Contenido de hidroxiprolina del amnios y rotura de membranas ...

R.I.J. MacDermott, et al. / European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology (Ed. Española) 2001; 1: 156-160 157do de hidroxiprolina en casos de RPM [3]. Algunos estudioshan muestreado el amnios [2, 3, 5, 6] y otros el corioamnios[1, 4].Algunos investigadores han estudiado sólo membranasde gestaciones a término [1, 5] y otros, membranas detodas las gestaciones [2-4, 6]. Algunos han tomado muestrasde cerca de la zona de rotura [3-6], otros de una zonadistante a la zona de rotura [4, 6], y otros no han reseñadola zona de muestreo [1, 2]. El contenido de hidroxiprolinase ha medido por unidad de peso [2-6] y por unidad de áreade membrana [1]. A la vista de los resultados contradictoriosde los distintos estudios, se consideró apropiado hacerun nuevo estudio. El amnios es considerablemente másfuerte que el corion [8] y su contenido de hidroxiprolina esmás del doble [9]. Por estas razones, se midió el contenidode hidroxiprolina del amnios. El contenido de hidroxiprolinadel amnios en la zona adyacente a la zona de roturamuestra variaciones grandes [6] y, por tanto, se tomaronmuestras de una zona distante a la zona de rotura. El contenidode hidroxiprolina se midió por unidad de peso secoy por unidad de superficie de amnios. El objetivo del estudiofue determinar si la RPM se asocia con una reduccióngeneralizada del contenido de hidroxiprolina del amnios.Se determinaron y se ajustaron los factores contaminantespotenciales. Se investigó la relación entre varios parámetrosde la fuerza amniótica y el contenido de hidroxiprolina.MétodosSe recogieron las membranas fetales de 133 mujeres,entre las 21 y 45 semanas de gestación, a las 3 horas delparto. La distribución de los casos, de acuerdo a la gestacióny al momento de la rotura de las membranas, se muestraen la tabla 1. Se definió como RPM la confirmación depérdida de líquido por la vagina antes del comienzo del trabajodel parto.Se consideró como rotura de membranas en su tiempo larotura de membranas espontánea después de una dilatacióncervical de 4 cm. Se tomaron muestras también de amniosde mujeres que se iban a someter a cesárea. Se utilizaronlos datos menstruales, a menos que difirireran de los ecográficosen más de siete días. Se definió como parto a términoel parto que se producía a las 38 semanas o más degestación.La muestra del amnios de una zona distante a la zona derotura se almacenó a -20ºC hasta su análisis. En 80 casosse obtuvo una muestra de una área conocida (80 mm x 6mm) usando un estilete de acero.El amnios se liofilizó y se pesó antes de la hidrólisis con0,75 ml de ácido hidroclórico 6 N, a 110ºC durante 24horas. Se utilizó cloramina T para oxidar la hidroxiprolinaa pirrol y ácido carboxílico-pirrol 2. Estos productos sehicieron reaccionar con 4-dimetil-amino-benzaldehido enpropano-2-ol y ácido perclórico para formar un complejocoloreado rojo, y se midió su absorbancia a 560 nm, usandoun analizador de flujo continuo. El resultado análogoobtenido se leyó manualmente usando un gráfico calibradofrente a una solución acuosa estándar de hidroxiprolina. Elcontenido de hidroxiprolina se calculó por mg de peso secode amnios y por cm 2 de amnios (cuando se conocía el áreadel amnios).Se midió la fuerza de varias muestras de amnios de lasmismas membranas usando una prueba de distensibilidad(Diastron Ltd. Camberley, Surrey, Reino Unido). Elamnios se mantuvo hidratado con solución salina y se cortaronmuestras que medían 80 mm x 6 mm de anchura,usando un estilete de acero. Las muestras se colocaron enpinzas de 10 mm de profundidad del dispositivo de pruebade la elasticidad, para dar un tamaño de prueba de 60mm x 6 mm.Las muestras se distendieron en intervalos de 60mm/min hasta que se produjo la rotura. Todas las pruebasse realizaron a las 4 horas del parto. Los siguientes parámetrosse obtuvieron por análisis de ordenador de sobrecurva resultante de carga frente a tensión (CCFT): cargamáxima, tensión máxima, pendiente de CCFT (medida dela elasticidad) y área bajo la CCFT (medida de trabajonecesario para romper el amnios).Se tomaron muestras pareadas en un número limitado decasos para valorar la variación del contenido de hidroxi-Tabla 1La distribución de los casos de acuerdo a la gestación y el momento de la rotura de membranasMomento de la ruptura Gestación HP/mg amnios HP/cm 2 amnios(n=133)(n=80)Rotura de membrana en su tiempo A término 27 11Pretérmino 23 14RPM A término 19 12Pretérmino 36 22Cesárea programada A término 12 9Pretérmino 16 12