Manual de Hemostasia y Trombosis - Universidad Autónoma de ...
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Método.- Óptico<br />
<strong>Manual</strong> <strong>de</strong> <strong>Hemostasia</strong> y <strong>Trombosis</strong><br />
Código: M-CIRB-AADC-01<br />
Fecha <strong>de</strong> emisión:<br />
1-Octubre-2012<br />
Revisión: 01<br />
Página: 12 <strong>de</strong> 26<br />
Técnica<br />
Preparación <strong>de</strong> la muestra.<br />
1.-Obtencion <strong>de</strong> plasma rico en plaquetas (PRP)<br />
a.-Obtener sangre con anticoagulante <strong>de</strong> citrato sódico al 3.2 %, en los tubos habitualmente utilizados para pruebas <strong>de</strong> coagulación.<br />
(Paciente y Testigo). Tomar la cantidad necesaria para las pruebas a realizar.<br />
b.-Centrifugar la sangre a 900 rpm por 15 minutos para obtener el plasma rico en plaquetas (PRP). Esto se <strong>de</strong>be hacer <strong>de</strong>spués <strong>de</strong><br />
tomar la muestra ya que la vida media <strong>de</strong> las plaquetas es <strong>de</strong> aproximadamente 3 hrs.<br />
c.-Separar 500 µL <strong>de</strong>l PRP y ponerlo en un tubo <strong>de</strong> plástico (falcon) rotulado como PRP para el paciente y el mismo procedimiento<br />
se hace con el testigo.<br />
2.-Obtencion <strong>de</strong> plasma pobre en plaquetas (PPP)<br />
a.-Centrifugar <strong>de</strong> nuevo el remanente <strong>de</strong> los tubos <strong>de</strong> sangre total a 3500 rpm por 15 minutos para obtener el plasma pobre en<br />
plaquetas (PPP).<br />
b.-Se obtiene un plasma claro don<strong>de</strong> todas las plaquetas por la fuerza centrifuga ya están sedimentadas al igual que los eritrocitos.<br />
3.-Cuantificacion <strong>de</strong> plaquetas <strong>de</strong>l PRP<br />
El PRP que se separa; realizar un conteo automatizado <strong>de</strong> plaquetas (SYSMEX KX-21). Una vez obtenida la tira con el resultado <strong>de</strong><br />
las plaquetas estas se ajustan a 200 mil si fueran necesarias.<br />
Calculo para ajustar las plaquetas a 200 mil<br />
Fórmula:<br />
C1V1 = C2V2 V1 = C2V2<br />
C1