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PRÁCTICA 3. ANÁLISIS CUALITATIVO DE DOS ENZIMAS EN LA PARED Introducción CELULAR (PC) DE FRUTOS DE CHILE. Durante el proceso de maduración en frutos de chile, ocurren cambios en tasas de respiración, producción de etileno, contenido de clorofila y contenido de azúcares, así como el deterioro de las paredes celulares. La PC se compone de 30% de celulosa, 30% de hemicelulosa, 30% de pectina y 5-10% de proteínas. La mayoría de las enzimas de la PC son hidrolasas como la celulasa, polygalacturonasa y la galactosidasa. La polygalacturonasa y la β-galactosidasa actúan en la fracción de péctica de la PC. La celulasa degrada la celulosa. Objetivos • Analizar cualitativamente la celulasa y polygalacturonasa via sustrato para Materiales las enzimas que contengan agarosa y después por el proceso de tinción. • Placas de agarosa (1%) con celulosa carboximetílica (CMC, 0.1%) o ácido poligalacturónico (0.1%). • Homogenizados de chile. • Agua destilada. • Micropipetas (1000 ul) • Puntas para micropipetas. • Tinción rojo congo (0.1%) para celulosa. • Tinción rojo ruthenium (0.1%) para poligalacturonasa. • Tapones de corcho. • Na2CO3 (1M) • Celulasa (2%) y pectinasa (1%). 11
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