DRONPA<br />
Das Fluoreszenzprotein DRONPA wechselt durch optische Anregung<br />
zwischen einem fluoreszierenden <strong>und</strong> einem nichtfluoreszierenden<br />
Zustand.<br />
DRONPA<br />
Das Fluoreszenzprotein KAEDE wechselt bei Bestrahlung mit UV-Licht<br />
von Rot nach Grün.
Photokonversion einer mit KAEDE<br />
transfizierten Zelle. Bestrahlung bei 405 nm<br />
in einer genau lokalisierten subzellulären<br />
Region wandelt die Grünfluoreszenz<br />
komplett in eine Rotfluoreszenz um.<br />
Mit PA-GFP transfizierte<br />
Kulturzelle, in ROI 1 kurzzeitig<br />
mit Licht von 405 nm aktiviert;<br />
Auswertung der Molekülbewegung<br />
in ROI 2.<br />
13
14<br />
Geschwindigkeit zählt bei Ihren<br />
physiologischen Messungen<br />
Das <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> ist ideal für Messungen, die der Geschwindigkeit <strong>und</strong> Farbänderung<br />
von Ionenindikatoren <strong>und</strong> spannungsempfi ndlichen Farbstoffen angepasst sein müssen.<br />
Das <strong>LSM</strong> DuoScan sorgt für höchste Präzision bei der Manipulation Ihrer ROIs.<br />
Mit dem <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> erzielen Sie Bildfrequenzen bis in den<br />
Kilohertzbereich – zum Beispiel 1010 fps bei 512x50 Pixeln.<br />
Diese außerordentliche Schnelligkeit nutzen Sie noch dazu<br />
in einem echten konfokalen System mit simultaner Zweikanalaufnahme.<br />
Um einen Punktscanner erweitert, gibt Ihnen das <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong><br />
DuoScan oder das <strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong> die benötigte Flexibilität für<br />
das Uncaging <strong>und</strong> die Probenstimulation z.B. mit nahem<br />
UV-Licht. Für die Mikromanipulation stehen diverse apochromatische<br />
Tauchobjektive wie die Plan-Apochromate<br />
20x/1.0 W <strong>und</strong> 63x/1.0 W zur Verfügung.<br />
Die absolute Ca2+-Konzentration werten Sie<br />
mit der Kalibrierfunktion der ZEISS ZEN<br />
Software leicht aus.<br />
Darstellung <strong>und</strong> Auswertung<br />
von Ionenkonzentrationen<br />
• Online- <strong>und</strong> Offl ine-Ratio für ratiometrische<br />
Farbstoffe<br />
• Online <strong>und</strong> Offl ine F/F0 für Einwellenlängen-<br />
Farbstoffe<br />
• Kalibrierung für ratiometrische <strong>und</strong> Einwellenlängen-<br />
Farbstoffe<br />
– in situ <strong>und</strong> in vitro<br />
– einschließlich Untergr<strong>und</strong>kompensation<br />
– nach Titration mit diversen Kurvenanpassungen<br />
– nach Grynkiewicz<br />
• Interaktive Skalierung von Bilddatenreihen<br />
• Interaktive graphische Darstellungen der Messdaten<br />
aus ROIs
Schnelle Ca2+-Übergänge in Fluo-4-markierten<br />
Herzmuskelzellen einer Ratte,<br />
aufgenommen mit 80 fps.<br />
Präparat: Dr. W. J. Lederer <strong>und</strong> Dr. A. Ziman,<br />
Medical Biotechnology Center,<br />
Biotechnology Institute, University of Maryland,<br />
Baltimore, USA<br />
Mehrfach wiederholter Ca2+-Anstieg in<br />
Fluo-4-markierten Herzmuskelzellen nach Stimulation.<br />
15
16<br />
Tief blicken durch Multiphotonenanregung<br />
Die Multiphotonenmikroskopie bedeutet einen entscheidenden Fortschritt für<br />
Experimente mit lebenden Zellen, indem sie tiefe Einblicke in lebende Gewebe<br />
gestattet, ohne hohe, gewebeschädigende Laserleistungen anwenden zu müssen.<br />
Das <strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong> ermöglicht vorteilhaftes Photobleichen,<br />
Photoaktivieren <strong>und</strong> Uncaging, vor allem mit violetten <strong>und</strong><br />
ultravioletten Lasern. Zusätzlich zum tief eindringenden<br />
Multiphotonenmodus gibt Ihnen die schnelle Liniendetektion<br />
mit dem <strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong> NLO die Möglichkeit, lebende<br />
Präparate extrem schnell abzubilden <strong>und</strong> gleichzeitig Photomanipulation<br />
tief im Gewebe mit dem Multiphotonenlaser<br />
durchzuführen.<br />
Ca-1-Pyramidenzellen im Hippokampus einer Maus.<br />
Die Eindringtiefe der Multiphotonenmethode ermöglicht<br />
die hohe Detailaufl ösung.<br />
Präparat: M. Fuhrmann, Zentrum für Neuropathologie<br />
<strong>und</strong> Prionforschung, LMU München, Deutschland<br />
Femtosek<strong>und</strong>enlaser<br />
regen den Farbstoff nur<br />
am Fokuspunkt an.<br />
Flexibles Manipulieren: Das Bleichmenü<br />
gestattet die einfache Einstellung des Manipu<br />
lationsschrittes <strong>und</strong> der Tiefenpositionen.<br />
Energie<br />
Energiediagramm der<br />
Fluoreszenz erzeugung bei<br />
Multiphotonenanregung.
Detaillierte Bewegungsstudien<br />
Hochaufgelöste 3D-Abbildung von Blutgefäßen im Mäusegehirn<br />
mittels Gelatineverfahren mit Fluoreszenzmarkierung.<br />
Präparat: Dr. H. Hashimoto, Medizinische Fakultät<br />
der Universität Jikei; Dr. M. Kusakabe, Institut für Matrixzellforschung,<br />
Japan<br />
____________<br />
100 μm<br />
Wenn komplexe Zellprozesse mit höherer Geschwindigkeit ablaufen als die<br />
Videobildfrequenz, wird es spannend: Mit dem revolutionären Hochgeschwindigkeits-<br />
Detektionsverfahren des <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> verfolgen Sie diese Vorgänge in 3D <strong>und</strong> 4D.<br />
Mehrere Neuerungen ermöglichen superschnelle parallele<br />
Detektion mit bisher unerreichter Empfi ndlichkeit (z.B. 1010<br />
Bilder/s bei 512x50 Pixeln). Mit AchroGate, einem bahnbrechenden<br />
Strahlenteiler, detektieren Sie Emissionen mit<br />
einem Wirkungsgrad von 95 % ohne jegliches mechanisches<br />
oder elektrisches Umschalten. Mit den beiden eingebauten<br />
CCD-Liniendetektoren (Quanteneffi zienz 75 % bei 550nm)<br />
<strong>und</strong> den cleveren Doppelbandpassfi ltern können z.B. neuronale<br />
Prozesse von nur einigen Mikrosek<strong>und</strong>en Dauer mit<br />
zwei oder sogar mehr Markern verfolgt werden.<br />
_______<br />
100 μm<br />
Zebrafi sch-Embryo. Erythrozyten markiert mit dsRed<br />
(rot) <strong>und</strong> Endothelzellen mit eGFP (grün).<br />
Gleichzeitige Aufnahme in 2 Kanälen mit 32 Bildern/s.<br />
Präparat: Dr. S. Hermanson <strong>und</strong> Dr. S. C. Ekker,<br />
Universität Minnesota, USA<br />
17
18<br />
Schneller als in Echtzeit<br />
Entwicklungsprozesse mit ihren sprunghaften Veränderungen sind schwer darzustellen –<br />
sie fi nden tief im Organismus statt. Ihre Entwicklungsuntersuchungen müssen Sie daher<br />
schnell <strong>und</strong> in 4D, das heißt konfokal durchführen.<br />
Das <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> bietet die echte konfokale Abbildungspräzision,<br />
die Sie für 4D-Entwicklungsstudien benötigen.<br />
Die konfokalen Blenden sind je nach Bedarf <strong>und</strong> Objektiv<br />
exakt einstellbar. Die Aufnahme optischer Bilder mit exzellenter<br />
3D-Aufl ösung erfolgt superschnell in der 4. (Zeit-)<br />
Dimension. Mittels moderner Piezo-Fokussiereinrichtungen<br />
lassen sich Z-Bildstapel von bis zu 70 optischen Schnitten<br />
je Sek<strong>und</strong>e aufnehmen <strong>und</strong> der Fokussierbereich bis auf<br />
250 μm erweitern – das ist ideal für die Aufnahme lebender<br />
Objekte. Mit modernen, speziell für das Live-Cell-Imaging<br />
entwickelten Objektiven, wie den ZEISS LCI Plan-<br />
Neofl uaren oder den LD C-Apochromaten, steht Ihnen ein<br />
üppiger Arbeitsabstand mit Wasser- oder Glycerinimmersion<br />
zur Verfügung.<br />
Schneller Z-Bildeinzug mit<br />
Piezo-Fokussierantrieb.
0.0 μm<br />
10.0 μm<br />
19.0 μm μm<br />
3 konfokale Schnitte<br />
eines Einzelstapels.<br />
Galerie der Projektionen einer XYZt-Zeitserie,<br />
aufgenommen mit 40 Bildern/s<br />
bzw. in 1,23 s pro Stapel;<br />
Gesamtdauer des Experiments: 54 s.<br />
Mobilität einer adulten Caenorhabditis elegans,<br />
GFP-Exprimierung.<br />
Präparat: Prof. R. Baumeister, Inst. Biologie III<br />
<strong>und</strong> Dr. R. Nitschke, Life Imaging Center,<br />
Universität Freiburg, Deutschland<br />
19
20<br />
Konfokale Mikroskopie ohne Limits<br />
Strahlengang im <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong><br />
1 Laser Ports V <strong>und</strong> Vis<br />
2 Spiegel<br />
7<br />
3 Strahlvereiniger<br />
4 Anregungsstrahlformer<br />
5 AchroGate (Hauptstrahlteiler)<br />
6 Zoom-Optik<br />
6<br />
4<br />
12<br />
5<br />
11<br />
10<br />
7 Scan- <strong>und</strong> Panspiegel<br />
8 Nebenfarbteiler<br />
9 Emissionsstrahlformer<br />
10 Konfokale Blenden<br />
11 Emissionsfilter<br />
8<br />
9<br />
12 CCD Detektorzeile<br />
9<br />
2<br />
3<br />
10<br />
11<br />
1<br />
1<br />
12<br />
A<br />
B<br />
C
Strahlengang im <strong>LSM</strong> 710<br />
1 V/Flex PTC Laser Ports<br />
(405, 440, In Tune; ps+cw)<br />
2 IR PTC Laser Port<br />
(durchstimmbare Ti:Sa)<br />
3 Vis PTC Laser Ports & Vis AOTF<br />
4 Monitordioden<br />
5 InVis TwinGate Hauptfarbteiler<br />
(aufrüstbar)<br />
6 Vis TwinGate Hauptfarbteiler<br />
(vom Nutzer wechselbar)<br />
7 Scanspiegel (FOV 20, 6k × 6k)<br />
A Strahlteiler <strong>DUO</strong><br />
B Objektiv<br />
C Präparat<br />
7<br />
5<br />
4<br />
6<br />
8 Master Pinhole<br />
9 Teiler für externe Kanäle<br />
10 Spektrale Aufspaltung <strong>und</strong> Recycling Loop<br />
11 Spektrale Strahlführung<br />
12 QUASAR PMT spektraler Kanal # 1<br />
13 QUASAR PMT spektrale Kanäle # 2–33 (or # 2)<br />
14 QUASAR PMT spektraler Kanal # 34 (or # 3)<br />
15 Ext. Kanäle (# 4 + 5: APDs, FLIM, FCS etc.)<br />
4<br />
13<br />
12<br />
8<br />
14<br />
1<br />
2<br />
10<br />
3<br />
9<br />
11<br />
15<br />
21
22<br />
<strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> DuoScan <strong>und</strong> <strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong><br />
Technische Daten<br />
Mikroskope<br />
Stative Aufrecht: Axio Imager.Z2, Axio Examiner.Z1; Invers: Axio Observer.Z1 RP (Rear Port) oder SP (Side Port)<br />
Z-Antrieb DC-Motor mit optoelektronischer Kodierung, kleinste Schrittweite 25 oder 50 nm<br />
Feinfokuslösungen Zubehör: Piezo-Tisch- oder Objektivfokus, Gesamthub ca. 250 μm, kleinste Schrittweite 60.000 Linien/s<br />
Scanzoom 0,5x bis 2,0x, digital, freier X/Y-Offset (je nach Konfi guration)<br />
Scanfeld 18 mm Felddiagonale (max.) in der Zwischenbildebene mit homogener Bildfeldausleuchtung<br />
Konfokale Blenden Individuell einstellbare Pinholes für jeden Detektionskanal<br />
Detektion Bis zu zwei konfokale Kanäle für Fluoreszenz, mit hochempfi ndlichen Detektoren (QE 70 % oder besser).<br />
Durchlicht-Hellfeld-Modus möglich.<br />
Datentiefe Wählbar: 8 bit oder 12 bit<br />
Lasermodul <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong><br />
Lasermodul VIS Polarisationserhaltende Einmodenfaser, temperaturstabilisierter VIS-AOTF (Acousto-Optical Tunable Filter)<br />
für die simultane Intensitätsregelung, Schaltzeit < 5 μs)<br />
Laser Sämtlich wartungsfreie Dioden- oder Festkörperlaser ohne wesentliche Wärmeableitung.<br />
Laserdiode 405 nm, 50 mW, Laserdiode 488 nm, 100 mW;<br />
diodengepumpter Festkörperlaser 532 nm, 75 mW;<br />
Laserdiode 561 nm, 40 mW; Laserdiode 635 nm, 30 mW<br />
Variable Strahlteilung<br />
(<strong>LSM</strong> DuoScan)<br />
Scanmodul <strong>LSM</strong> DuoScan<br />
Zweiter Ausgang aus vorhandenem Lasermodul <strong>LIVE</strong> mit polarisationserhaltender Einmodenfaser;<br />
Teilungsverhältnis zwischen Ausgängen per Software frei einstellbar; für Laserlinien 405, 488 oder 532 nm<br />
Scanner Zwei unabhängige galvanometrische Scanspiegel, echtzeitgesteuert,<br />
mit ultrakurzem Linien- <strong>und</strong> Frame-Flyback<br />
Scangeschwindigkeit 13 x 2 Geschwindigkeitsstufen; bis zu 5 Regionen/s bei 512x512 Pixeln<br />
(max. 77 Regionen/s bei 512x32 Pixeln), 0,38 ms für eine Linie mit 512 Pixeln<br />
Scanzoom 0,7x bis 40x, digital in Schritten von 0,1 einstellbar<br />
Scanrotation Frei drehbar (360°) in Schritten von 1°, freier X/Y-Offset<br />
Scanfeld 18 mm Felddiagonale (max.) in der Zwischenbildebene mit homogener Bildfeldausleuchtung
Elektronikmodul<br />
<strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> Control Steuerung des Mikroskops, der Lasermodule, des Scanmoduls <strong>und</strong> weiterer Zubehörkomponenten,<br />
Kontrolle <strong>und</strong> Datensynchronisierung durch Echtzeitrechner;<br />
Datenaustausch mit dem Benutzer-PC über Gigabit Ethernet Interface<br />
Computer I Standard-PC mit praxisgerechter Ausstattung an Arbeits- <strong>und</strong> Festplattenspeicher;<br />
ergonomischer hochaufl ösender Flachbildschirm von 30“ (16:10), vielfältiges Zubehör;<br />
Betriebssystem Windows 32+64-bit, Multi-User-fähig<br />
Computer II PC der Spitzenklasse mit großzügigster Ausstattung an Arbeitsspeicher <strong>und</strong> ultraschnellem RAID 0<br />
Festplattensystem; ergonomische hochaufl ösende Flachbildschirme von 30“ (16:10),<br />
vielfältiges Zubehör; Betriebssystem Windows 32+64-bit, Multi-User-fähig<br />
Standardsoftware ZEN<br />
Systemkonfi guration Komfortable Steuerung <strong>und</strong> Konfi guration aller motorisierten Mikroskopfunktionen sowie der Laser- <strong>und</strong> Scanmodule;<br />
Speichern <strong>und</strong> Wiederherstellen anwendungsspezifi scher Konfi gurationen per Mausklick<br />
Systemselbsttest Automatische Justierung mit Kollimatik <strong>und</strong> System Maintenance Tool<br />
Aufnahme-Modi Line, Frame, Z-Stack, Zeitserien <strong>und</strong> Kombinationen: xy, xyz, xyt, xyzt, xz, xt, xzt, Multilocation Scan mit Autofokus;<br />
Online-Berechnung <strong>und</strong> Darstellung von Ratio-Bildern, Mittelung <strong>und</strong> Summierung<br />
Auto-Z-Funktion Online-Adaption der Aufnahmeparameter für Z-Stapel zur gleichmäßigen Helligkeitsverteilung<br />
Zoom-Crop-Funktion Komfortable Auswahl von Scan-Bereichen (Zoom, Crop, Offset)<br />
ROI Bleach Lokalisiertes Bleichen in bis zu 99 Bleich-ROIs für Anwendungen wie FRAP oder Uncaging;<br />
bis zu 99 ROIs beliebiger Form, pixelgenaue Laser-Dunkelschaltung<br />
Multitracking Schneller Wechsel der Anregungslinien bei der Aufnahme von Multifl uoreszenzen<br />
Darstellung Orthogonal-Ansicht (xy, xz, yz in einer Darstellung), Cut-Ansicht (3D-Schnitt unter frei defi nierbarem Raumwinkel),<br />
2.5D-Ansicht für Zeitserien von Linien-Scans, Projektionen (Stereo-, Maximum-, Transparenzprojektion)<br />
für Einzelbilder <strong>und</strong> Serien (Animationen), Tiefenkodierung (Falschfarben-Darstellung von Höheninformationen),<br />
Helligkeits- <strong>und</strong> Kontrasteinstellung; Offl ine-Interpolation für Z-Stapel, Auswahl <strong>und</strong> Modifi kation von Farbtabellen (LUT),<br />
Zeichenfunktion zur Dokumentation<br />
Bildauswertung Moderne Werkzeuge zur Kolokalisations- <strong>und</strong> Histogrammanalyse mit individuellen Parametern <strong>und</strong> Optionen,<br />
Profi lmessung an geraden <strong>und</strong> beliebig gekrümmten Linien, Messen von Längen, Winkeln, Flächen, Intensitäten, u.v.m.<br />
Bildoperationen Addition, Subtraktion, Multiplikation, Division, Ratio, Shift, Filter (Tiefpass, Median, Hochpass, etc., auch benutzerdefi nierbar)<br />
Datenarchivierung,<br />
Export, Import<br />
<strong>LSM</strong>-Bilddatenbank mit komfortablen Funktionen zur Verwaltung der Bilder <strong>und</strong> der dazugehörigen Aufnahme-Parameter;<br />
Multiprint-Funktion zur Erstellung zusammengesetzter Bild- <strong>und</strong> Datenansichten;<br />
über 20 Dateiformate (TIF, BMP, JPG, PSD, PCX, GIF, AVI, Quicktime …)<br />
sichern Kompatibilität mit allen gängigen Bildverarbeitungsprogrammen.<br />
Image Browser Kostenloses Software-Paket für die Darstellung, Bearbeitung, Sortierung, Druck <strong>und</strong> Export/Import von <strong>LSM</strong> 5-Bildern<br />
Optionale Software für alle Systeme<br />
Image VisArt plus Schnelle 3D- <strong>und</strong> 4D-Rekonstruktion <strong>und</strong> Animation<br />
(verschiedene Modi: Schattenprojektion, Transparenzprojektion, Oberfl ächen-Rendering)<br />
3D-Dekonvolution Bildrestaurierung auf Basis berechneter Point-Spread-Funktionen<br />
Physiologie /<br />
Ion concentration<br />
Umfangreiche Auswertesoftware für Zeitserien-Aufnahmen, graphische Mean-of-ROI-Analysen,<br />
Online- <strong>und</strong> Offl ine-Kalibrierung von Ionenkonzentrationen<br />
FRET plus Auswertung von Experimenten mit den Methoden Sensitized Emission oder Akzeptor-Photobleichen<br />
FRAP Benutzerführung <strong>und</strong> Auswertung von FRAP- <strong>und</strong> FLIP-Experimenten mit Berechnung der quantitativen Parameter<br />
Visual Macro Editor Grafi sches Erstellen von Routinen für Scan- <strong>und</strong> Auswertefunktionen<br />
VBA-Macro-Editor Aufnahme <strong>und</strong> Editieren von Routinen zur Automatisierung von Scan- <strong>und</strong> Auswertefunktionen<br />
Multitime Series Erstellung komplexer Zeit- <strong>und</strong> 3D-Serien; Autofokus- <strong>und</strong> Bleichfunktionen<br />
23
24<br />
<strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> DuoScan <strong>und</strong> <strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong><br />
Systemübersicht
Gut kombiniert<br />
Patente:<br />
www.zeiss.de/mikro-patente<br />
Literatur:<br />
www.zeiss.de/lsm<br />
27<br />
<strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong><br />
Sie müssen die unterschiedlichsten Experimente<br />
durchführen. Weil wir das wissen, können in dem<br />
<strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong>, <strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> DuoScan <strong>und</strong> <strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong><br />
verschiedene Ausrüstungen kombiniert werden.<br />
<strong>LSM</strong> 7 <strong>LIVE</strong> DuoScan<br />
CCD-Linie mit<br />
Doppelbandpässen<br />
<strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong> –<br />
Dieses eine System kann einfach alles:<br />
Spektrale Bildaufnahme, schnelle Bildaufnahmen<br />
von lebenden Zellen sowie Laser-Manipulation<br />
für FRAP, FLIP, Photoaktivierung oder Uncaging.<br />
Dabei beweist das <strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong> eindrucksvoll,<br />
dass Vielseitigkeit nicht auf Kosten der quali ta -<br />
tiven Leistung gehen muss.<br />
Detektionsoptionen <strong>und</strong> Manipulationsmodi<br />
CCD-Linie <strong>und</strong><br />
PMTs Spektral<br />
CCD-Linie,<br />
PMTs Spektral<br />
<strong>und</strong> NDDs<br />
1-/2-Kanal,<br />
Streifenbleichen – –<br />
1-/2-Kanal,<br />
ROI-Manipulation – –<br />
1-/2+34-Kanal,<br />
ROI-Manipulation<br />
<strong>LSM</strong> 7 <strong>DUO</strong> NLO – –<br />
–<br />
1-/2+34+9-Kanal,<br />
ROI-Manipulation,<br />
Multiphotonen-Laser
Optische Perfektion, kreativer Weitblick <strong>und</strong> ein sicheres Gespür<br />
für die technischen Herausforderungen in den Biowissenschaften:<br />
Das sind die Zutaten für brillante Mikroskopiekonzepte von <strong>Carl</strong> <strong>Zeiss</strong>.<br />
<strong>Carl</strong> <strong>Zeiss</strong> MicroImaging GmbH<br />
07740 Jena, Deutschland<br />
BioSciences | Standort Jena<br />
Telefon : + 49 3641 64 3400<br />
Telefax : + 49 3641 64 3144<br />
E-Mail : micro@zeiss.de<br />
www.zeiss.de/mikro<br />
Änderungen vorbehalten.<br />
Gedruckt auf umweltfre<strong>und</strong>lich<br />
chlorfrei gebleichtem Papier.<br />
60-1-0017/d – gedruckt 05.09