PhD Vermeiren Lieve Compleet - Hogeschool Gent

Hoofdstuk 7 beschrijft onderzoek naar het werkingsmechanisme van de nietbacteriocinogene
cultuur L. sakei 10A tegenover L. monocytogenes.
Eerst en vooral werd het antagonistisch karakter van L. sakei 10A bevestigd, aangezien in
aanwezigheid van 10A groeiremming van L. monocytogenes optrad in een gebufferde BHIbroth
(b-BHI) (7°C, anaëroob). Bij het bepalen van de groei van L. monocytogenes in
verschillende celvrije cultuurmedia, bekomen na centrifugatie van een 10A-cultuur op
verschillende tijdstippen tijdens zijn groei in b-BHI, werd het duidelijk dat hoe ouder de
cultuur was, hoe meer groeiremmende eigenschappen het celvrij medium vertoonde. Dit
betekent dat de groeiremming ofwel veroorzaakt wordt door de productie van één of meerdere
antimicrobiële component(en) ofwel door competitie voor nutriënten.
De exacte rol van melkzuurvorming en nutriëntcompetitie werd duidelijker tijdens co-cultuur
experimenten in twee soorten vloeibaar groeimedium, die van elkaar verschilden in hun
glucosegehalte en in de aanwezigheid/afwezigheid van gistextract, Mn 2+ en Mg 2+ . De
aanwezigheid van meer nutriënten kon niet voorkomen dat er groeiremming optrad van
L. monocytogenes door L. sakei 10A. In het nutriënt-arme medium viel het moment van
groeiremming samen met het moment dat het medium geen glucose meer bevatte. In het
nutriënt-rijke medium werd de uitgesproken melkzuurvorming ervan verdacht de
groeiremming te veroorzaken. Daaropvolgende challenge testen met L. monocytogenes in het
celvrij kweekmedium, afkomstig van de groei van 10A in de media met de verschillende
gehalten aan nutriënten, liet toe om een onderscheid te maken tussen de verschillende
antagonistische effecten (pH-daling, melkzuurvorming en nutriëntcompetitie). In het nutriëntarme
medium werd de groeiremming uitsluitend veroorzaakt door nutriëntcompetitie en
competitie voor glucose was, tenminste gedeeltelijk, hierbij betrokken. In het nutriënt-rijke
medium werd de groeiremming veroorzaakt door een combinatie van verschillende factoren:
het antimicrobiële effect van het geproduceerde melkzuur/lactaat, nutriëntcompetitie en pHdaling
als gevolg van melkzuurvorming.
In een laatste experiment werd vastgesteld dat extra toevoeging van vitaminen en mineralen
aan het groeimedium geen effect had op de inhibitiefenomenen wat doet vermoeden dat
competitie voor deze vitaminen en mineralen geen bijkomende rol speelt in het
inhibitiemechanisme van L. sakei 10A.
Hoofdstuk 8 rapporteert over het gebruik van bacteriofaag P100 om te voorkomen dat
nabesmetting met L. monocytogenes aanleiding geeft tot uitgroei van deze voedselpathogeen
op vacuümverpakte gekookte vleesproducten.
Samenvatting
xx