Memorias 2ra Jornada de Medicinas Complementarias y su ...

iqueza florística, el potencial que se puede obtener de estas plantas se está
desperdiciando.
Por las razones arriba expuestas, es de nuestro interés estudiar la actividad anti-H.
pylori de las plantas utilizadas en la medicina tradicional mexicana contra la gastritis y
úlceras.
Como una primera aproximación a este estudio se decidió explorar la actividad de la
corteza de Amphipterygium adstringens (―cuachalalate‖), la cual es una de las plantas
mas utilizadas en México en el tratamiento de estas enfermedades y de la cual se han
realizado diversos estudios etnobotánicos, fitoquímicos y farmacológicos.
Objetivo General
Analizar el potencial anti-H. pylori in Vitro de la corteza de Amphipterygium
adstringens.
Objetivos particulares
1. Aislar e identificar los compuestos activos y probar su efecto in Vitro.
2. Determinar su toxicidad y analizar su acción sobre la bacteria.
Resultados y Discusión
La corteza molida de A. adstringens se sometió a una extracción continua (Soxhlet)
incrementando la polaridad de los solventes. La fracción de éter de petróleo tuvo la
mejor actividad anti-H. pylori (100% de inhibición con 160 g/ml). Esta fracción se
cargó en una columna de cromatografía de silica gel eluyéndose con un gradiente
creciente de polaridad con hexano/acetato de etilo. A partir de las fracciones obtenidas
se pudieron aislar los siguientes compuestos: los triterpenos: ácido masticadienónico,
ácido 3 -hidroximasticadienónico y ácido 3-epi-oleanólico; el esterol, -sitosterol y una
mezcla de ácidos anacárdicos (ácidos alquil fenólicos). Las estructuras de estos
compuestos fueron determinadas por comparación de sus constantes físicas y
espectroscópicas con muestras originales (Mata et al., 1991).
El análisis por GC/MS de la mezcla de ácidos anacárdicos metilados reveló que
estaba compuesta de 4 ácidos alquil fenólicos saturados: C15 (46.8%), C16 (7.2%),
C17 (29.9%) y C19 (7.5%) y uno con cadena monoinsaturada C19:1 (8.6%).
De los compuestos aislados, solo la mezcla de ácidos anacárdicos inhibió
completamente el crecimiento de H. pylori en cultivos líquidos, con una concentración
mínima inhibitoria (MIC) de 10 g/ml, valor comparable a los obtenidos para los
antibióticos de referencia metronidazol y amoxicilina. Estos ácidos ya habían sido
descritos en la planta pero no se les había atribuido ninguna actividad (Mata et al.,
1991). Por otra parte, el ácido 3-epi-oleanólico, uno de los compuestos responsables
de la actividad gastroprotectora de la corteza (Arrieta et al., 2003), inhibió el
crecimiento en un 70% con 50 g/ml.
La acción bactericida de la mezcla de ácidos anacárdicos se muestra en la Fig. 1, el
efecto es tiempo y dosis-dependiente, el número de bacterias viables decrece con el
tiempo de exposición a la mezcla obteniéndose la inhibición total en 15 h con 25 g/ml
y en solo 2 h con 50 g/ml. En la Fig. 1 también se muestra el efecto bactericida de
los antibióticos de referencia metronidazol y amoxicilina.
El análisis morfológico, por microscopía electrónica de transmisión (Fig. 2), de las
bacterias tratadas con 30 g/ml por 8 h con la mezcla de ácidos anacárdicos, mostró
células más pequeñas rodeadas por membranas discontinuas o rotas y en algunos
casos aparecen separadas de la pared celular (Fig. 2b). También se observa una gran
cantidad de membranas redondas y vacías, lo que es consistente con la pérdida de
viabilidad y con la disminución en la absorbencia de los cultivos.
Finalmente, los ensayos de toxicidad utilizando el método de MMT con linfocitos
humanos de sangre periférica, mostraron que la mezcla de ácidos anacárdicos, hasta
una concentración de 50 g/ml, no afecta la viabilidad de los linfocitos a las 3 y 24 h de
incubación y a las 48 h, se encontró un ligero efecto (6.3 a 12.8%) no dependiente de
la dosis.