Carcinoma epidermoide de pene. Estudio mediante hibridación in situ

Carcinoma epidermoide de pene. Estudio
mediante hibridación in situ
A. RODRÍGUEZ PICHARDO*, J. AZNAR MARTÍN**, A. OJEDA MARTOS***, B. GARCÍA BRAVO****
* Jefe Sección Dermatología. Hospital Universitario Virgen Macarena. Sevilla.
** Jefe Servicio Microbiología. Hospital Universitario Virgen del Rocío. Sevilla.
*** Médico adjunto. Hospital Carlos Haya. Málaga.
****Médico adjunto. Hospital Universitario Virgen Macarena. Málaga.
■ Introducción
La Revista Internacional de Dermatología y Dermocosmética
Clínica nos pide, a los amigos y compañeros
de Virgilio Palacio, un trabajo para ser incluido en
un próximo número que se le va a dedicar. Los que
firmamos este trabajo mantuvimos durante muchos
años una intensa colaboración profesional y una mayor
relación de amistad, que dio origen a muchos proyectos
profesionales en común. Virgilio era una persona
cariñosa y afable, y tenía una gran capacidad de
trabajo, además disfrutaba con este apartado de la especialidad,
que había sido abandonada por muchos
compañeros. Uno de los temas comunes de muchos
proyectos y conversaciones eran las infecciones por
Papilomavirus. Por ello hemos creído interesante aportar
este trabajo, que se realizó a principios de los noventa
y que no publicamos en su momento, ya que
queríamos confirmar nuestros datos con la técnica de
PCR, sin embargo, diversos problemas técnicos imposibilitaron
esta comprobación.
Desde hace mucho tiempo se ha relacionado el
carcinoma de cérvix (CC) con los hábitos sexuales y
sospechado una etiología infecciosa (1), pero sólo el
hallazgo de una incidencia mayor de lo esperada de
CC en las parejas de varones con carcinoma de pene,
sugirió que pudieran tener una etiología común (2),
detectándose más recientemente la presencia de virus
papiloma humano (VPH)(3).
■ Casos clínicos
Caso 1
Paciente de 63 años que hace 14 padeció de lesiones
verrucosas en pene, probablemente condilomas
acuminados. Desde hace 18 meses presenta una tumoración
hiperqueratósica, blanquecina, de borde nítido,
localizada en glande y prepucio, de 20 mm de diámetro.
A la exploración no se apreciaban adenopatías regionales.
Fue intervenido mediante decorticación de la
lesión, confirmándose el diagnóstico dermatopatológico
de carcinoma epidermoide, y detectándose mediante hibridación
"in situ" la presencia de VPH genotipo 31/35.
Caso 2
Paciente de 64 años que desde hacia 18 meses
presentaba una placa eritematosa e infiltrada en superficie
interna de prepucio y glande, desarrollándose
posteriormente una úlcera de bordes vegetantes, de 30
mm de diámetro, sin adenopatías regionales. A los tres
meses de la decorticación mostró una recidiva local,
siendo la evolución posterior satisfactoria, se detectaron
VPH genotipos 16/18 y 31/35.
Caso 3
Paciente de 67 años, afecto de porfiria cutánea tarda
e hipertensión arterial, que presentaba una lesión
ulcerosa en glande de un año de evolución, sobre la
que se desarrolló una tumoración vegetante hiperqueratósica
de 1 cm de diámetro, con sangrado ocasional. A
los dos años de la decorticación no ha habido recidiva.
Caso 4
Paciente de 57 años con hepatopatía alcohólica moderada,
y tumoración vegetante hiperqueratósica de bordes
nítidos, que asentaban sobre una placa eritematosa
e infiltrada, localizada en la superficie lateral derecha
del glande y mucosa adyacente de prepucio. Previa confirmación
dermatopatológica se practicó amputación
parcial del pene, siendo la evolución satisfactoria al año.
En los casos 3 y 4 no se detectó con la técnica utilizada
ADN de VPH.
■ Método
En la biopsia tisular se realizó la detección de
ADN de Papilomavirus humanos mediante hibridación
in situ. El tejido tumoral se incluía en formol al 10%
CASO CLÍNICO
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Vol. 4, Núm. 7. Octubre 2001
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durante menos de 24 horas, este se eliminaba después
con PBS a temperatura ambiente durante 18 horas,
conservándose en PBS-sacarosa al 15% a 4ºC.
Se realizaban 9 cortes de 8 micras de cada muestra,
que se fijaban a 60ºC durante una hora, y posteriormente
con acetona 10 minutos. Para la hibridación
in situ se ha utilizado un kit comercial de 3 sondas
marcadas con biotina para la detección de VPH 6/11,
16/18 y 31/35 (Pathogene, Enzo Diagnostic Inc), siguiendo
las instrucciones del fabricante. La detección
de los híbridos resultantes se realizaba por una reacción
en 2 pasos, en el primero se produce la unión de
la biotina a la peroxidasa; y este complejo reacciona
con el sustrato cromogénico unido al híbrido (peróxido
de hidrógeno y 3-amino –9 etil carbasol), contracoloreándose
después con hematoxilina-eosina. El resultado
de la reacción positiva es un precipitado rojizo
que se dispone principalmente en los estratos más diferenciados
de la epidermis afecta.
Las parejas de los pacientes 2, 3 y 4 fueron estudiadas
mediante citología de triple toma descrita por
Papanicolau sin hallarse anomalía alguna en las muestras
estudiadas.
■ Discusión
El espectro de la infección genital por VPH incluye
las infecciones asintomáticas y subclínicas, que necesitan
de estudios de hibridación y colposcópicos respectivamente
para ponerlas de manifiesto; las diversas formas
clínicas de verrugas anogenitales, que es la
presentación conocida de la infección; así como las
displasias intraepiteliales y carcinomas de pene, vulva,
cérvix y ano (4-7). Aunque los genotipos 16/18 son
los de mayor capacidad oncogénica, también parecen
tenerla los genotipos 31/35, 54 y otros en menor me-
Tabla 1
dida (8), estando ésta relacionada con la integración
de los mismos en el ADN celular. Esta integración se
produce tras la disrupción de los genes virales E1 y E2,
con eliminación de la expresión de este último, lo
que a su vez condiciona una disregulación de la expresión
de los genes E6 y E7 que codificarían una
transformación funcional maligna (9).
Muchos estudios implican al VPH en la carcinogénesis
femenina (10,11), y aunque la masculina ha recibido
menor atención, hay estudios epidemiológicos,
clínicos-anatomopatológicos, y de hibridación que relacionan
los VPH con el carcinoma de pene.
Entre los primeros convendría recordar:
- Las parejas de varones con carcinoma de pene
tienen mayor incidencia de carcinoma de cérvix, lo
que sugiere una etiología común (2).
- Ciertas áreas geográficas presentan un incremento
de la incidencia ambos procesos (12).
- La frecuencia de carcinoma de cérvix en mujeres
monógamas aumenta si los varones son promiscuos,
implicando a los hábitos sexuales del varón en la carcinogénesis
femenina (13).
- La frecuencia de carcinomas de cérvix es cuatro
veces superior en mujeres casadas con varones cuya
mujer anterior lo ha padecido (14).
El efecto protector de la circuncisión confirma el papel
de factores locales en el desarrollo de la neoplasia,
por la supresión de la zona más proclive a tener infeccion
subclínica (15), o por la cornificación subsiguiente
del epitelio del glande que es menor si se hace en adultos,
y disminuye por tanto el efecto protector (16,17).
El desarrollo de carcinoma de pene se han relacionado
con diversas enfermedades cutáneas como: liquen
plano (18), balanitis xerótica obliterans (19), balanitis
erosiva recidivante (17), condilomatosis gigante
de Buschke-Lowenstein, enfermedad de Bowen genital,
y la papulosis bowenoide, habiéndose detectado VPH
Autor Ref. Técnica Nº pac. VPH VPH VPH Ningún VPH
6/11 16/18 31/35
McCance 7 S-B 53 0 27 (51%) - 26 (49%)
Raju 24 DACPVH 20 - - - 20 (100%)
Villa 25 S-B 18 1 7 (39%) - 10 (56%)
Weaver 26 H.S. 9 0 1 (11%) 0 10 (89%)
Trabajo actual H.S. 4 0 1 (25%)* 2 (50%) 2 (50%)
* se detectó una infección mixta por genotipos 16/18 y 31/35
S-B : Southern-Blot
DACPVH. Detección de antígeno estructural común de VPH
H.S.: Hibridación in situ.

en los tres últimos procesos (20,21). Otro precursor es
el cuerno cutáneo de pene, de aparición excepcional,
asociado en el 37% de los casos a un carcinoma espinocelular
(22).
Se han descrito lesiones subclínicas de pene con
signos de neoplasia intraepitelial en las parejas del
32,8% de las mujeres con neoplasia intracervical; en
éstas se detectan casi exclusivamente VPH 16, 18 y 33
(23).
Por último, diversos autores han detectado ADN
de VPH en carcinoma de pene, siendo la frecuencia
de detección de genotipos variable dependiendo de
la técnica empleada y de factores geográficos (7,24-
26) (Tabla 1). McCance y cols, detectan VPH 16 de
forma integrada, en 26 de 53 muestras de pacientes
con carcinoma de pene (49%) y VPH 18 no integrado
en 5 (9%) (7); Raju y cols, cuestionan esta asociación
al no detectar antígeno común de VPH por
inmunohistoquímica en 20 carcinomas de pene, aunque
la sensibilidad de esta técnica es muy baja para
el estudio de lesiones neoplásicas, y el resultado por
tanto no valorable (24). Villa y cols, no lograron relacionar
la edad y el tiempo de evolución con la de-
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Carcinoma epidermoide de pene
tección viral (25). Debido al escaso número de copias
virales en las lesiones más indiferenciadas, métodos
de hibridación más sensibles como el Southern-Blot
(27), y la reacción en cadena de la
polimerasa (PCR), parecen los más apropiados para el
estudio de esta patología.
El papel de los genotipos 31/35 en la infección genital
por VPH ha sido relativamente poco estudiado.
Se detecta en un 15% de condilomas acuminados
(28), en un 15% de displasias cervicales de diverso
grado, y en un 5% de carcinomas de cérvix invasivos
(29), por lo que consideramos cuestionable su catalogación
como genotipos de malignidad media (30), al
ser muy semejantes los porcentajes de detección en
formas diversas de la infección genital por VPH. En lo
que respecta al carcinoma de pene, unicamente Weaver
y cols, han estudiado su presencia sin detectar en
ninguno de 9 carcinomas de pene (26).
La detección de VPH 31/35 en dos pacientes, en
uno como genotipo exclusivo, sugiere la conveniencia
de estudiarlo en series más amplias, preferentemente
con PCR, para delimitar con mayor precisión su posible
implicación en procesos neoplásicos.
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