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2.1.2. Estudios <strong>de</strong> clonalidad <strong>en</strong> síndromes linfoproliferativosLos estudios <strong>de</strong> clonalidad <strong>en</strong> síndromes linfoproliferativos crónicos (SLPC) seanalizan según el protocolo <strong>de</strong>l grupo BIOMED-2 (Leukemia 2003; 17:2257-2317).2.1.2.1. Reor<strong>de</strong>nami<strong>en</strong>to <strong>de</strong> la ca<strong>de</strong>na pesada <strong>de</strong>l g<strong>en</strong> <strong>de</strong> las inmunoglobulinas:• Se analiza a petición <strong>de</strong>l usuario el reor<strong>de</strong>nami<strong>en</strong>to VH-JHestudiando las regiones FR1, FR2 o FR3 <strong>de</strong> la región VH <strong>de</strong> la ca<strong>de</strong>napesada <strong>de</strong> las inmunoglobulinas.2.1.2.2. Reor<strong>de</strong>nami<strong>en</strong>to <strong>de</strong>l receptor <strong>de</strong> células T (TCR):• TCR beta: se analiza el reor<strong>de</strong>nami<strong>en</strong>to Vβ-Jβ.• TCR gamma: se analiza el reor<strong>de</strong>nami<strong>en</strong>to Vγ-Jγ.2.1.2.3. Reor<strong>de</strong>nami<strong>en</strong>to BCL1-IgH, t(11;14)(q13;q32):Se analiza el reor<strong>de</strong>nami<strong>en</strong>to <strong>en</strong>tre la región MTC (major translocationcluster) <strong>de</strong>l g<strong>en</strong> BCL1 y la región JH <strong>de</strong>l g<strong>en</strong> <strong>de</strong> las Ig.2.1.2.4. Reor<strong>de</strong>nami<strong>en</strong>to BCL2-IgH, t(14;18)(q32;q21):• Región MBR (major breakpoint region)• Regiones mcr (minor breakpoint region) y 5’mcr2.1.3. Estudio <strong>de</strong> mutaciones2.1.3.1. Mutación V617F <strong>de</strong>l g<strong>en</strong> JAK2 <strong>en</strong> SMPC:Se realiza una PCR alelo-específica o bi<strong>en</strong> una PCR mediante sondas <strong>de</strong>hibridación (Taqman®).2.1.3.2. Mutación T315I <strong>de</strong>l g<strong>en</strong> ABL:Se realiza una RT-PCR alelo-específica.2.1.3.3. Mutación D816 <strong>de</strong>l g<strong>en</strong> KIT:Se realiza una PCR con sondas <strong>de</strong> hibridación específicas.2.1.3.4. Duplicación interna <strong>en</strong> tán<strong>de</strong>m <strong>de</strong>l g<strong>en</strong> FLT3 <strong>en</strong> LMA:Se realiza una PCR o RT-PCR y análisis mediante gel <strong>de</strong> agarosa olectura por G<strong>en</strong>escan. Cálculo <strong>de</strong> la ratio alelo mutado/germinal.2.1.3.5. Mutaciones puntuales <strong>de</strong>l g<strong>en</strong> FLT3:Se realiza una PCR y posterior digestión <strong>de</strong>l producto amplificado conuna <strong>en</strong>zima <strong>de</strong> restricción (Eco V).