06.08.2018 Views

XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG LYSINE, METHIONINE VÀ THREONINE TRONG THỨC ĂN CHĂN NUÔI BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC)

https://app.box.com/s/st9el5erq28ags5hscdtrmow7fj2uzs7

https://app.box.com/s/st9el5erq28ags5hscdtrmow7fj2uzs7

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

https://twitter.com/daykemquynhon<br />

plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn<br />

www.facebook.com/daykem.quynhon<br />

https://daykemquynhon.blogspot.com<br />

http://daykemquynhon.ucoz.com<br />

Nơi bồi dưỡng kiến thức Toán - Lý - Hóa cho học sinh cấp 2+3 /<br />

Diễn Đàn Toán - Lý - Hóa Quy Nhơn 1000B Trần Hưng Đạo Tp.Quy Nhơn Tỉnh Bình Định<br />

2.5.2 Phƣơng pháp sắc ký lớp mỏng [6]<br />

Nguyên tắc của phương pháp này cũng dựa trên nguyên tắc của phương<br />

pháp sắc ký giấy, nghĩa là cũng dựa trên sự phân bố của chất phân tích giữa<br />

hai pha. Tuy nhiên, chất hấp phụ pha động được trán trên một phiến kính hoặc<br />

nhôm tạo thành một lớp mỏng và pha động là một dung môi thích hợp. Dung<br />

môi di chuyển kéo theo sự dịch chuyển của các chất trong mẫu phân tích. Các<br />

chất hấp phụ thường là silica gel, alumium oxide, sephadex,... được kết hợp<br />

với thạch cao dán vào miếng kính.<br />

Phương pháp sắc ký bản mỏng nhuộm màu với ninhydrin có thể dùng<br />

định tính, bán định lượng đồng thời một số loại amino acid từ dịch thủy phân<br />

protein. phương pháp này thường được sử dụng trong kiểm nghiệm thực<br />

phẩm, sinh hóa trước đây. Để tăng độ phân giải cho các amino acid người ta<br />

phải dùng sắc ký hai chiều với hệ 2 dung môi thích hợp. Trong phương pháp<br />

sắc ký bản mỏng có ba hệ dung môi thường được sử dụng là phenol/nước,<br />

collidine, butanol/acid acetic/nước. Tùy theo hệ dung môi và tỉ lệ của hệ dung<br />

môi mà các amino acid có thứ tự và giá trị R f khác nhau.<br />

2.5.3 Phƣơng pháp sắc ký khí [7]<br />

Vì các amino acid là những chất khó bay hơi, nên với phương pháp sắc<br />

ký khí trước tiên ta phải tạo dẫn xuất dễ bay hơi cho các amino acid bằng cách<br />

ứng dụng chương trình nhiệt độ trong quá trình sắc ký, thường là để tạo thành<br />

dẫn xuất N-acetyl-amine. Đầu tiên, ta cho amino acid tự do (sau quá trình thủy<br />

phân protein) tác dụng với cồn amylic và HBr khan. Sau đó, cho hỗn hợp này<br />

tác dụng với anhydrid acetic. Cột thường dùng trong sắc ký khí là Chromosorb<br />

W (60-80 mesh) có một lớp polyethylenglycol 1 % (carbowax 1564 hoặc<br />

6000). Chương trình nhiệt giữa 125 ◦ C và 155 ◦ C, tốc độ dòng 60-240 mL/phút.<br />

Tuy nhiên, phương pháp này không được ứng dụng rộng rãi vì khả năng tách<br />

rất kém và cũng khá lỗi thời.<br />

2.5.4 Phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (<strong>HPLC</strong>)<br />

Sắc ký lỏng hiệu năng cao (<strong>HPLC</strong>) là phương pháp phổ biến nhất hiện<br />

nay và được ứng dụng trong nhiều lĩnh vực phân tích, nghiên cứu khoa học và<br />

công nghệ trong đó có phân tích amino acid. Nhiều công trình phân tích amino<br />

acid dựa trên phương pháp này đã được công bố và nó đã trở thành tiêu chuẩn<br />

để phân tích amino acid. Vì phương pháp này có độ nhạy cao, hiệu suất tách<br />

cao và ít tốn thời gian cũng như lượng mẫu cần rất ít. Trong khoảng 15 năm<br />

trở lại đây thì kỹ thuật này là kỹ thuật được ứng dụng rỗng rãi nhất và chiếm<br />

gần 70% các công trình nghiên cứu và ứng dụng về sắc ký.<br />

DIỄN ĐÀN TOÁN - LÝ - HÓA 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN<br />

MỌI YÊU CẦU GỬI VỀ HỘP MAIL DAYKEMQUYNHONBUSINESS@GMAIL.COM<br />

HOTLINE : +84905779594 (MOBILE/ZALO)<br />

https://daykemquynhonofficial.wordpress.com/blog/<br />

DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST&GT : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN<br />

17<br />

Đóng góp PDF bởi GV. Nguyễn Thanh Tú<br />

www.facebook.com/daykemquynhonofficial<br />

www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!