coagulants of moringa oleifera lam. seeds purification ... - EPFL

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Zusammenfassung
Proteine ausschlieslich während der ersten zwei Tage der Lagerung beobachtet werden. Eine
maximale Protein Konzentration von 40 g/L wurde durch die Verwendung einer Lösung
verschiedener Salze erhalten.
Die Trennung verschiedener in den Extrakten von Samen und Filterkuchen vorhandener
Proteine ermöglichte die Bestimmung der relativen Molmasse von zwei unterschiedlichen
Komponenten (4 und 8 kDa), die unter nicht reduzierenden Bedingungen, wie sie in den
Extrakten vorliegen, ein 12 kDa Heterodimer bilden. Weiterhin wurden Anhaltspunkte
gefunden, daß die große Anzahl von Proteinen, die in den Extrakten gefunden wurden
möglicherweise auf Artefakte, wie Zersetzung, Oxidation oder Reaktion mit nicht-proteinösen
Substanzen, zurückzuführen ist.
Das Vorhandensein von Glukosinolaten, und deren Derivaten, welche zur Gruppe der reaktiven
Isothiocyanate gehören, erhöht die Gefahr der Instabilität für die Proteine in M.oleifera Samen-
und Filterkuchenextrakten. Aus diesem Grunde wurde eine weitere Methode zur
Proteinisolation entwickelt, die den Einfluß von Isothiocyanaten minimiert.
Zum Vergleich der koagulierenden Eigenschaften von verschiedenen Komponenten nach
Fraktionierung der Extrakte wurde ein miniaturisierter Test erstellt. Die stärksten
koagulierenden Effekte wurden für die 8 kDa Kette des 12 kDa Proteins gefunden. Teilweise
Sequenzierung verschiedener Präparationen der 8 kDa Kette ergab geringe Unterschiede in den
Proteinsequenzen. Insgesamt ist die 8 kDa Kette dem Mo 2.1 Protein sehr ähnlich, jedoch
besteht sie aus 70 Aminosäureresten, anstelle von 60, wie es für Mo 2.1 berichtet wurde. Diese
Ergebnisse zeigen deutlich, daß es sich bei dem Mo 2.1 um ein Fragment eines Proteines
handelt, das in Extrakten von M.oleifera Samen gefunden wird.
Versuche zur Produktion eines Koagulationsmittels aus M.oleifera Filterkuchen im
Technikumsmaßstab wurden durchgeführt. Dabei wurden verschiedene Verfahren zur
Herstellung des Koagulierungsmittels verglichen. Auf Schwierigkeiten stießen Versuche bei
Fest-Flüssig Trennverfahren nach erfolgter Extraktion aufgrund hoher Feststoffgehalte und sehr
schlechtem Sedimentationsverhalten. Weiterhin ließen sich Versuche zur Aufkonzentrierung
der Lösungen mittels Ultrafiltration nur sehr schlecht reproduzieren. Alternativ wurden
Versuche zur Perkolation des gemahlenen Filterkuchens durchgeführt, die zu hohen
Extraktionsausbeuten führten. Abschließend wird ein Extraktionsprozeß mittels sequentieller
Perkolation unter Verwendung zweier verschiedener Lösungsmittel, um eine Trennung von
Glukosinolaten und Proteinen zu erreichen, gefolgt von einer Fällung der aktiven Proteine zur
Produktkonzentrierung vorgeschlagen.