Memorias 2ra Jornada de Medicinas Complementarias y su ...

Los exudados vegetales, son producidos por células y liberados sobre las superficies
de las plantas, usualmente como resultado de daños o infecciones de los tejidos
vegetales, incluyendo accidentes tales como: rayos, incendios o condiciones
ambientales extremas. Los exudados vegetales incluyen: resinas, gomas, gomaresinas
y látex. Las goma-resinas, poseen tanto carbohidratos como terpenos, o
sustancias extraíbles en fase acuosa y fase orgánica. 2
El género Eucalyptus, pertenece a la Familia Myrtaceae, que posee alrededor de 120
géneros con cerca de 3,000 especies originarias de zonas tropicales y subtropicales
de Australia, Asia y América. El Eucalyptus citriodora exuda de forma natural una
goma-resina, de color café, que fue recolectada en el Campus de la Universidad de El
Salvador. Pese a que este exudado es frecuente en esta especie vegetal, hasta el
momento no se ha reportado ningún estudio fitoquímico o antimicrobiano. Se
determinó, así, el tipo de exudado vegetal, se llevo a cabo el fraccionamiento
bioguiado, mediante la evaluación de la actividad antimicrobiana del extracto
diclorometánico y el procedente de la columna cromatográfica frente a Staphylococcus
aureus y Pseudomonas aeruginosa. Además, se realizó el tamizaje fitoquímico de las
fracciones procedentes de la columna cromatográfica por medio de Resonancia
Magnética Nuclear de Protón (RMN 1 H).
MATERIALES Y MÉTODOS
Material vegetal
La goma-resina de Eucalytus citriodora, se recolectó en el Campus de la Universidad
de El Salvador, en Mayo de 2005. Un ejemplar del vegetal esta depositado en el
Herbario del Jardín Botánico La Laguna, Antiguo Cuscatlán, La Libertad (WB-00579).
Las muestras de goma-resina se recolectaron en frascos de vidrio color ámbar y se
almacenaron en un lugar fresco y seco.
Preparación de extractos vegetales y fraccionamiento
La goma-resina, fue extraída con alcohol etílico en un Soxhlet, hasta agotamiento de la
muestra, a continuación, se realizó la partición líquido/líquido H2O/CH2Cl2,
obteniéndose el extracto acuoso y diclorometánico, posteriormente este, fue sometido
a una columna de cromatografía flash, con gradiente de n-hexano: acetato de etilo
10%, 30%, 50%, 70%, acetato de etilo y por último lavada con metanol puro,
obteniéndose seis fracciones.
Resonancia Magnética Nuclear
Los espectros de Resonancia Magnética Nuclear de Protón (RMN 1 H, 300 MHz) fueron
realizados con un espectrofotómetro Bruker Avance 300. Las muestras se disolvieron
en CDCl3, CD3COCD3 y CD3OD, según cada caso particular, utilizando tetrametilsilano
(TMS) como referencia externa.
Actividad antimicrobiana
El extracto diclorometánico crudo y las fracciones obtenidas de la columna
cromatográfica, fueron evaluadas frente a Staphylococcus aureus (Gram positiva,
ATCC 259230), Pseudomonas aeruginosa (Gram negativa, ATCC 27853) y
Estreptococcus pneumoniae (Gram positiva, ATCC 49619) mediante el método Kirby
Bauer Modificado (Método de Cilindro en Placa). 3
Este análisis permite evaluar la sensibilidad o resistencia de un microorganismo ante
una sustancia determinada, mediante la presencia o ausencia de halos de inhibición
alrededor de un cilindro conteniendo el extracto a ensayar.
Las bacterias ensayadas se clasificaron como resistentes o susceptibles a una
determinada concentración del extracto o fracción, de acuerdo a valores
preestablecidos para cada bacteria con su antibiótico de referencia. Se realizaron
controles positivos con discos de gentamicina y penicilina, y el control negativo del
solvente utilizado (etanol 70%).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Tamizaje fitoquímico
El tipo de exudado vegetal obtenido de Eucalyptus citriodora, fue determinado por
medio del análisis de la fase acuosa de la partición líquido/líquido H2O/CH2Cl2, donde