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NMX-AA-087-1995-SCFI10.5.1 Lavar el material con detergente y enjuagar dos veces con agua de la llave.10.5.2 Enjuagar el material con ácido nítrico (HN3) al as30 % para eliminarresiduos metálicos. Enjuagar con agua desionizada escurrir.10.5.3 Enjuagar con acetona (C3 H6 O) para eliminar residuos orgánicos . Enjuagarcon agua desionizada. Dejar secar completamente.Esta serie de lavado tienen que llevarse a cabo de 24 h a 48 h antes del bioensayo,protegiendo el material de polvo y otros factores.10.5.4 Enjuagar perfectamente con agua reconstituida.10.5.5 Minutos antes de iniciar el bioensayo, enjuagar los recipientes que van acontener a los organismos con agua reconstituida.El uso del agua reconstituida es necesario porque:- Es de composición química conocida.- Permite resultados reproducibles.- Permite crecimiento y reproducción adecuada.Para Daphnia magna se utiliza agua reconstituida cuya dureza sea de 160 mg/L a 180 mg/Ly el pH entre 7,5 y 8,5 . Su preparación debe efectuarse al menos con 72 h de anticipación,cuidando que se efectúe tal y como se indica en el punto siguiente, ya que de ello dependeen gran parte tanto el cultivo óptimo de los organismos como la culminación exitosa de laprueba.10.5.5.1 PreparaciónColocar 19 L de agua destilada o desionizada en un garrafón de vidrio de 20 Lperfectamente limpio. Cualquiera que sea el tipo de agua seleccionado, debe utilizarsedurante todo el proceso y cada vez que se realice la prueba. Asimismo, es necesarioindicarlo en los resultados.Agregar 2,4 g de sulfato de magnesio (MgSO4) ; 3,48 g de bicarbonato de sodio (NaHCO3)y 0,16 g de cloruro de potasio (KCl) al recipiente en el orden respectivo.Agregar 2,4 g de sulfato de calcio (CaSO4 – 2H2O) a 1000 ml de agua destilada odesionizada en un matraz Erlenmeyer de 1000 ml. Colocar la solución sobre un agitadormagnético hasta que el sulfato de calcio (CaSO4 – 2H2O) esté completamente disuelto.Adicionar a los 19 L preparados con anterioridad y mezclar perfectamente. Adicionar 20 µgde selenito de sodio (Na2SeO3). Airar por lo menos 24 h.