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CRIBADO PENTAVALENTE SAS-1ARTÍCULOS NECESARIOS NO SUMINISTRADOSNº Cat. 210200 Aplicadores de muestras 1 x 10Nº Cat. 210300 Aplicadores de muestras 5 x 10N.° Cat. 321200 Antisuero pentavalente (para muestras de orina y suero) 3 mlN.° Cat. 321300 Antisuero pentavalente (para muestras de orina y suero) 10 x 3 mlNº de catálogo 210100 Vasos de recogida de muestras desechables 100Nº Cat. 3100 REP PrepRECOGIDA Y PREPARACIÓN DE MUESTRASSe ha de elegir como muestra suero u orina recién recogidos. Aunque las muestras de suero puedenalmacenarse 4 días a 15 - 30°C, 2 semanas a 2 - 6°C, ó 6 meses a -20°C para un modelo estándar de5 bandas6, la banda beta 2-globulina (Complemento C3) se degradará rápidamente al almacenarse. Lasmuestras pueden guardarse refrigeradas a 2 - 6°C hasta 72 horas o 2 semanas a -20°C. Inicialmente,las muestras de orina se utilizarán sin concentración ni dilución, a no ser que se sepa que las proteínastotales excedan los 1.000 mg/l.PROCEDIMIENTO PASO A PASO1. ORINA: Con una pipeta, introducir 35 µl de la muestra en los vasos de recogida de muestrasdesechables adecuados. Proteger las muestras de la evaporación.SUERO: Diluir cada muestra a una dilución 1 + 2, usando diluyente de IFE. Con una pipeta,introducir 35 µl de la muestra en los vasos de recogida de muestras desechables apropiados.Proteger las muestras de la evaporación.2. Encender la unidad de electroforesis y:i) Usuarios de SAS-1 Plus: Colocar cuidadosamente la bandeja con la muestra en la gaveta delaplicador. Asegurarse de que la bandeja está firmemente introducida en su posición.ii) Usuarios de SAS-3: Colocar cuidadosamente la bandeja con la muestra utilizando los pasadores delocalización de la base de la muestra. Asegurarse de que la bandeja está en una posición segura.3. Sacar el gel del envase y:i) Usuarios de SAS-1 Plus: pipetear 400 µL de REP Prep en el disipador térmico. Colocar el gel enel disipador térmico, con el lado de agarosa hacia arriba, alineando los lados positivo y negativo conlos bordes, teniendo cuidado de evitar las burbujas de aire debajo del gel.ii) Usuarios de SAS-3: colocar la guía de alineación en los pasadores y administrar 400 µL de REP Prepen el centro de la cámara. Colocar el gel en la cámara con la agarosa hacia arriba, utilizar la guíapara alinear los lados positivo y negativo con los bordes, teniendo cuidado de evitar las burbujasde aire debajo del gel.4. Secar la superficie del gel con un secante C y luego desechar el secante.5. i) Usuarios de SAS-1 Plus: Colocar la cubierta sobre el gel y los electrodos, presionar con firmezadurante 5 segundos para asegurar un buen contacto.ii) Usuarios de SAS-3: conectar los electrodos a los bordes, de forma que estén en contacto conlos bloques de gel.6. Colocar 2 unidades de aplicadores en la posición del instrumento (usuarios de SAS-3: ranuras A y10).7. Realizar la electroforesis de cribado pentavalente:i) Usuarios de SAS-1 Plus: Electroforesis: 100 Voltios, 18 mins, 20°CPaso de incubación 1: 8 min., 37°C (incubar)Paso de incubación 2: 8 min., 40°C (secado D)27Español